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1、会计学1酶的特性实验酶的特性实验n n二、器材：二、器材：1)1)试管及试管架试管及试管架2)2)恒温水浴恒温水浴3)3)冰浴冰浴4)4)沸水浴沸水浴三、试剂和材料：三、试剂和材料：1)含0.2淀粉的0.3NaCl溶液150ml，需新鲜配制 2)稀释200倍的唾液50ml：用蒸馏水漱口，以清除事物残渣，再含一口蒸馏水，半分钟后使其流入量筒并稀释200倍，混匀备用。3)KI碘溶液50ml：将KI20g及碘10g溶于100ml水中。使用前稀释10倍。第1页/共13页n n四、操作方法：淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色
2、、暗褐色或红色。最简单的糊精遇遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现粉被唾液淀粉酶水解的程度，可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。的颜色来判断。取三支试管，编号后按下表加入试剂：取三支试管，编号后按下表加入试剂：管号管号123淀粉溶液淀粉溶液（ml）1.51.51.5稀释唾液稀释唾液（ml）11煮沸过的稀释煮沸过的稀释唾液（唾液（ml）第2页/共13页n n 摇匀后，将1号、3号两试管放入37 恒温水浴中，2号试管放入冰中，10min后去处，
3、（将2号管内液体分为两半）用KI碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果，将2号管剩下的一半溶液放入37水浴中继续保温10min后，再用碘液实验，结果如何？第3页/共13页pH对酶活性的影响对酶活性的影响n n一、原理一、原理 酶的活力受环境酶的活力受环境pHpH的影响极为显著。不同酶的最适的影响极为显著。不同酶的最适pHpH值不同。本实验观值不同。本实验观察察pHpH对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适pHpH约为约为6.86.8。n n二、器材二、器材1)1)试管及试管架试管及试管架2)2)吸管吸管3)3)滴管滴管4)
4、4)50ml50ml锥形瓶锥形瓶5)5)恒温水浴恒温水浴n n三、试剂和材料三、试剂和材料1)1)新配制的溶于新配制的溶于0.30.3NaClNaCl的的0.50.5淀粉溶液淀粉溶液 250ml250ml2)2)稀释稀释200200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 100ml100ml3)3)0.2mol/L0.2mol/L磷酸氢二钠溶液磷酸氢二钠溶液 600ml600ml4)4)0.1mol/L0.1mol/L柠檬酸溶液柠檬酸溶液 400ml400ml5)5)KIKI碘溶液碘溶液 50ml50ml6)6)pHpH试纸：试纸：pH=5pH=5、pH=5.8pH=5.8、pH=6.8pH=6.8、pH=
5、8pH=8四种四种第4页/共13页n n四、操作方法：四、操作方法：取四个标有号码的取四个标有号码的50ml50ml锥形瓶。用吸管按下表添锥形瓶。用吸管按下表添加加0.2mol/L0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和磷酸氢二钠溶液和0.10.1柠檬酸溶液以制备柠檬酸溶液以制备pH5.0pH5.08.08.0的四种缓冲液。的四种缓冲液。从四个锥形瓶中各取缓冲液从四个锥形瓶中各取缓冲液3ml3ml，分别注入，分别注入4 4支带支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.50.5淀粉淀粉溶液溶液2ml2ml和稀释和稀释200200倍的唾液倍的唾液2ml2ml。向各试管
6、中加入稀。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为释唾液的时间间隔各为1min1min。将各试管内容物混匀，。将各试管内容物混匀，并依次置于并依次置于37 37 恒温水浴中保温。恒温水浴中保温。第四管加入唾液第四管加入唾液2min2min后，每隔后，每隔1min1min由第由第3 3管取出一滴管取出一滴混和液，置于白瓷板上，加混和液，置于白瓷板上，加1 1小滴小滴KIKI碘溶液，检碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向所验淀粉的水解程度。待混和液变为棕黄色时，向所有试管依次添加有试管依次添加1 12 2滴滴KIKI碘溶液。添加碘溶液。添加KIKI碘溶碘溶液的时间间隔从第一管起，亦均为
7、液的时间间隔从第一管起，亦均为1min1min。观察各试管内容物呈现的颜色，分析观察各试管内容物呈现的颜色，分析pHpH对唾液对唾液淀粉酶活性的影响。淀粉酶活性的影响。第5页/共13页锥形瓶锥形瓶号码号码0.2mol/L磷酸氢二磷酸氢二钠（钠（ml）0.1 mol/L柠柠檬酸（檬酸（ml）pH15.154.855.026.053.955.837.722.286.849.720.288.0第6页/共13页唾液淀粉酶的活化和抑唾液淀粉酶的活化和抑制制n n一、原理一、原理 酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活性受活化剂或抑制剂的影响。氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。
8、酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。n n二、器材：二、器材：1)1)恒温水浴恒温水浴2)2)试管及试管架试管及试管架n n三、试剂和材料：三、试剂和材料：1)1)0.10.1的淀粉溶液的淀粉溶液 150ml150ml2)2)稀释稀释200200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 150ml150ml3)3)1 1NaClNaCl溶液溶液 50ml50ml4)4)1 1硫酸铜溶液硫酸铜溶液 50ml50ml5)5)1 1硫酸钠溶液硫酸钠溶液 50ml50ml6)6)KIKI碘溶液碘溶液 100ml100ml 第7页/共13页n n四、操作方法：管号管号12340.1的淀粉溶液（的淀粉溶液（ml）1.51.51
9、.51.5稀释唾液（稀释唾液（ml）0.50.50.50.51硫酸铜溶液（硫酸铜溶液（ml）0.51NaCl溶液（溶液（ml）0.51硫酸钠溶液（硫酸钠溶液（ml）0.5蒸馏水（蒸馏水（ml）0.537 恒温水浴、保温恒温水浴、保温10minKI碘溶液（滴）碘溶液（滴）23232323现象现象注：保温时间可根据各人唾液淀粉酶活力调整解释说明，说明本实验第3管的意义第8页/共13页酶的专一性酶的专一性n n一、原理 酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶的作用为例，来说明酶的专一性。淀粉和蔗糖无还原性，唾液淀粉酶水解淀粉生成由还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生
10、还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用Benedict试剂检查糖的还原性。第9页/共13页n n二、器材：二、器材：1)1)恒温水浴恒温水浴2)2)沸水浴沸水浴3)3)试管及试管架试管及试管架n n三、试剂和材料：三、试剂和材料：1)1)2 2蔗糖溶液蔗糖溶液 150ml150ml2)2)溶于溶于0.30.3NaClNaCl的的1 1淀粉溶液（需新鲜配制）淀粉溶液（需新鲜配制）150ml150ml3)3)稀释稀释200200倍的新鲜唾液倍的新鲜唾液 100ml100ml4)4)蔗糖酶溶液蔗糖酶溶液 100ml100ml 将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤将啤酒厂的鲜酵母用水洗涤2 23 3次（离心
11、），然后放在滤纸上自然次（离心），然后放在滤纸上自然干燥。取干酵母干燥。取干酵母100g100g，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，置于乳钵内，添加适量蒸馏水及少量细沙，用力研磨，提取约用力研磨，提取约1h1h，再加蒸馏水使总体积约为原体积的，再加蒸馏水使总体积约为原体积的1010倍。倍。离心，将上清液保存于冰箱中备用。离心，将上清液保存于冰箱中备用。5)5)BenedictBenedict氏试剂氏试剂 200ml200ml 无水硫酸铜无水硫酸铜1.74g1.74g溶于溶于100ml100ml热水中，冷却后稀释至热水中，冷却后稀释至150ml150ml。取柠檬酸。取柠檬酸钠钠173g173
12、g，无水碳酸钠，无水碳酸钠100g100g和和600ml600ml水共热，溶解后冷却并加水至水共热，溶解后冷却并加水至850ml850ml。再将冷却的。再将冷却的150ml150ml硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。硫酸铜溶液倾入。本试剂可长久保存。第10页/共13页n n四、操作方法：1.1.淀粉酶的专一性：淀粉酶的专一性：管号管号1234561淀粉溶液（滴）淀粉溶液（滴）4442蔗糖溶液（滴）蔗糖溶液（滴）444稀释唾液（稀释唾液（ml）11煮沸过的稀释唾液煮沸过的稀释唾液（ml）11蒸馏水（蒸馏水（ml）1137 恒温水浴恒温水浴15minBenedict试剂（试剂（ml）111111沸水浴沸水浴23min现象现象 解释实验结果（提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶）解释实验结果（提示：唾液除含淀粉酶外还含有少量麦芽糖酶）第11页/共13页2.2.蔗糖酶的专一性：蔗糖酶的专一性：管号管号1234561淀粉溶液（滴）淀粉溶液（滴）4442蔗糖溶液（滴）蔗糖溶液（滴）444蔗糖酶溶液（蔗糖酶溶液（ml）11煮沸过的蔗糖酶溶液煮沸过的蔗糖酶溶液（ml）11蒸馏水（蒸馏水（ml）1137 恒温水浴恒温水浴15minBenedict试剂（试剂（ml）111111沸水浴沸水浴23min现象现象 解释实验结果解释实验结果第12页/共13页