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1、酶的特性实验酶的特性实验一、目的酶是生物催化剂，生物体内化学反应基本上都是在酶的催化下进行的。通过本实验了 解酶催化的特异性以及pH、温度、抑制剂和激活剂对酶活力的影响，对于进一步掌握代谢 反应及其调控机理具有十分重要的意义。二、实验原理酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度特异（专一）性，即一种酶只能对一 种底物或一类底物（此类底物在结构上通常具有相同的化学键）起催化作用，对其他底物 无催化反应。例如，淀粉酶和蔗糖酶虽然都是催化糖昔键的水解，但是淀粉酶只对淀粉起 作用，蔗糖酶只水解蔗糖。还原糖产物可用班乃德试剂鉴定。通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的差异
2、，说 明这些环境因素与酶活性的关系。唾液淀粉酶对淀粉的水解过程如下：淀粉蓝色糊精红色糊精无色糊精麦芽糖与碘反应：蓝色 蓝紫色 红色 无色 无色PH8.0磷酸缓冲液(ml)0031%淀粉溶液(ml)111稀释唾液(ml)111结果(颜色)摇匀，置37。(：水浴中继续反应2分钟,每隔1分钟从第2号管中取出1滴反应液于 比色板上，加碘液检查反应进行情况，直至反应液不再变色，即可停止反应，取出所有试 管，并向个试管内加入2滴碘液，充分混匀，检查并记录各管颜色，解释PH对酶活性的 影响。(四X激活剂和抑制剂对酶活性的影响取3支试管，按下表操作：操作项目管号1231% CuS04(ml)101% NaCI
3、(ml)10蒸储水(ml)001稀释唾液(ml)1110.1%淀粉溶液(ml)2结果(颜色)摇匀，置37水浴反应lmin左右即可用碘液检查2号试管淀粉水解程度，待2号试 管的反应液不再变色时取出所有试管，并向各管内加入碘液1-2滴，观察并记录各管颜色, 解释结果。五、注意事项(1)各人唾液中淀粉酶活力不同，因此实验2、3、4应随时检查反应进行情况。如 反应进行得太快，应适当稀释唾液；反之，则应减少唾液淀粉酶稀释倍数。(2 )酶的抑制与激活最好用经透析的唾液，因为唾液中含有少量Cl-O另外，注意不要在检查反应程度时使各管溶液混杂。三、试剂和器材(-X试剂1、2%蔗糖溶液：用分析纯蔗糖新鲜配制。2
4、、0.5%淀粉溶液(二X材料(1)唾液淀粉酶溶液：先用蒸储水漱口，再含10ml左右蒸僧水，轻轻漱动，2分钟后 吐出收集在烧杯中，纱布过滤，即得清澈的唾液淀粉酶原液，根据酶活高低稀释50倍， 即为唾液淀粉酶溶液。(2)蔗糖酶溶液：取1g鲜酵母或干酵母放入研钵中，取蒸储水12ml ,分次加入，边 加边研磨约10钟，用漏斗加滤纸过滤，滤液加2倍蒸储水稀释。(三X仪器恒温水浴(37 X沸水浴(10CTC 冰浴(0 X试管、吸管、2ml、5ml、量筒、 比色板、胶头滴管等。四、操作方法(-X酶催化的专一性取6支干净试管，按下表操作：操作项目管号1234560.5% 淀粉(ml)1102%蔗糖(ml)00
5、1101稀释唾液(ml)100蔗糖酶溶液(ml)010100蒸储水(ml)011酶促水解摇匀，37。(：水浴中保温10-15min班乃德试剂(ml)2222反应摇匀，沸水浴中加热5lOmin结果（颜色）（二X温度对酶活力的影响取3支试管，按下表操作：操作项目管号1230.5%淀粉溶液（ml）2稀释唾液(ml)111温度预处理5min ( )037沸水浴结果摇匀，保持各自温度继续反应，5分钟后每隔1分钟从第2号管吸取1滴反应液于比 色板上，用碘液检查反应进行情况，直至反应液不再变色(只有碘液的颜色)，立即取出所 有试管，流水冷却2min ,向各管加入碘液2滴，混匀。观察并记录各管反应现象，解释 之。(三)、pH对酶活力的影响管号123PH5.0磷酸缓冲液(ml)300pH6.8磷酸缓冲液(ml)0