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1、第2讲微生物的培养与应用考纲要求目录Contents考点一微生物的实验室培养考点二微生物的筛选与计数课堂练真题明高考规律课下练模拟试自身能力微生物的实验室培养考点一编编号号成分成分(NH4)HCO3KH2PO4CaSO4FeCl2维维生素生素水水含量含量0.5 g3.0 g0.5 g0.5 g少少许许1 000 mL成分成分牛肉膏牛肉膏蛋白蛋白胨胨NaClH2O含量含量0.5 g1 g0.5 g100 mL编编号号成分成分(NH4)2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL微生物分离、微生物分离、鉴鉴定，定，活菌活菌计计数，菌种保
2、藏数，菌种保藏加凝固加凝固剂剂(如琼脂如琼脂)固体培养基固体培养基观观察微生物的运察微生物的运动动、分分类鉴类鉴定定加凝固加凝固剂剂(如琼脂如琼脂)半固体半固体培养基培养基工工业业生生产产不加凝固不加凝固剂剂液体培养基液体培养基用途用途特点特点培养基种培养基种类类用用伊伊红红美美蓝蓝培培养养基基鉴鉴别别大大肠肠杆菌杆菌鉴鉴别别不不同同种种类类的微生物的微生物产产生生特特定定的的颜颜色色或或其其他他变变化化培培养养基基中中加加入入某某种种指指示示剂剂或或化化学学药药品品鉴鉴别别培培养养基基加加入入青青霉霉素素分分离离得得到到酵酵母菌和霉菌母菌和霉菌从从众众多多微微生生物物中中分分离离所所需的微生
3、物需的微生物依依据据某某些些微微生生物物对对某某些些物物质质的的特特殊殊需需求求或或抗抗性性而而设计设计培培养养基基中中加加入入某某些些化化学学物物质质选选择择培培养养基基举举例例用途用途原理原理制制备备方法方法种种类类高高压压蒸蒸汽汽灭灭菌菌法法干干热热灭灭菌法菌法灼灼烧烧灭灭菌法菌法化学化学药药剂剂消毒消毒法法巴氏巴氏消毒法消毒法煮沸煮沸消毒法消毒法常用常用方法方法杀杀死死物物体体内内外外所所有有的的微微生物，包括芽生物，包括芽孢孢和和孢孢子子仅仅杀杀死死物物体体表表面面或或内内部部的的部部分分微微生生物物(不不包包括括芽芽孢和孢子孢和孢子)结结果果强强烈的理化因素烈的理化因素较较为为温温
4、和和的的物物理理或或化化学学方法方法条件条件灭灭菌菌消毒消毒项项目目培养基培养基及容器及容器的的灭灭菌菌玻玻璃璃器器皿皿、金属工具金属工具接种接种工具工具用酒精用酒精擦拭双擦拭双手，用手，用氯氯气消气消毒水源毒水源不耐高不耐高温的液温的液体体日常日常用品用品应应用用范范围围高高压压蒸汽蒸汽灭灭菌菌锅锅，恒温恒温121，维维持持1530 min干干热灭热灭菌菌箱，箱，60170 ，维维持持12 h酒精酒精灯火灯火焰的焰的外焰外焰70%酒酒精、精、氯氯气等气等80 煮煮15 min或在或在7075 煮煮30 min100 煮沸煮沸56min使用使用条件条件灭灭菌菌消毒消毒项项目目操作复操作复杂杂，
5、需要涂布多个平板，需要涂布多个平板不能不能对对微生物微生物计计数数缺点缺点既既可可以以获获得得单单细细胞胞菌菌落落，又又能能对对微生物微生物计计数数可以根据菌落的特点可以根据菌落的特点获获得某种微生物的得某种微生物的单细单细胞胞菌落菌落优优点点适用于适用于厌厌氧菌和兼性氧菌和兼性厌厌氧菌氧菌适用于好氧菌适用于好氧菌适用适用范范围围从从适适宜宜的的稀稀释释度度的的平平板板上上的的菌菌落中挑取菌体落中挑取菌体在具有在具有显显著的菌落特征著的菌落特征的区域菌落中挑取菌体的区域菌落中挑取菌体菌体菌体获获取取稀稀释释度度要要足足够够高高，为为确确保保实实验验成功可以增加稀成功可以增加稀释释度的范度的范围
6、围每次划每次划线线前后均需灼前后均需灼烧烧接种接种环环注意注意事事项项一系列的梯度稀一系列的梯度稀释释涂布平板法操作涂布平板法操作接种接种环环在固体平板培养在固体平板培养基表面基表面连续连续划划线线关关键键操作操作稀稀释释涂布平板法涂布平板法平板划平板划线线法法项项目目杀杀死接种死接种环环上残上残存的菌种，避免存的菌种，避免微生物微生物污污染染环环境境和感染操作者和感染操作者杀杀死上次划死上次划线线后接种后接种环环上残留的菌种，使上残留的菌种，使下次划下次划线线的菌种直接的菌种直接来源于上次划来源于上次划线线的末的末端，使每次划端，使每次划线线菌种菌种数目减少数目减少杀杀死接种死接种环环上原有
7、的微上原有的微生物生物目目的的划划线结线结束束每次划每次划线线之前之前第一次操作第一次操作微生物的筛选与计数考点 二解析解析酵母膏酵母膏无机无机盐盐 淀粉淀粉纤维纤维素粉素粉琼琼脂脂 CR溶液溶液水水培养基甲培养基甲培养基乙培养基乙利用利用鉴别鉴别培养基使目的微生物菌落呈培养基使目的微生物菌落呈现现特有的特有的特征，然后特征，然后筛选筛选目的微生物目的微生物鉴鉴定定培养法培养法利用利用选择选择培养基培养基对对微生物微生物进进行行选择选择培养，直接培养，直接获获得目的微生物得目的微生物选择选择培养法培养法利用平板划利用平板划线线法或稀法或稀释释涂布平板法接种到固体涂布平板法接种到固体平板培养基表
8、面，直接根据微生物菌落的特征平板培养基表面，直接根据微生物菌落的特征利用利用单单菌落挑取的方法菌落挑取的方法获获得目的微生物得目的微生物单单菌落菌落挑取法挑取法如利用如利用刚刚果果红红染色法，根据培养基中出染色法，根据培养基中出现现以以纤维纤维素分解菌素分解菌为为中心的透明圈来中心的透明圈来筛选筛选分解分解纤维纤维素的微素的微生物生物染色染色鉴别鉴别法法如培养基中加入酚如培养基中加入酚红红指示指示剂剂，培养某种微生物后，培养某种微生物后，培养基培养基变红说变红说明明该该种微生物能种微生物能够够分解尿素分解尿素指示指示剂剂鉴别鉴别法法根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的根据微生物在固体平板培养基表面形成的菌落的形状、大小、隆起程度和形状、大小、隆起程度和颜颜色等特征色等特征进进行行鉴别鉴别菌落特征菌落特征鉴别鉴别法法解析解析