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1、实验十二微生物大小测定 Still waters run deep.流静水深流静水深,人静心深人静心深 Where there is life,there is hope。有生命必有希望。有生命必有希望目的要求v学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法v掌握对不同细菌细胞大小测定的分类学基本掌握对不同细菌细胞大小测定的分类学基本要求要求v增强微生物细胞大小的感性认识增强微生物细胞大小的感性认识基本原理基本原理由于菌体很小，需在显微镜下测量，借助特殊的测量工具由于菌体很小，需在显微镜下测量，借助特殊的测量工具 显微测微尺，包括：目镜测微尺和镜台测微尺显微测微尺
2、，包括：目镜测微尺和镜台测微尺镜台测微尺镜台测微尺 是一个在特制载玻片中央封固的标准刻尺，是一个在特制载玻片中央封固的标准刻尺，总长为总长为1mm,1mm,共分为共分为100100个小格，即每一小格长个小格，即每一小格长度为度为0.01mm0.01mm0.01mm0.01mm即即即即10um10um10um10um目镜测微尺目镜测微尺是一块圆形玻片，其中央刻有精确等分的刻度，是一块圆形玻片，其中央刻有精确等分的刻度，有把有把5 5毫米刻成为毫米刻成为5050等分或把等分或把1010毫米长度刻成毫米长度刻成100100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上来
3、测量经显微镜放大后的细胞物象。来测量经显微镜放大后的细胞物象。实验步骤实验步骤1装目镜测微尺装目镜测微尺v取出目镜，把目镜的透镜旋取出目镜，把目镜的透镜旋 下，将目镜测微尺刻度朝下下，将目镜测微尺刻度朝下 放在目镜镜筒内的隔板上，放在目镜镜筒内的隔板上，旋上目镜透镜，然后将目镜旋上目镜透镜，然后将目镜 插入镜筒内。插入镜筒内。2 校准目镜测微尺校准目镜测微尺v放镜台测微尺：放镜台测微尺：镜台测微尺置于载物台上，使刻镜台测微尺置于载物台上，使刻度朝上。度朝上。校准：校准：先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清先用低倍镜观察，对准焦距，视野中看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使镜台测微尺的刻度后，转
4、动目镜，使目镜测微尺目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行与镜台测微尺的刻度平行，移动推动器、使两尺，移动推动器、使两尺重叠，再使两尺在某一区域内两刻度线完全重合，重叠，再使两尺在某一区域内两刻度线完全重合，计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。微尺的格数。v用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，分别用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，分别测出高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所测出高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所占的格数。占的格数。校准目镜测微尺校准目镜测微尺注意注意：观察时光线不能太强，否则难以找到镜台测微尺的刻度观察时光线不能
5、太强，否则难以找到镜台测微尺的刻度 换高倍镜和用油镜校正时，眼睛注视着镜头和载物台，换高倍镜和用油镜校正时，眼睛注视着镜头和载物台，防止压坏镜台测微尺！防止压坏镜台测微尺！计算计算计算计算:不同放大倍数下，目镜测微尺每格所代表的长度：不同放大倍数下，目镜测微尺每格所代表的长度：不同放大倍数下，目镜测微尺每格所代表的长度：不同放大倍数下，目镜测微尺每格所代表的长度：两重合线间镜台测微尺格数两重合线间镜台测微尺格数*10um目镜测微尺每格长度目镜测微尺每格长度(um)=两重合线间目镜测微尺格数两重合线间目镜测微尺格数 校正完后取下镜台测微尺，换上所需观察的校正完后取下镜台测微尺，换上所需观察的菌体
6、制片菌体制片,细细菌用简单染色；测定酵母菌时制成水浸片也可以用美蓝染色菌用简单染色；测定酵母菌时制成水浸片也可以用美蓝染色 先用低倍镜观察找到菌体，然后选择合适的倍镜观察，在先用低倍镜观察找到菌体，然后选择合适的倍镜观察，在不同倍镜观察到的格数分别乘上校正后不同不同倍镜观察到的格数分别乘上校正后不同倍镜倍镜目镜测微尺每目镜测微尺每格所代表的长度，即为菌体的实际大小！格所代表的长度，即为菌体的实际大小！一般情况下，细菌需用油镜观察，酵母菌用高倍镜观察即一般情况下，细菌需用油镜观察，酵母菌用高倍镜观察即可；对于球菌就用直径表示菌体大小，杆菌则需要分别测量细可；对于球菌就用直径表示菌体大小，杆菌则需
7、要分别测量细胞的宽度和长度，用宽度胞的宽度和长度，用宽度长度表示细胞大小长度表示细胞大小3 菌体大小的测定菌体大小的测定 实验材料实验材料v菌种菌种：金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌 酿酒酵母菌酿酒酵母菌v仪器：仪器：目镜测微尺目镜测微尺 镜台测微尺镜台测微尺 载玻片载玻片 盖玻片盖玻片 显微镜显微镜 染液：草酸铵结晶紫染液：草酸铵结晶紫 吕氏碱性美蓝吕氏碱性美蓝 不是直接测量细胞的大小！不是直接测量细胞的大小！而是用于校正目镜测微尺的相对长度而是用于校正目镜测微尺的相对长度镜台测微尺镜台测微尺目镜测微尺目镜测微尺目镜测微尺目镜测微尺注意：注意：注意：注意：不同的显微镜不同的显微镜 不同的目镜和物镜组合放大倍不同的目镜和物镜组合放大倍 数不同数不同 目镜测微尺每一小格在不同的目镜测微尺每一小格在不同的条件下所代表的实际长度不同！条件下所代表的实际长度不同！测量菌体细胞大小之前测量菌体细胞大小之前一定要用镜台测微尺进行校正，一定要用镜台测微尺进行校正，求出在一定的放大倍数下的，求出在一定的放大倍数下的，目镜测微尺每一小格代表的相对长度目镜测微尺每一小格代表的相对长度