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1、实验六微生物的大小测定第1页,本讲稿共11页1、目镜测微尺:目镜测微尺是一块可以放入接目镜内的特定圆形玻璃片。玻片中央是一个细长带刻度的尺,等分成50或100小格,每个等分线间距为0.1mm,测量时将其放在接目镜隔板上。因此,目镜测微尺只是测量显微镜放大后的物像。由于不同显微镜的放大倍数不同,故目镜测微尺每格实际代表长度随显微镜的不同而不同。因此在使用前必须用物镜测微尺校正,以求得在一定接物镜及目镜等光学系统下,目镜测微尺每格所代表的实际长度。第2页,本讲稿共11页2、物镜测微尺:物镜测微尺是一块中央部分刻有精确等分线的载玻片。每一刻度间距为10um即把1mm等分为100格,是专门为校正目镜测
2、微尺实际数值用的。第3页,本讲稿共11页三、材料与仪器1、啤酒酵母2、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺3、无菌水第4页,本讲稿共11页四、方法与步骤 1、目镜测微尺的校正1)将目镜测微尺装入目境内,刻度朝下,并将物镜测微尺朝上置载物台上。2)用低倍镜核对,至能清晰看到物镜测微尺。3)改用高倍镜或油镜对焦后,转动目镜,使目镜测微的刻度和物镜测微尺刻度平行。4)两尺吻合后,先使两尺的一端某一刻度完全重合,然后再寻找另一端第二条重叠的刻度。第5页,本讲稿共11页5)计下两吻合刻度间,目镜测微尺与物镜测微尺的格数。按下列公式算出目镜测微尺每小格所代表长度。目镜测微尺每格长度(微米)两吻合刻度间物镜测微尺
3、格数10m=两吻合刻度间目镜测微尺格数例如:目镜测微尺的5格等于物镜测微尺的2格,则目镜测微尺1格=(210)/5=4微米 第6页,本讲稿共11页目镜测微尺安装方法 目镜测微尺目镜测微尺一镜台测微尺及其中央部分的放大第7页,本讲稿共11页镜台测微尺校准目镜测微尺时的情况第8页,本讲稿共11页2、微生物大小测定:1)在载玻片上滴上美兰染色液,按无菌操作,挑取啤酒酵母均匀地涂片,然后盖上盖玻片。2)将“水浸片”标本置于载物台上,先用低倍镜观察到目标后,转换高倍镜测量酵母的大小,杆菌要测长度与宽度,球菌测直径,一般在测微生物细胞大小时,通常测量1020个菌体,求出其平均值。第9页,本讲稿共11页(3)测量结果记录:在高倍镜下:目镜测微尺格=物镜测微尺格 目镜测微尺1格=微米 酵母细胞长度=目镜测微尺平均格 =微米 宽度=目镜测微尺平均格 =微米注:要求测量15个酵母细胞的平均值第10页,本讲稿共11页五、思考题1、目镜测微尺为何要校正?如何进行?2、为何当目镜不变,目镜测微尺也不变,而改变物镜、目镜测微尺所测定的物体长度不同?第11页,本讲稿共11页