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1、实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH微生物大小的测定微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH目的要求目的要求v学习并掌握用测微尺测定微生物大小的学习并掌握用测微尺测定微生物大小的方法方法v增强微生物细胞大小的感性认识增强微生物细胞大小的感性认识实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH基本原理基本原理v 微生物细胞的大小,是微生物重要的形微生物细胞的大小,是微生物重要的形态特征之一,也是分类鉴定的依据之一。态特
2、征之一,也是分类鉴定的依据之一。v由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。由于菌体很小、只能在显微镜下来测量。v用于测量微生物细胞大小的工具有用于测量微生物细胞大小的工具有目镜目镜测微尺测微尺和和镜台测微尺镜台测微尺。实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJHv目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等目镜测微尺是一块圆形玻片,其中央刻有精确等分的刻度,有把分的刻度,有把5 5毫米刻成为毫米刻成为5050等分或把等分或把1010毫米长毫米长度刻成度刻成100100毫米。测量时,将其放在接目镜中的隔毫米。测量时,将其放在接目镜中的隔板上来测量经显
3、微镜放大后的细胞物象。由于不板上来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同的显微镜放大倍数不同,同一显微镜在不同的同的显微镜放大倍数不同,同一显微镜在不同的目镜、物镜组合下,其放大倍数也不相同,而目目镜、物镜组合下,其放大倍数也不相同,而目镜测微尺是处在目镜的隔板上,每格实际表示的镜测微尺是处在目镜的隔板上,每格实际表示的长度不随显微镜的总放大倍数的放大而放大,仅长度不随显微镜的总放大倍数的放大而放大,仅与目镜的放大倍数有关,只要目镜不变,它就是与目镜的放大倍数有关,只要目镜不变,它就是定值。定值。实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJHv
4、而显微镜下的细胞物象是经过了物镜、目镜两而显微镜下的细胞物象是经过了物镜、目镜两次放大成象后才进入视野的。即目镜测微尺上次放大成象后才进入视野的。即目镜测微尺上刻度的放大比例与显微镜下细胞的放大比例不刻度的放大比例与显微镜下细胞的放大比例不同,只是代表相对长度,所以使用前须用置于同,只是代表相对长度,所以使用前须用置于镜台上的镜台测微尺校正,以求得在一定放大镜台上的镜台测微尺校正,以求得在一定放大倍数下实际测量时的每格长度。倍数下实际测量时的每格长度。实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH器材器材v菌种菌种 v仪器或其他用具仪器或其他用
5、具 目镜测微尺目镜测微尺, ,镜台测微镜台测微尺尺, ,载玻片载玻片, ,盖玻片盖玻片, ,显微镜等显微镜等. .实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH装目镜测微尺装目镜测微尺v取出目镜,把目镜的透镜取出目镜,把目镜的透镜旋下,将目镜测微尺刻度旋下,将目镜测微尺刻度朝下放在目镜镜筒内的隔朝下放在目镜镜筒内的隔板上,旋上目镜透镜,然板上,旋上目镜透镜,然后将目镜插入镜筒内。后将目镜插入镜筒内。实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH校准目镜测微尺校准目镜测微尺v放镜台测微尺:放镜台测
6、微尺:镜台测微尺置于载物台上,使刻镜台测微尺置于载物台上,使刻度朝上。度朝上。v校准:校准:先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清先用低倍镜观察,对准焦距,视野中看清镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使镜台测微尺的刻度后,转动目镜,使目镜测微尺目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行与镜台测微尺的刻度平行,移动推动器、使两尺,移动推动器、使两尺重叠,再使两尺的重叠,再使两尺的“0”0”刻度完全重合,定位后,刻度完全重合,定位后,仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计数两重仔细寻找两尺第二个完全重合的刻度。计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数。数。实验十
7、四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJHv计算:计算:因为镜台测微尺的刻度每格长因为镜台测微尺的刻度每格长1010微米,所微米,所以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的以由下列公式可以算出目镜测微尺每格所代表的长度:例如目镜测微尺长度:例如目镜测微尺1010小格等于血球计数板小格等于血球计数板2 2小小格,已知血球计数板每小格为格,已知血球计数板每小格为1010微米则微米则2 2小格的长小格的长度为度为2 21010微米微米2020微米,那么相应地在目镜测微微米,那么相应地在目镜测微尺上每小格长度为:尺上每小格长度为: 同法校正在高倍镜下目
8、镜测微尺每小格所代表的同法校正在高倍镜下目镜测微尺每小格所代表的长度。长度。微米微米210102=*实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH菌体大小的测定菌体大小的测定v先在低倍镜下找到目的物,然后在油镜下转动先在低倍镜下找到目的物,然后在油镜下转动目镜测微尺,测出巨大芽孢杆菌菌体的长、宽目镜测微尺,测出巨大芽孢杆菌菌体的长、宽各占几格各占几格( (不足一格的部分估计到小数点后一不足一格的部分估计到小数点后一位数位数) ),测出的格数乘上目镜测微尺每格的长,测出的格数乘上目镜测微尺每格的长度,即等于该菌的大小。度,即等于该菌的大小。v一般
9、测量菌的大小要在同一个涂片上测定一般测量菌的大小要在同一个涂片上测定10-10-2020个菌体,求出平均值,才能代表该菌的大小,个菌体,求出平均值,才能代表该菌的大小,而且一般是用对数生长期的菌体进行测定。而且一般是用对数生长期的菌体进行测定。实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH注意事项注意事项v 当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。的长度。v 观察时光线不宜过强观察时光线不宜过强, ,否则难以找到镜否则难以找到镜台微尺的刻度台微尺的刻度; ;换高倍镜和油镜校正时换高倍镜和油镜校正时, ,务必十分细心务必十分细心, ,防止接物镜压坏镜台微防止接物镜压坏镜台微尺和损坏镜头尺和损坏镜头.实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH目镜测微尺目镜测微尺实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH镜台测微尺镜台测微尺实验十四、微生物大小的测定实验十四、微生物大小的测定水生态工程实验室水生态工程实验室YJHYJH校准目镜测微尺校准目镜测微尺