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1、实验六微生物的大小测定第1 页，本讲稿共1 1 页1、目镜测微尺：目镜测微尺是一块可以放入接目镜内的特定圆形玻璃片。玻片中央是一个细长带刻度的尺，等分成50或100小格，每个等分线间距为0.1mm，测量时将其放在接目镜隔板上。因此，目镜测微尺只是测量显微镜放大后的物像。由于不同显微镜的放大倍数不同，故目镜测微尺每格实际代表长度随显微镜的不同而不同。因此在使用前必须用物镜测微尺校正，以求得在一定接物镜及目镜等光学系统下，目镜测微尺每格所代表的实际长度。第2 页，本讲稿共1 1 页2、物镜测微尺:物镜测微尺是一块中央部分刻有精确等分线的载玻片。每一刻度间距为10um 即把1mm 等分为100格，是
2、专门为校正目镜测微尺实际数值用的。第3 页，本讲稿共1 1 页三、材料与仪器 1、啤酒酵母 2、显微镜、物镜测微尺、目镜测微尺 3、无菌水第4 页，本讲稿共1 1 页四、方法与步骤 1、目镜测微尺的校正 1）将目镜测微尺装入目境内，刻度朝下，并将物镜测微尺朝上置载物台上。2）用低倍镜核对，至能清晰看到物镜测微尺。3）改用高倍镜或油镜对焦后，转动目镜，使目镜测微的刻度和物镜测微尺刻度平行。4)两尺吻合后，先使两尺的一端某一刻度完全重合，然后再寻找另一端第二条重叠的刻度。第5 页，本讲稿共1 1 页 5)计下两吻合刻度间，目镜测微尺与物镜测微尺的格数。按下列公式算出目镜测微尺每小格所代表长度。目镜
3、测微尺每格长度（微米）两吻合刻度间物镜测微尺格数10m=两吻合刻度间目镜测微尺格数 例如：目镜测微尺的5格等于物镜测微尺的2格，则目镜测微尺1格=（210）/5=4微米 第6 页，本讲稿共1 1 页 目镜测微尺安装方法 目镜测微尺 目镜测微尺一 镜台测微尺及其中央部分的放大第7 页，本讲稿共1 1 页镜台测微尺校准目镜测微尺时的情况第8 页，本讲稿共1 1 页2、微生物大小测定：1）在载玻片上滴上美兰染色液，按无菌操作，挑取啤酒酵母均匀地涂片，然后盖上盖玻片。2)将“水浸片”标本置于载物台上，先用低倍镜观察到目标后，转换高倍镜测量酵母的大小，杆菌要测长度与宽度，球菌测直径，一般在测微生物细胞大小时，通常测量1020个菌体，求出其平均值。第9 页，本讲稿共1 1 页(3)测量结果记录：在高倍镜下：目镜测微尺格=物镜测微尺格 目镜测微尺1格=微米 酵母细胞长度=目镜测微尺平均格=微米 宽度=目镜测微尺平均格=微米注：要求测量15个酵母细胞的平均值第10 页，本讲稿共1 1 页五、思考题 1、目镜测微尺为何要校正？如何进行？2、为何当目镜不变，目镜测微尺也不变，而改变物镜、目镜测微尺所测定的物体长度不同？第1 1 页，本讲稿共1 1 页