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1、 1838 中 华 实验 外 科杂志 2013 年 9 月第 30 卷第 9 期 Chin J Exp Sure,September 2013,Vol.30,No.9 大鼠液压冲击伤性脑水肿中水通道蛋白 4 蛋白及其 mRNA 的动态表达 马 文 群 李 胜 超 张 金 霞 孙 国 柱 【摘要】目的观察大鼠颅脑液压冲击伤后水肿脑组织水通道蛋白 4(AQP4)蛋白及其 mRNA 的表 达变化。方法成年雄性 SD 大鼠 64 只， 应用 Dixon 法制作颅脑损伤模型，术后 6、 12、 24h、 3、 7 d 用干湿重法、免疫组织化学法 、 Western blot 以及逆转录 -聚合酶链反应（
2、 RT-PCR)分别测定水肿 脑组 织含水量、 AQP4 蛋白及其 mRNA 的 表 达 。 结 果 自 伤 后 6 h,脑组织含水量开始增加（ 79. 11 1. 28)% ,24 h 达高峰 (82. 74 1. 10)% ,持续至 3 d (82. 04 1. 69)% ，然后开始下降。组织学 观察印证了脑 组 织的水肿趋势。 AQP4 于 伤 后 6 h 开始增加 积分吸光度（ M)值为 471.40 45. I9 ,24 h 达高峰 (M 值为 944. 2 101. 84)，持续至 3 d 后下降 (M 值为 92 . 6 I94. 22)， 7 d 仍 高于对照 组 ;而 AQP
3、4 raRNA 表达变化趋势与其蛋白含量变化一致。 线 性相关分析可见 AQP4 蛋白 及其 mRNA 表达 与 脑含水量呈 正 相关（ / = 0.981 0.973， P 0. 05),从 6 h 开 别用于 Western blot 检测 AQP4 蛋白和 RT-PCR 法检测 始增加 (79.11 1.28)%， 24 h 达到最大值 (82. 74 1. AQP4 mRNA 表达。 4. 干湿法测定脑组织含水量 :所取标本先用滤纸 吸除 表面水分，置电子分析天平（分度值 0.0001 g)称 取湿重 （ W),再经 110 t 恒温烤箱烘烤 24 h 后称取干重 (D)。应 用公式
4、脑组织含水量（ ) =(W-D)/ Wx 100% ,计算 出脑组织含水量。 5. 免疫组织化学检测 AQP4 表达 :采用链霉菌抗 生物 10) % ，持续到 3 d (82. 04 1. 69) % , 之后开始 下降， 7 d 脑组织含水量为（ 80.72 1.87)%，仍高于假手 术组和正常对照组（ P . 5)。与 模型组和对照组比较， AQP4 mRNA 的 表 达 6 h 开始增 高（ 0.626 0.054)， 12 h 继续增高（ 0.677 0.048), 24h 至 3 d 达到高峰（ 0.764 0.077,0.758 0.057)， 7 d 后开始降低（ 0. 723
5、 0. 056)，高于对照组（图 2)。 发现 3d 后脑水肿明显减轻，神经元受损数量明显 . 减少， 行为学评分也明显好转。它表明 AQP4 高 表 达 与脑水肿 发生、发展之间存在着密切联系。 本研究结果表明，在液压冲击伤性脑水肿中，损伤 灶 周围水肿脑组织 AQP4 表达呈增高趋势，它参与了 液压冲击伤性脑水肿的发生、发展过程。 参 考 文 献 1 Manley GT,Binder DK,Papadopoulos MC,et al. New insights into wa-, ter transport and edema in the central nervous system f
6、rom phenotype analysis of aquaporin-4 null mice. Neuroscience,2004,129 ： 983-991. Neal CJ,Lee EY,Gyorgy A,et al. Effect of penetrating brain injury on aquaporin-4 expression using a rat model. J Neurotrauma, 2007,24 ： 1609-1617. 孙国柱，赵宗茂，张更申，等 .大鼠液压冲击伤性脑水肿 AQP4 表 达及其与脑水 肿关系 .中华实验外科杂志， 2011,28:1499-15
7、00. 孙国柱，刘性强，王目纲，等 .一种大鼠液压冲击脑损伤装置的研 制 .中华实验外 科杂志， 2011,28:749-750. 孙国柱，王目纲，刘性强，等 .不同分级液压冲击脑损伤模型 的建 立 .中华实验外 科杂志 ,2011,28:963-965. 王忠诚 .王忠诚神经外科学 .武汉：湖北科学技术出版社， 2005, 432435. Shenaq M,Kassem H,Peng C,et al. Neuronal damage and functional deficits are ameliorated by inhibition of aquaporin and HIFla after traumatic brain injury (TBI). J Neurol Sci ,2012,323 ： 134-140. (收稿日期 :20134104)