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1、课题 微生物的实验室培养现在学习的是第1页，共40页一、基础知识一、基础知识（一）培养基（一）培养基1 1、概念、概念人们按照人们按照微生物微生物对营养物养物质的不同需求的不同需求，配制出供其生长繁，配制出供其生长繁殖的殖的营养基养基质。2 2、培养基的类型和用途、培养基的类型和用途（1 1）按物理性质划分：）按物理性质划分：液体培养基液体培养基半固体培养基半固体培养基固体培养基固体培养基注：（固体、半固体培养基需注：（固体、半固体培养基需添加凝固添加凝固剂，如如琼脂脂；两者的差；两者的差别是添加量的别是添加量的多、少多、少；液体培养基；液体培养基不加凝固不加凝固剂。）。）（用于工用于工业生生
2、产）（微生物保存、分离、微生物保存、分离、鉴定、活菌定、活菌计数数）（观察微生物的运察微生物的运动、分、分类、鉴定定）现在学习的是第2页，共40页液体培养基与固体培养基液体培养基与固体培养基现在学习的是第3页，共40页（2 2）按化学成分划分：）按化学成分划分：合成培养基合成培养基培养基成分明确（用化学成分已知的化合物配制）培养基成分明确（用化学成分已知的化合物配制）（微生物的分微生物的分类、鉴定定）天然培养基天然培养基含化学成分不明的天然物质含化学成分不明的天然物质（工工业生生产）（3 3）按用途划分：）按用途划分：选择培养基选择培养基加入加入某化学物某化学物质，以，以抑制抑制不需要的微生物
3、的生长，不需要的微生物的生长，促促进所需要微所需要微生物的生长。生物的生长。（作用：（作用：分离微生物、分离微生物、进行行选择培养，培养，进行行选择培养可以增加所需培养可以增加所需目的菌的目的菌的浓度。度。）现在学习的是第4页，共40页青霉素青霉素抗青霉素基因抗青霉素基因基因工程，对导入重组质粒的大肠杆菌的筛选基因工程，对导入重组质粒的大肠杆菌的筛选现在学习的是第5页，共40页不加含碳有机物的无碳培养基不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物分离自养型微生物加入青霉素的培养基加入青霉素的培养基:分离到酵母菌、霉菌等真菌分离到酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基:分
4、离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌分离固氮菌鉴别培养基鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示指示剂或化学或化学药品品配制而成的，用以配制而成的，用以鉴别不同种类的微生物。不同种类的微生物。现在学习的是第6页，共40页伊红美蓝伊红美蓝A AA AB BB BC CC CDD大肠杆菌在伊红美蓝培养基上大肠杆菌在伊红美蓝培养基上菌落呈现黑色菌落呈现黑色 注：病毒专性活细胞寄生，目前不能利用人工培养基来培养，需接注：病毒专性活细胞寄生，目前不能利用人工培养基来培养，需接种在动植物组织中才能增值。
5、常用于培养动物病毒的是活鸡胚。种在动植物组织中才能增值。常用于培养动物病毒的是活鸡胚。现在学习的是第7页，共40页3 3、培养基的成分培养基的成分不管哪种培养基，一般都含有不管哪种培养基，一般都含有水水、碳源碳源、氮源氮源和和无机无机盐。（1 1）碳源）碳源为微生物提供所需为微生物提供所需碳元素碳元素的营养物质，的营养物质，需要量最大需要量最大。概念：概念：来源：来源：无机碳源：无机碳源：COCO2 2、NaHCONaHCO3 3等等有机碳源：有机碳源：糖类糖类（常用的碳源尤其是葡萄糖常用的碳源尤其是葡萄糖）、脂肪酸、脂肪酸、花生粉饼、石油等花生粉饼、石油等作用：作用：构成构成细胞的物胞的物质
6、和一些代和一些代谢产物；物；有些是异养微生物的能源；有些是异养微生物的能源；思考：思考：大肠杆菌，硝化细菌，蓝藻，乳酸菌分别选用哪种碳源？大肠杆菌，硝化细菌，蓝藻，乳酸菌分别选用哪种碳源？糖糖类，二氧化碳，二氧化碳，糖，二氧化碳，二氧化碳，糖类现在学习的是第8页，共40页（2 2）氮源）氮源概念：概念：为微生物提供所需为微生物提供所需氮元素氮元素的营养物质。的营养物质。来源：来源：无机氮源：无机氮源：N N2 2、NHNH3 3 、NHNH4+4+、NONO3-3-等。等。有机氮源：有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等作用：作用：主要用于合成蛋白质、核酸及含氮
7、的代谢产物。主要用于合成蛋白质、核酸及含氮的代谢产物。注：注：“含含C C、N”N”的有机物常是异养微生物的氮源，也是碳源，即的有机物常是异养微生物的氮源，也是碳源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是单一方面的作用。有些化合物作为营养要素成分时并不是单一方面的作用。思考：培养根瘤菌、大肠杆菌、硝化细菌时分别需要哪一类思考：培养根瘤菌、大肠杆菌、硝化细菌时分别需要哪一类氮源？氮源？N N2 2，铵盐或硝酸盐，铵盐或硝酸盐，NHNH3 3现在学习的是第9页，共40页（3 3）水）水（4 4）无机盐）无机盐（5 5）培养基内所需的其他条件培养基内所需的其他条件概念：概念：微生物生长不可缺少的微生物
8、生长不可缺少的微量有机物微量有机物。注：并不是所有微生物都需要添加特殊营养物质，有些需要添加，注：并不是所有微生物都需要添加特殊营养物质，有些需要添加，原因是它们自身原因是它们自身缺乏合成这些物质的酶缺乏合成这些物质的酶或或合成能力有限合成能力有限。如：培如：培养乳酸杆菌需要在培养基中添加养乳酸杆菌需要在培养基中添加维生素。生素。来源：来源：维生素生素、氨基酸氨基酸、碱基碱基等。等。作用：作用：酶、核酸核酸的组成成分。的组成成分。、特殊营养物质特殊营养物质（生生长因子因子）现在学习的是第10页，共40页、pHpH值值如如:培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或微碱性。培养霉菌需酸性、培养细菌需中性或
9、微碱性。、氧气的含量氧气的含量如如:培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。4 4、培养基的配制、培养基的配制原则原则（1 1）目的要明确（目的要明确（根据微生物的种根据微生物的种类、培养目的、培养目的）（2 2）营养协调）营养协调 （注意营养物质的（注意营养物质的浓度度和和比例比例）（3 3）pHpH适宜适宜现在学习的是第11页，共40页例例1：为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制的培养基的配方：为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制的培养基的配方如下表：如下表：(1)该培养基所含的碳源有该培养基所含的碳源有_，其功能是，其功能是_。(2)该培养基所含的氮源
10、是该培养基所含的氮源是_，其功能是，其功能是_。(3)该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是是_。(4)该细菌在同化作用上的代谢类型是该细菌在同化作用上的代谢类型是_。(5)该培养基可用来鉴别哪种细菌该培养基可用来鉴别哪种细菌()A霉菌霉菌B大肠杆菌大肠杆菌C酵母菌酵母菌D乳酸菌乳酸菌乳糖、蔗糖、蛋白胨乳糖、蔗糖、蛋白胨构成微生物的细胞物质和一些代谢产物构成微生物的细胞物质和一些代谢产物蛋白胨蛋白胨合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物水、无机盐水、无机盐异养型异养型C C现在学习的是第12页，共40
11、页（二）无菌技术（二）无菌技术1 1、概念、概念 泛指在培养微生物的操作中，所有泛指在培养微生物的操作中，所有防止防止杂菌菌污染染的方法。的方法。获得纯净培养物的关键（目的）获得纯净培养物的关键（目的）:防止外来防止外来杂菌的入侵菌的入侵。2 2、无菌技术包括的四个方面（、无菌技术包括的四个方面（措施措施）（1 1）对实验操作）对实验操作空空间、操作者的衣着和手、操作者的衣着和手进行进行清清洁和消毒和消毒；（2 2）将）将培养器皿、接种用具和培养基培养器皿、接种用具和培养基等器具进行等器具进行灭菌菌；（3 3）为避免周围微生物污染，）为避免周围微生物污染，实验操作操作应在应在酒精灯火焰附近酒精
12、灯火焰附近旁进行；旁进行；（4 4）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。）避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。现在学习的是第13页，共40页3 3、消毒与灭菌、消毒与灭菌（1 1）消毒）消毒概念：概念：使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（部分对人体有害的微生物（不包括芽不包括芽孢和和孢子子）。）。有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠休眠体体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶
13、劣的劣的环境境有很有很强的抵抗力的抵抗力。在生物体的一定部位产生一种在生物体的一定部位产生一种特殊的生殖特殊的生殖细胞胞叫孢子。孢子的叫孢子。孢子的特点是能直接长成新个体。特点是能直接长成新个体。现在学习的是第14页，共40页常用常用方法方法:a a、煮沸消毒法、煮沸消毒法100100煮沸煮沸5-6min5-6min，用于，用于一般物品一般物品的消毒。的消毒。b b、巴氏消毒法、巴氏消毒法70-7570-75下煮下煮30min30min或或 8080下煮下煮15min15min，对一些，对一些不耐高温的液体不耐高温的液体，如牛奶的消毒。如牛奶的消毒。c c、化学药剂消毒、化学药剂消毒酒精、氯气
14、、石碳酸、煤酚皂溶液等，如酒精、氯气、石碳酸、煤酚皂溶液等，如酒精擦拭双手酒精擦拭双手、氯气消毒水源气消毒水源等。等。d d、紫外线消毒、紫外线消毒对对接种室、接种箱或超接种室、接种箱或超净工作台工作台首首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果，然后使用紫外线增强消毒效果，然后使用紫外线进行物理消毒。只适用于进行物理消毒。只适用于表面表面灭菌和空气菌和空气灭菌菌。现在学习的是第15页，共40页（2 2）灭菌）灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽包括芽孢和和孢子子。常用常用方法方法:a a、灼烧灭菌、灼烧
15、灭菌用于金属用具（用于金属用具（接种接种环、接种、接种针）、接种）、接种过程中过程中试管口和瓶口管口和瓶口的灭菌；的灭菌；b b、干热灭菌、干热灭菌160160170 170，1 12h2h。能耐高温的需要。能耐高温的需要保持干燥的物品，用于保持干燥的物品，用于玻璃器皿、金属玻璃器皿、金属用具用具的灭菌的灭菌 ，所用设备是，所用设备是干干热灭菌箱菌箱 ；c c、高压蒸汽灭菌、高压蒸汽灭菌121121，100kPa100kPa，15-3015-30分钟。用于分钟。用于培养培养基、无菌水基、无菌水等的灭菌等的灭菌 ，所用设备是，所用设备是高高压蒸汽蒸汽灭菌菌锅。现在学习的是第16页，共40页二、实
16、验操作二、实验操作(以培养大肠杆菌为例以培养大肠杆菌为例)（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基1 1、计算、计算2 2、称量、称量注意：注意：牛肉膏比牛肉膏比较黏稠，天平称量黏稠，天平称量时，放等大的称量，放等大的称量纸，防，防止牛肉膏粘在托止牛肉膏粘在托盘上；上；牛肉膏和蛋白牛肉膏和蛋白胨都易吸潮，称取都易吸潮，称取时动作迅速，称后要及作迅速，称后要及时盖上瓶盖。盖上瓶盖。现在学习的是第17页，共40页3 3、溶化、溶化牛肉膏和称量纸牛肉膏和称量纸+水水取出称量纸取出称量纸加加热加蛋白胨和氯化钠加蛋白胨和氯化钠搅拌拌加琼脂（加琼脂（不断不断搅拌，防止糊底拌，防止糊底而而导
17、致致烧杯破裂杯破裂）补加蒸馏水至补加蒸馏水至100ml100ml思考思考溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?可保可保证粘附在称量粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中上的牛肉膏也能溶于水中,减少减少误差。差。加琼脂的目的是什么加琼脂的目的是什么?作作为凝固凝固剂现在学习的是第18页，共40页4 4、灭菌、灭菌培养基：高压蒸汽灭菌培养基：高压蒸汽灭菌培养皿：干热灭菌培养皿：干热灭菌思考思考在灭菌前在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？是什么？灭菌菌时能避免水蒸汽凝能避免水蒸汽凝结时浸湿棉
18、塞；浸湿棉塞；取出培养基取出培养基锥形瓶形瓶时也能起到隔也能起到隔绝空气中空气中杂菌菌污染的作用。染的作用。培养皿能否用高压蒸汽灭菌？培养皿能否用高压蒸汽灭菌？不能不能,因因为培养皿要保持干燥培养皿要保持干燥,应该用干用干热灭菌。菌。在培养微生物时，由于不同微生物适应的在培养微生物时，由于不同微生物适应的PHPH不同，因此在熔化后不同，因此在熔化后必须条件必须条件PHPH，那么是先调，那么是先调PHPH还是先灭菌还是先灭菌?先先调PHPH，后，后灭菌。菌。现在学习的是第19页，共40页5 5、倒平板、倒平板现在学习的是第20页，共40页用手触摸用手触摸锥形瓶，温度下降到形瓶，温度下降到刚刚不不
19、烫手手时即可开始倒平板。即可开始倒平板。灼灼烧灭菌，防止瓶口的微生物菌，防止瓶口的微生物污染培养基。染培养基。思考思考培养基灭菌后要冷却到培养基灭菌后要冷却到5050时倒平板。用什么办法来估计培养时倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？基的温度？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？现在学习的是第21页，共40页平板冷凝后，皿盖上会凝平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖水珠，将平板倒置，既可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成上的水珠落入培养基，造成污染染,又可以避免培养基中的水分又可以避免培养基中的水分过快地快地挥发。空气中的微生物可能在皿盖与
20、皿底之空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好的培养基上滋生，因此最好不要用不要用这个平板培养微生物。个平板培养微生物。平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？现在学习的是第22页，共40页（二）纯化大肠杆菌（二）纯化大肠杆菌1 1、纯化培养技术：纯化培养技术：自然自然环境中，微生物混在一起生境中，微生物混在一起生长，要想，要想纯培养，首先要将培养，首先要
21、将单个个细胞与其他胞与其他细胞分离开，胞分离开，进而培养成可而培养成可见的群体（即菌落）。的群体（即菌落）。2 2、细菌的菌落、细菌的菌落定义：定义：单个或少数个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖菌在固体培养基上大量繁殖时，会形成一个肉眼，会形成一个肉眼可可见的、具有一定形的、具有一定形态结构的子构的子细胞群体。胞群体。特征：特征：大小、形状、光大小、形状、光泽度、度、颜色、硬度、透明度等。色、硬度、透明度等。功能：功能：菌种菌种鉴定的重要依据。定的重要依据。现在学习的是第23页，共40页形态各异的菌落形态各异的菌落现在学习的是第24页，共40页3、常用接种方法、常用接种方法平板划线法平板划线法
22、稀释涂布平板法稀释涂布平板法（主要用于主要用于纯化培养化培养）（主要用于分离菌种并主要用于分离菌种并计数数）(1)(1)平板划线法：平板划线法：通过接种环在通过接种环在固体培固体培养基养基表面表面连续划划线操操作，将聚集的菌种逐步作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表稀释分散到培养基的表面。在面。在数次划数次划线后培后培养，可分离到由养，可分离到由一个一个细胞胞繁殖而来的菌落。繁殖而来的菌落。接种环接种环现在学习的是第25页，共40页现在学习的是第26页，共40页平板划线法获取的微生物经恒温培养后的生长情况平板划线法获取的微生物经恒温培养后的生长情况现在学习的是第27页，共40页为什么在操作
23、的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？操作结束后灼烧：操作结束后灼烧：杀死接种死接种环上残留的菌种，避免上残留的菌种，避免细菌菌污染染环境及感染操作者。境及感染操作者。思考思考第一步灼烧：第一步灼烧：消消灭接种接种环上的微生物避免上的微生物避免污染培养物；染培养物；每次划线前灼烧：每次划线前灼烧：为了了杀死上一次划死上一次划线结束后，接种束后，接种环残留的菌残留的菌种，使下一次划种，使下一次划线时，接种，接种环上的菌种直接来源于上次划上的菌种直接
24、来源于上次划线的末端，的末端，从而通从而通过划划线次数的增加，使每次划次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐菌种的数目逐渐减少，以减少，以便得到菌落。便得到菌落。现在学习的是第28页，共40页在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？以免接种以免接种环温度太高，温度太高，杀死菌种。死菌种。在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？线的末端开始划线？划划线后，后，线条末端条末端细菌的数目比菌的数目比线条起始条起始处要少，每次从上要少，每次从上一次划一次划线的末端开始
25、，能使的末端开始，能使细菌的数目随着划菌的数目随着划线次数的增加次数的增加而逐步减少，最而逐步减少，最终能得到由能得到由单个个细菌繁殖而来的菌落。菌繁殖而来的菌落。现在学习的是第29页，共40页(2)(2)稀释涂布平板法：稀释涂布平板法：将将菌液菌液进行进行一系列的梯一系列的梯度稀度稀释后，分别涂布到后，分别涂布到固体培养基固体培养基表面。稀释度表面。稀释度足够高时，能培养出足够高时，能培养出单个个菌落菌落。稀释涂布平板法稀释涂布平板法操作过程分两个步骤，操作过程分两个步骤，即即系列稀系列稀释操作和涂操作和涂布平板操作布平板操作。涂布器涂布器现在学习的是第30页，共40页系列稀释操作系列稀释操
26、作101102103104105106现在学习的是第31页，共40页涂布平板操作涂布平板操作现在学习的是第32页，共40页对涂布器涂布器进行灼行灼烧灭菌；菌；吸管吸管头不要接触任何物体；不要接触任何物体；在火焰周在火焰周围迅速操作。迅速操作。接种过程中如何进行无菌操作？接种过程中如何进行无菌操作？思考思考 将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到将接种后和未接种（作为对照组）的培养基均放到37370 0C C的恒温箱中，培养的恒温箱中，培养121224h24h后进行观察并记录结果。后进行观察并记录结果。现在学习的是第33页，共40页未接种的培养基在恒温箱中保温未接种的培养基在恒温箱中保温1
27、 12 d2 d后无菌落生后无菌落生长，说明明培养基的制培养基的制备是成功的，否是成功的，否则需要重新制需要重新制备。如果接种成功的如果接种成功的话，在培养基的表面可，在培养基的表面可观察到大小、形状、察到大小、形状、颜色色相似的菌落。相似的菌落。三、结果分析与评价三、结果分析与评价1 1、未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明、未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？了什么？2 2、在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的、在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似吗？大小、形状、颜色相似吗？现在学习的是第3
28、4页，共40页培养培养12 h12 h与与24 h24 h后的大后的大肠杆菌菌落的大小会有明杆菌菌落的大小会有明显不同。随不同。随着着时间的延的延长、菌落的不断生、菌落的不断生长，使菌落不断增大。，使菌落不断增大。无菌操作未达到要求：可能是培养基无菌操作未达到要求：可能是培养基灭菌不菌不彻底；可能是接种底；可能是接种时发生了生了污染；也可能是在培养的染；也可能是在培养的过程中受到了程中受到了污染。染。3 3、培养、培养12h12h和和24h24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？请分析产生差异的原因？4 4、如果在培养基上观察到不
29、同形态的菌落，请分析其可能的原因。、如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其可能的原因。现在学习的是第35页，共40页将菌种接种到将菌种接种到试管的固体管的固体斜面培养基斜面培养基，放入，放入44冰箱冰箱中保存。以后每中保存。以后每3636个月，个月，要将菌种转移到新的培养基。要将菌种转移到新的培养基。四、课题延伸四、课题延伸1 1、菌种的临时保存：、菌种的临时保存：2 2菌种的长期保存：菌种的长期保存：3ml3ml甘油瓶中装入甘油瓶中装入1ml1ml甘油甘油后灭菌，再加入后灭菌，再加入1ml1ml菌液菌液，混匀后放入，混匀后放入-20-20冷冻箱保存。冷冻箱保存。现在学习的是第36页，共
30、40页例例2 2：高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操：高中生物学实验中，在接种时不进行严格无菌操作对实验结果影响最大的一项是作对实验结果影响最大的一项是（）A A将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中将少许干酵母加入到新鲜的葡萄汁中 B B将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上将毛霉菌液接种在切成小块的鲜豆腐上C C将转基因植物叶片接种到无菌培养基上将转基因植物叶片接种到无菌培养基上 D D将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上C C现在学习的是第37页，共40页例例3 3：下列有关细菌培养的叙述，正确的是（：下列有关细菌培养的叙述，正确的是（）A A在琼脂固体
31、培养基上长出的单个菌落含有多种细在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌菌B B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长长C C向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长向液体培养基中通人氧气能促进破伤风杆菌的生长D D在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动D D现在学习的是第38页，共40页例例4 4：某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。：某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回实验包括制备培养基、灭菌、接种
32、及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。答与此实验相关的问题。(1)(1)培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_和和_。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是_和和_。(2)(2)对培养基进行灭菌，应该采用的方法是对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_。(3)(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于样品的平板置于_中培养，培养的温度设定在中培养，培养的温度设定在3737。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种要
33、使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种_作为对照进行实验。作为对照进行实验。氮源氮源碳源碳源无机盐无机盐水水高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌恒温培养箱恒温培养箱无菌水无菌水现在学习的是第39页，共40页(4)(4)培养培养2020小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有菌落，这说明湖水样品中有_种细菌。一般种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_。(5)(5)如果提高培养基中如果提高培养基中NaClNaCl的浓度，可以用于筛选耐的浓度，可以用于筛选耐_细菌，这种培养基被称为细菌，这种培养基被称为_。多多高高盐盐(或或NaCl)NaCl)选择性培养基选择性培养基现在学习的是第40页，共40页