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1、 消毒剂对手消毒现场试验2.1.2.6.1 目的测定消毒剂对手表面自然菌消毒所需使用的剂量,以验证该消毒剂对手消毒实用剂量。2.1.2.6.2 试验器材(1)中和剂(中和剂经鉴定合格)(2)无菌棉拭(3)稀释液 0.1%吐温 80 的 0.03mol/L 磷酸盐缓冲液 pH7.2(4)磷酸盐缓冲液(PBS,0.03mol/L,pH7.2)。(5)标准硬水:见附录 A。(6)无菌纱布巾(7)胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSB):见附录 A。(8)胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA):见附录 A。(9)振荡混合器(10)吸管、试管、平皿若干。2.1.2.6.3 试验步骤(1) 在使用现场,随机选定受试者。
2、试验不少于 30 人次。(2) 消毒前,在受试者双手相互充分搓擦后,让受试者左手指并拢,用无菌棉拭在含 10ml 稀释液试管中浸湿,于管壁上挤干后,在五指屈面指尖至指根,往返涂擦 2 遍,每涂擦一遍,将棉拭转动一次。采样后,以无菌操作方式将棉拭采样端剪入中和剂试管内,作为阳性对照组样本。(3)根据消毒剂使用说明书的方法对右手进行消毒,对手的卫生消毒一般设定作用时间为 1min, 对外科洗手后的泡手一般设定作用时间为 3min。消毒后用中和剂代替稀释液,与阳性对照组同样的方法对受试者右手上残留的自然菌采样一次,作为试验组样本。(4)分别将未用过的同批中和剂、稀释液各 1.0ml、棉拭 1 份2
3、份作为阴性对照组样本。(5)分别取试验组、阳性对照组和阴性对照组样本各 1ml,以琼脂倾注法接种平皿,每个样本接种 2 个平皿,放 37恒温箱中培养48h,观察最终结果。(6) 计算杀灭对数值2.1.2.6.4 评价规定阳性对照组应有较多细菌生长,阴性对照组应无菌生长,以对 30 人次手上自然菌的平均杀灭对数值1.00 可判为消毒合格。2.1.2.6.5 注意事项 (1)本试验需有志愿者参与,重复人次较多,一人可多次受试,但不得在一批试验或同日反复参与,否则可影响结果的准确性。(2) 受试者接受试验时,不得触摸任何表面,以免使手的试验部位沾染杂菌。(3)棉拭涂抹采样,较难标准化,为此应尽量使棉拭的大小,用力的均匀,吸取采样液的量, 以及洗菌时敲打的轻重等先后保持一致。(4) 擦拭消毒时,涂药量要适宜,涂抹要均匀。 (5) 现场样本须及时检测,室温存放不得超过 2h。否则应放 4冰箱内,但亦不得超过 4h。