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1、消毒剂对皮肤消毒现场试验2.1.2.8.1 目的测定消毒剂对皮肤表面自然菌消毒所需使用的剂量，以验证该消毒剂对手消毒的实用剂量。2.1.2.8.2 试验器材（1）中和剂（中和剂经鉴定合格）。（2）无菌棉拭。（3）稀释液 0.1%吐温 80 的 0.03mol/L 磷酸盐缓冲液 pH7.2。（4）磷酸盐缓冲液(PBS，0.03mol/L，pH7.2)。（5）标准硬水：见附录 A。（6）无菌纱布巾。（7）规格板(用牛皮纸制备，中央留一 3.0cm10.0cm 的空格作为采样部位)12115min 灭菌备用。（8）胰蛋白胨大豆琼脂培养基（TSA）。（9）振荡混合器。（10）吸管、试管、平皿若干。2.
2、1.2.8.3 试验步骤(1)在使用现场，随机选定受试者。试验不少于 30 人次。(2)消毒前，让受试者将左右前臂内侧中段相互充分对搓后， 将规格板放于受试者左前臂内侧中段表面，用无菌棉拭在含 10ml 稀释液试管中浸湿，于管壁上挤干后，在规格板框定的区域内，横向往返涂擦 10 遍，纵向往返涂擦 3 遍，每涂擦一遍，将棉拭转动一次。采样后，以无菌操作方式将棉拭采样端剪入采样液试管内，振打 200次。(3)根据消毒剂使用说明书的方法对右前臂内侧进行消毒，一般设定作用时间为 1min3min。消毒后用中和剂代替稀释液，与阳性对照组同样的方法对受试者右前臂内侧表面残留的自然菌采样一次，作为试验组样本
3、。(4)分别将未用过的同批中和剂、稀释液和棉拭作为阴性对照组样本。(5)分别取适宜稀释度的试验组、阳性对照组和阴性对照组样本各1.0ml，以琼脂倾注法接种平皿，每个样本接种 2 个平皿，放 37恒温箱中培养 48h，观察最终结果。(6) 计算杀灭对数值2.1.2.8.4 评价规定阳性对照组应有较多细菌生长，阴性对组应无菌生长，以对 30 人次批皮肤表面自然菌的平均杀灭对数值1.00，可判为消毒合格。2.1.2.8.5 注意事项(1)本试验需有志愿者参与，重复人次较多，一人可多次受试，但不得在一批试验或同日反复参与，否则可影响结果的准确性。(2)受试者接受试验时，不得触摸任何表面，以免使试验部位沾染杂菌。(3)棉拭涂抹采样，较难标准化，为此应尽量使棉拭的大小，用力的均匀，吸取采样液的量， 以及洗菌时敲打的轻重等先后保持一致。(4)擦拭消毒时，涂药量要适宜，涂抹要均匀。 (5)现场样本须及时检测，室温存放不得超过 2h。否则应放 4冰箱内，但亦不得超过 4h。