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1、专题11 现代生物科技专题教材必背知识1、实现基因工程的操作过程至少需要三种工具,即准确切割DNA的“手术刀”限制性核酸内切酶、将DNA片段再连接起来的“缝合针”DNA连接酶、将体外重组好的DNA导入受体细胞的“运输工具”运载体。(P4)2、获取目的基因是实施基因工程的第一步。(P8)3、基因表达载体的构建是实施基因工程的第二步,也是基因工程的核心。(P11)4、将目的基因导入受体细胞是实施基因工程的第三步。(P11)5、目的基因导入受体细胞后,是否可以稳定维持和表达其遗传特性,只有通过检测与鉴定才能知道。这是基因工程的第四步工作。也是检查基因工程是否成功的一步。(P13)6、基因工程的应用:
2、抗虫转基因植物、抗病转基因植物、其他抗逆转基因植物、利用转基因改良植物的品质、用于提高动物生长速度、用于改善畜产品的品质、用转基因动物生产药物、用转基因动物作器官移植的供体。(P1821)7、基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。(P26)8、具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能,也就是说,每个生物细胞都具有全能性的特点。(P33)9、植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。(P36)10、植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞,在一
3、定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。(P37)11、植物细胞工程的实际应用:植物繁殖的新途径微型繁殖、作物脱毒、人工种子;作物新品种的培育单倍体育种、突变体的利用;细胞产物的工厂化生产。(P3840)12、动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后,放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。(P44)13、动物细胞核移植是将动物的一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。(P47)14、动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。(P52)15
4、、胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎,或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎,移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内,使之继续发育为新个体的技术。(P74)16、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等,经移植获得同卵双胎或多胎的技术。(P78)17、生态经济主要是通过实行“循环经济”的原则,使一个系统产出的污染物,能够成为本系统或者另一个系统的生产原料,从而实现废弃物的资源化,而实现循环经济最重要的手段之一就是生态工程。(P108)18、在肯定生态工程的作用,特别是对恢复和重建受损态环境的重要作用的同时,不要忘记大自然固有的强大的生态恢复力量;更不能误认为只要有了
5、生态工程,就可以走发达国家“先污染、破坏,后治理”的老路。(P124)教材必会知识1、DNA重组技术的基本工具(1)限制性核酸内切酶(限制酶)“分子手术刀”。能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有特异性。经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。(2)DNA连接酶“分子缝合针”。(3)基因进入受体细胞的载体“分子运输车”。最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。其它载体: 噬菌体、动植物病毒2、基因工程的基本操作程序。第一步:目
6、的基因的获取(获取目的基因的方法基因文库 、人工合成、 PCR技术);第二步:基因表达载体的构建(组成:目的基因启动子终止子标记基因+复制原点);第三步:将目的基因导入受体细胞(常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 农杆菌转化法,其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等);第四步:目的基因的检测和鉴定。3、导入动物细胞的方法是显微注射法,常用的受体细胞是受精卵。4、蛋白质工程是通过基因修饰或基因合成对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质。5、植物组织培养技术的理论基础是离体的植物细胞具有全能性。植物组织培养过程:离体的植物组织、器官或细胞愈伤组织胚状体或丛芽试管苗。6、植物
7、体细胞杂交技术中用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,诱导细胞融合的方法有离心、振动、电激等物理方法和聚乙二醇等化学方法。7、动物细胞工程常用的技术手段:动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合等。8、动物细胞培养过程:取动物组织块分散组织细胞(用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理)配制细胞悬液原代培养传代培养。9、动物体细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成一个新的胚胎,这个新的胚胎最终发育为动物个体。10、动物细胞融合技术中常用的诱导因素有聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒和电激等。11、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较:(重点记忆)细胞工程植物体细胞杂
8、交动物细胞融合理论基础细胞的全能性、细胞膜的流动性细胞增殖、细胞膜的流动性融合前处理酶解法去除细胞壁(纤维素酶、果胶酶)注射特定抗原,免疫处理正常小鼠诱导手段物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇(PEG)物理法:离心、振动、电激化学法:聚乙二醇生物法:灭活的病毒(灭活的仙台病毒)诱导过程第一步:原生质体的制备(酶解法)第二步:原生质体融合(物、化法)第三步:杂种细胞的筛选和培养第四步:杂种植株的诱导与鉴定正常小鼠免疫处理动物细胞的融合(物、化、生法)杂交瘤细胞的筛选与培养专一抗体检验阳性细胞培养单克隆抗体的提纯用途和意义克服远缘杂交的不亲和障碍,大大扩展杂交的亲本组合范围应用:白菜-甘蓝等
9、杂种植株制备单克隆抗体诊断、治疗、预防疾病,例如“生物导弹”治疗癌症12、杂交瘤细胞既能无限增殖,又能产生某种特异性抗体(单克隆抗体)。13、单克隆抗体的制备过程:14、.胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术,如体外受精、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等。15、.受精是指精子与卵子结合形成合子的过程,包括受精前的准备阶段和受精阶段。防止多精入卵的两道屏障是透明带反应和卵细胞膜反应。16、卵裂期的特点是细胞分裂方式为有丝分裂,细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加,或略有缩小。17、早期发育的胚胎分为桑椹胚、囊胚和原肠胚3个阶段。18、哺乳动物的体外受精主要包括
10、卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能及受精等主要步骤。19、培养哺乳动物早期胚胎的培养液成分:无机盐、有机物、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分,以及血清、血浆等物质。20、胚胎移植不属于生殖方式,仅属于一种技术,可用于有性和无性生殖产生的胚胎的移植。21、胚胎移植基本程序主要包括:22、胚胎移植的意义是可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。23、对囊胚进行分割时要注意将内细胞团均等分割。24、哺乳动物的胚胎干细胞简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞,在形态上表现为体积小,细胞核大,核仁明显;在功能上具有发育的全能性。25、基因身份证是把个人的致病基因和易感基因检
11、测出来,记录在磁卡上,做成个人基因身份证。26、生物武器的种类包括致病菌、病毒、生化毒剂以及经过基因重组的致病菌等。27、生态经济主要是通过实行“循环经济”的原则,使一个系统产出的污染物,能够成为本系统或者另一个系统的生产原料,从而实现废弃物的资源化,而实现循环经济最重要的手段之一就是生态工程。28、生态工程所遵循的基本原理有物质循环再生原理、物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理、系统学和工程学原理。易错易混知识1、在植物组织培养中,生长素/细胞分裂素比例高时有利于根的分化,比例低时有利于芽的分化,比例适中促进愈伤组织的形成。2、离体的植物体细胞与生殖细胞都可以作为植物组织培养的外植体,
12、因为这些细胞都至少含有一个染色体组,具有全能性。3、愈伤组织的细胞排列整齐而紧密且为高度液泡化、无定型状的薄壁细胞。4、检测受体细胞是否导入了目的基因,以及受体细胞中导入的目的基因是否转录出mRNA,可用相同的目的基因探针进行诊断。5、动物细胞培养与植物组织培养依据的原理都是细胞的全能性。如果要获得转基因植物,可选用植物的体细胞作受体细胞,然后通过组织培养技术获得;如果要获得转基因动物,可选用动物的体细胞作受体细胞,然后通过动物细胞培养技术获得。6、通过转基因方式获得的抗虫棉具有永久抗虫的能力。7、用相同的限制酶切割DNA留下的粘性末端是一定相同的;用不同的限制酶切割不同的DNA留下的粘性末端
13、一定是不相同的。8、在植物组织培养的过程中,脱分化阶段可不需要光照,再分化阶段必需要给予光照。9、在植物组织培养过程中,加入适量的蔗糖不仅可以为细胞提供碳源和能源物质,而且可以调节培养基的渗透压。10、植物产生的种子能发育成新的个体,是种子细胞全能性的体现。11、在微生物培养中,培养基通常采用高压蒸汽灭菌法;接种环通常通过灼烧灭菌;无菌操作台通常通过紫外线进行消毒;人的手双手一般用化学消毒。12、采用转基因方法将人的凝血因子基因导入山羊受精卵,培育出了转基因羊。但是人的凝血因子只存在于转基因山羊的乳汁中。这说明,在该转基因山羊中,只有乳腺细胞中存在人凝血因子基因,而其他细胞中不存在。13、DNA连接酶与DNA聚合酶都是催化磷酸二酯键的形成,但前者只催化游离脱氧核苷酸连接到已有脱氧核苷酸链上,后者催化两个DNA片段的连接。14、通过核移植获得的克隆动物,完全继承了供核个体的遗传性,因此其性状表现只与供核个体相关,与其他个体无关。15、同一株绿色开花植物不同部分的细胞经组织培养获得的愈伤组织细胞基因都是相同的。16、我国古代的“无废弃物农业”,从生态学上看是遵循了物质循环再生原理。1.基因工程2.细胞工程3.胚胎工程生物技术的安全性和伦理问题4.生态工程 11 / 11学科网(北京)股份有限公司