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1、高效液相色谱法测定垂盆草中槲皮素的含量 学院：化学化工 班级：09化学 姓名：冯晶 学号：099060141028 摘 要目的：建立高效液相色谱法测定垂盆草中槲皮素含量的方法。方法：采用Waters2487,流动相为甲醇-水（50：50），检测波长360nm，流速0.800ml/min，柱温为30。结果：槲皮素质量与峰面积有良好的线性关系，线性范围为0.020.4ug（r=0.9994）。槲皮素的平均加样回收率为93.12%，RSD=0.86。结论：该方法简单、重现性好，结果准确可靠，可用于垂盆草中槲皮素的质量控制。关键词：高效液相色谱法；垂盆草；槲皮素 实验部分一.仪器与药品1.1 仪器LC
2、-10ATvp高效液相色谱仪，SPD-10Avp紫外检测器(日本岛津公司)；N3000色谱工作站（浙江大学），FA2004电子天平（ShangHai Balance Instrument Factory of P.R China），KQ-100DA型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司），微量进样器（宁波市镇海玻璃仪器厂），超纯水仪。1.2试剂和药品槲皮素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：100081-200907供HPLC法含量测定），垂盆草药材。甲醇为色谱纯，水为超纯水。其他试剂均为分析纯。二.实验方法与结果2.1色谱条件色谱柱：Hypersil ODS-C18(250mm 4.6mm
3、,5um)(日本岛津公司)，流动相为甲醇-水（50：50），检测波长360nm，流速0.800ml/min，柱温为30，2.2对照品溶液的制备精密取槲皮素2mg置于25ml容量瓶中，加甲醇溶解，稀释定容后超声处理30分钟，摇匀,作为对照品储备液4（1ml 中含有槲皮素0.08mg）。对照品的HPLC色谱图见图1 图1对照品溶液的色谱图2.3 供试品溶液的制备取本品粉末（过二号筛）约0.5g，精密测定，加入甲醇-25%盐酸溶液（4：1）混合溶液25ml,称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇-25%盐酸溶液（4:1）混合溶液补足减失的重量，摇匀，过滤，取滤液，即得。n 图2供试品溶液的色谱图2.4 线性关系的考察精密量取上述0.08mg/ml的对照品溶液。分别准确量取4ul、6ul、8ul、10ul、12ul溶液进样。以峰面积Y（m vs）为纵坐标，质量（ug）为横坐标，进行线性回归分析。得到回归方程为Y=1.8106X-3.3105，r=0.9994.表明槲皮素在0.020.4ug范围内与峰面积积分呈良好的线性关系6。图4 线性关系考察图Y=1.8106X-3.3105R2=0.99940100000020000003000000400000050000006000000700000080000009000000100000000 1 2 3 4 5线性