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1、鸡胚接种技术概述概述 鸡胚接种技术是利用特定时期的鸡胚，培养易感病毒的一种技术。主要用于痘类病毒、黏病毒、疱疹病毒的分离、鉴定、制备抗原和疫苗生产等。一、鸡胚培养病毒的优点1.为一有机整体，有神经血管的分布及脏器的构造。2.鸡胚的组织分化程度较低，通过适当途径接种后，病毒易于繁殖，感染病毒的膜、器官组织以及液体中含有大量病毒。3.来源充足，操作简单，其本身很少携带病毒和细菌，敏感范围广，对接中病毒不产生抗体。二、鸡胚培养病毒的缺点1.不健康的鸡可能帶有病毒、会影响接种及实验结果。2.许多病毒有种属特异性、不能对所有病毒进行接种培养。3.除引起鸡胚死亡的病毒及产生痘疱的病毒外,通常不产生特异性的
2、感染指征,必须利用另外的实验来证明病毒的存在,如血凝和血凝抑制试验。4.鸡食入的抗生素，会残留在体内,并传递给鸡胚,使立克次体等病原体繁殖受到抑制。三、鸡胚的结构与生理 鸡胚是由三个胚层发育而来，即外胚层，中胚层和内胚层。健康的经孵化9-11日龄的鸡胚结构较清晰。三、鸡胚的结构与生理1.卵壳与壳膜 位于鸡胚最外面，是一层坚硬的石灰质硬壳为卵壳，上有细孔，卵壳下层为壳膜，壳膜的主要功能是使气体分子和液体分子在内外两方面进行交换。三、鸡胚的结构与生理2.气室 在卵的钝端,壳膜形成双层,在两层之间即为气室；气室的主要功能是呼吸和调节压力。三、鸡胚的结构与生理3.线毛尿囊膜 位于壳膜之下，为血管丰富的
3、囊膜结构，外为由外胚层形成的线毛膜,内为由内胚层形成的尿囊膜,两膜结合之间为中胚层。绒毛尿囊膜主要是胚胎的呼吸器官,氧气的交换是在膜的血管内通过卵壳孔进行的。三、鸡胚的结构与生理4.羊膜 胚胎最内层的包被,由外胚层组成。羊膜腔盛有约 Iml 的羊水,羊水起初是生理盐水,后来蛋白质含量逐渐增加,胚胎浸泡于其中。三、鸡胚的结构与生理5.尿囊腔 位于绒毛尿囊膜与羊膜之间,内含520ml 的尿囊液,为胚胎的排泄器官。囊液开始为生理盐水,随着尿酸盐的迅速增加,尿囊液开始变混浊,将其冷却即可见到尿酸盐类的沉淀。三、鸡胚的结构与生理6.卵黃囊 主要由内胚层细胞组成,对培养病毒有重要作用,内含卵黄,为胚胎提供
4、养料。三、鸡胚的结构与生理7.卵白 位于卵的锐端,为胚胎发育晚期提供营养。以上是鸡胚的主要结构，围绕鸡胚的生长，羊膜腔直接保护鸡胚，通过绒毛尿囊膜上的血管，透过气室呼吸、并吸收卵黄内的营养，再将代谢废物排入尿囊腔。四、鸡胚的抚育和检查1.受精鸡卵的供应 必须没有新城疫病毒、布氏杆菌和类胸膜肺炎菌的感染。受精卵应不携带鸡白血病病毒。用于研究立克次体及鹦鹉热等病原体的受精卵必须来自未食用抗菌素的鸡群。四、鸡胚的抚育和检查2.鸡胚的抚育条件 受精鸡卵孵育时不要擦洗，以免受细菌污染。最好用能自动调节温度、湿度、气流及翻卵的孵卵箱孵育。孵育应在3739、40%70%的相对湿度下进行。湿度太高会使气室发育过度，而湿度过低又会导致气室发育不良，甚至造成鸡胚死亡。通气也很重要，如果空气不流通，也可造成鸡胚死亡。为了避免胚胎膜粘连和胚胎发育不均匀，应每隔一段时间转动一次受精鸡卵，也就是翻蛋。四、鸡胚的抚育和检查3.检蛋 检卵要在孵育45天后进行。活的鸡胚绒毛尿囊膜界线较明显，上面的血管清晰可见、成网状，可看到明显的胚胎自主运动。如果胚胎活动呆滞或不能自主运动，血管模糊、变细、折断脱落，绒毛尿囊膜界线模糊，说明鸡胚已濒临死亡或已经死亡