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1、 第2节 微生物的培养技术及应用一 微生物的基本培养技术（第2课时）第1章 发酵工程 在微生物学中，将接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物。由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养纯培养物物。相关概念微生物纯培养的步骤培养物：纯培养物：纯培养：获得纯培养物的过程就是纯培养。配制培养基灭菌接种分离培养等三微生物的纯培养固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体，这就是菌落。2.接种和分离方法：平板划线法和稀释涂布平板法微生物群分散或稀释单个细胞单个菌落繁殖1.原理：三微生物的纯培养3.过程：配制培养基
2、灭菌倒平板接种和分离培养03【探究 实践】酵母菌的纯培养接种和分离酵母菌培养酵母菌灭菌倒平板配制培养基制备培养基03【探究 实践】酵母菌的纯培养A、配制培养基1、制备培养基03【探究 实践】酵母菌的纯培养1、制备培养基B.灭菌观看视频，回答问题：1.倒平板时的培养基温度？2.倒平板要在什么附近进行？3.倒平板时为什么不能将培养皿完全打开？4.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？防止培养基蒸发的水分落入培养基造成污染50酒精灯火焰防止空气中杂菌污染【探究 实践】1、制备培养基C、倒平板将所倒平板放入37的恒温箱中培养12h24h，观察是否有菌落存在以确定是否被污染或灭菌是否彻底。怎么确定所倒平板未被
3、杂菌污染？平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。实验注意事项、分析、思考03【探究 实践】酵母菌的纯培养1、制备培养基C、倒平板注意待培养基冷却至待培养基冷却至50 左右时，在左右时，在酒精灯火焰附近酒精灯火焰附近倒平板。倒平板。温度温度：50左右左右操作操作：在酒精灯火焰附近：在酒精灯火焰附近冷凝后平板冷凝后平板倒置倒置问题思考与分析：问问1.怎么确定所倒平板未被杂菌污染？将所倒平板放入37的恒温箱中培养12h24h，观察是否有菌落存在以确定是
4、否被污染或灭菌是否彻底。2.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？最好不要用这个平板培养微生物。防止空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生。观看视频，回答问题：1.划线前灼烧接种环目的？2.为什么待冷却后再进行划线？3.第二次划线要从什么位置开始划？2、接种和分离酵母菌的纯培养平板划线法平板划线法单个细胞微生物群单个菌落连续划线连续划线稀释分散稀释分散生长繁殖生长繁殖灼烧接种环，直至灼烧接种环，直至接种环金属丝接种环金属丝烧红烧红将皿盖打开一条将皿盖打开一条缝隙缝隙，将沾，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板有菌种的接种环迅速伸
5、入平板内，划内，划3-53-5条平行线，条平行线，盖上皿盖盖上皿盖。试管口通过火试管口通过火焰，并焰，并塞上棉塞塞上棉塞 在火焰旁在火焰旁冷却冷却接种环，拔接种环，拔出酵母菌培养液试管的棉塞出酵母菌培养液试管的棉塞 试管口试管口通过火焰通过火焰 在火焰在火焰附近附近用接用接种环蘸取一环菌液种环蘸取一环菌液 灼烧接种环，待其冷却后，从第一次灼烧接种环，待其冷却后，从第一次划线的划线的末端末端开始作第二次划线。重复以开始作第二次划线。重复以上操作，作第三、四、五次划线。上操作，作第三、四、五次划线。2、接种和分离酵母菌的纯培养3.在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？【合作探究】请小组讨
6、论以下问题：4.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？5.在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？6.为什么不能将最后一次的划线与第一次的划线相连？以免接种环温度太高，杀死菌种。将聚集的菌体逐步稀释，以便获得单个菌落。1.为什么再操作的第一步要灼烧接种环？2.为什么从第二次划线开始，每次划线之前都要灼烧接种环？杀死接种环上可能存在的微生物杀死上次划线接种环上残留的菌种，使下一次划线时菌种来源于末端避免残留的菌种污染环境和操作者2、接种和分离酵母菌的纯培养思考1：为什么要将平板倒置？思考2：为什么要同时放入未接种的平板？可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成
7、污染作对照，该培养基无菌落说明培养基没有污染完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入28左右(培养温度因酵母菌种类的不同而稍有差异)的恒温培养箱中培养24-48 h。3、酵母菌培养结果分析与评价：1.在未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有，说明了什么？2.在接种酵母菌的培养基上，如果你观察到了不同形态的菌落，可能是由哪些原因引起的吗？如果有，说明培养基被杂菌污染。如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。三微生物的纯培养酵母菌的纯培养2.接种和分离酵母菌课堂小结1.制备培养基3.培养酵母菌配制培养基（马铃薯、葡萄糖、琼脂、水）灭菌倒平板（在酒精灯火焰附近操作）培养基：湿热灭菌（高压蒸汽灭菌锅）培养皿：干热灭菌（干热灭菌锅）用接种环在固体培养基上用平板划线法接种平板倒置，放入28左右的恒温培养箱培养思维导图