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1、微生物的培养和利用第1页，共16页，编辑于2022年，星期六北京考试说明uu微生物的培养和分离微生物的培养和分离uu某种微生物数量的测定某种微生物数量的测定uu培养基对微生物的选择作用培养基对微生物的选择作用uu利用微生物进行发酵来生产特定的产物利用微生物进行发酵来生产特定的产物uu发酵过程中亚硝酸盐含量的测定发酵过程中亚硝酸盐含量的测定第2页，共16页，编辑于2022年，星期六微生物知识和技术思维导图微生物知识和技术思维导图第3页，共16页，编辑于2022年，星期六n1.1.哪些生物属于微生物？（举例说明）哪些生物属于微生物？（举例说明）有细胞结构真菌类：酵母菌、霉菌衣藻、硅藻草履虫、变形虫
2、细菌、蓝藻放线菌、衣原体支原体原核生物无细胞结构：病毒原生生物第4页，共16页，编辑于2022年，星期六n2.2.培养这些微生物需要哪些营养条件？培养这些微生物需要哪些营养条件？主要种类主要种类作用作用碳源碳源COCO2 2、NaHCONaHCO3 3、糖类、脂肪、糖类、脂肪酸等酸等构成结构物质、能构成结构物质、能源物质源物质氮源氮源N N2 2、NHNH3 3、铵盐、硝酸盐、铵盐、硝酸盐、尿素、蛋白胨尿素、蛋白胨合成蛋白质、核酸合成蛋白质、核酸等等生物因子生物因子维生素、氨基酸、嘌呤碱维生素、氨基酸、嘌呤碱和嘧啶碱和嘧啶碱补充生长因子补充生长因子其他其他水和无机盐水和无机盐生命必需物质生命必
3、需物质第5页，共16页，编辑于2022年，星期六3.3.培养基的种类和作用？培养基的种类和作用？按性质分按性质分固体培养基：用于固体培养基：用于分离分离、鉴定鉴定半固体培养基：用于观察、保持菌种半固体培养基：用于观察、保持菌种液体培养基：用于液体培养基：用于扩大培养扩大培养或或生产生产按营养分天然培养基（成分不明确）：用于生产生产合成培养基（成分明确）：合成培养基（成分明确）：分离分离、鉴定按用途分按用途分选择培养基：用于选择培养基：用于分离分离菌种菌种鉴别培养基：用于鉴别培养基：用于鉴别不同种微生物第6页，共16页，编辑于2022年，星期六鉴别尿素分解菌加入刚果红，菌落周围加入刚果红，菌落周
4、围产生透明圈产生透明圈鉴别纤维素分解菌未接种的尿素未接种的尿素培养基培养基10-510-4加入酚红指示剂加入酚红指示剂第7页，共16页，编辑于2022年，星期六伊红美蓝培养基伊红美蓝培养基乳糖乳糖 有机酸有机酸大肠杆菌大肠杆菌和伊红美蓝发生反应，和伊红美蓝发生反应，出现紫色带有金属光出现紫色带有金属光泽的菌落泽的菌落如利用伊红美兰培养基鉴定并分离大肠杆菌如利用伊红美兰培养基鉴定并分离大肠杆菌第8页，共16页，编辑于2022年，星期六氨苄青霉素氨苄青霉素X-galX-galIPTGIPTG（卵磷脂）卵磷脂）第9页，共16页，编辑于2022年，星期六1.1.微生物培养的基本程序微生物培养的基本程序
5、培养基的配制称量溶化调pH分装包扎灭菌（高压蒸汽灭菌）接种固体培养基平板划线（接种环）、稀释涂布（涂布器）液体培养基用接种环蘸取菌液（扩大培养）培养 固体培养基倒置，37恒温培养箱，24h左右液体培养基空气浴或水浴培养箱（摇床），震荡培养固体培养基划线的末端出现单菌落液体培养基培养液变浑浊观察观察 废弃菌种和培养基灭菌后丢弃废弃菌种和培养基灭菌后丢弃 第10页，共16页，编辑于2022年，星期六1.平板划线法 为什么能获得单菌落？操作时应注意的问题？未获得单菌落可能的原因有哪些？第11页，共16页，编辑于2022年，星期六平板划线法第12页，共16页，编辑于2022年，星期六2.稀释涂布平板法
6、稀释涂布平板法为什么要对菌液进行梯度为什么要对菌液进行梯度稀释？稀释？稀释的浓度为多少才算合适稀释的浓度为多少才算合适？每一个稀释度的菌液接种1 1个平板可以吗？为什么个平板可以吗？为什么？稀释涂布法还可以用来计数，其记录的活菌数比实际数目多还是少？为什么？第13页，共16页，编辑于2022年，星期六n n计算公式：计算公式：n n每克样品菌数每克样品菌数=同稀释度菌落平均数同稀释度菌落平均数0.1100.110第14页，共16页，编辑于2022年，星期六 纯化技术将一个优良菌株的单个菌落分离出来，常用斜面接种法第15页，共16页，编辑于2022年，星期六n现有如下几种混合微生物，请设计方案，
7、将其一一分离（只写出简单的实验思路即可）酵母菌、硝化细菌、乳酸杆菌、耐高盐的金黄色葡萄球酵母菌、硝化细菌、乳酸杆菌、耐高盐的金黄色葡萄球酵母菌、硝化细菌、乳酸杆菌、耐高盐的金黄色葡萄球酵母菌、硝化细菌、乳酸杆菌、耐高盐的金黄色葡萄球菌、尿素分解菌、纤维素分解菌菌、尿素分解菌、纤维素分解菌菌、尿素分解菌、纤维素分解菌菌、尿素分解菌、纤维素分解菌菌种菌种选择培养基选择培养基鉴别培养基鉴别培养基酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌培养基中加入青霉素培养基中加入青霉素金黄葡萄球菌金黄葡萄球菌培养基加入高浓度食盐溶液培养基加入高浓度食盐溶液圆褐固氮菌圆褐固氮菌配制的培养基不含氮素配制的培养基不含氮素分解尿素的细菌分解尿素的细菌以尿素为氮源固体培养基以尿素为氮源固体培养基培养基加入酚红培养基加入酚红大肠杆菌大肠杆菌伊红伊红-美兰培养基美兰培养基纤维素分解菌纤维素分解菌培养液含有纤维素培养液含有纤维素培养基加入刚果红液培养基加入刚果红液第16页，共16页，编辑于2022年，星期六