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1、微生物的实验室培养第1页，共38页，编辑于2022年，星期六是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称一、微生物一、微生物特点：特点：.1.个体微小，结构简单个体微小，结构简单;在形态上，个体微小，肉眼看不见，需用显微镜观察，细胞在形态上，个体微小，肉眼看不见，需用显微镜观察，细胞大小以微米和纳米计量。有的甚至没有细胞结构大小以微米和纳米计量。有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作不能进行光合作用用2.繁殖快繁殖快:生长繁殖快，在实验室培养条件下细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代。生长繁殖快，在实验室培养条件下
2、细菌几十分钟至几小时可以繁殖一代。3.代谢类型多，活性强。代谢类型多，活性强。4.分布广泛分布广泛:有高等生物的地方均有微生物生活，动植物不能生活的极端环境也有微生物存在。有高等生物的地方均有微生物生活，动植物不能生活的极端环境也有微生物存在。5.数量多数量多:在局部环境中数量众多，如每克土壤含微生物几千万至几亿个。在局部环境中数量众多，如每克土壤含微生物几千万至几亿个。6.易变异易变异:相对于高等生物而言，较容易发生变异。在所有生物类群中，已知微生物种类的数量仅次于被相对于高等生物而言，较容易发生变异。在所有生物类群中，已知微生物种类的数量仅次于被子植物和昆虫。微生物种内的遗传多样性非常丰富
3、。子植物和昆虫。微生物种内的遗传多样性非常丰富。所以微生物是很好的研究对象，具有广泛的用途。所以微生物是很好的研究对象，具有广泛的用途。第2页，共38页，编辑于2022年，星期六生物动物界植物界原生生物界原核生物界真菌界病毒第3页，共38页，编辑于2022年，星期六原生生物界草履虫变形虫疟原虫返回第4页，共38页，编辑于2022年，星期六第5页，共38页，编辑于2022年，星期六真菌界u酵母菌u霉菌u食用菌第6页，共38页，编辑于2022年，星期六真菌真菌第7页，共38页，编辑于2022年，星期六如图是酵母菌电子显微镜如图是酵母菌电子显微镜下的形态结构下的形态结构酵母菌和霉菌酵母菌和霉菌青霉青
4、霉第8页，共38页，编辑于2022年，星期六第9页，共38页，编辑于2022年，星期六蘑菇蘑菇第10页，共38页，编辑于2022年，星期六孢子是一种生殖细胞孢子是一种生殖细胞,但不需要结合就但不需要结合就 直接发育成直接发育成新个体新个体.孢子囊孢子囊孢子孢子直立菌丝匍匐菌丝曲霉曲霉第11页，共38页，编辑于2022年，星期六病毒u动物病毒u植物病毒u噬菌体第12页，共38页，编辑于2022年，星期六病毒的结构病毒的结构第13页，共38页，编辑于2022年，星期六病毒病毒 第14页，共38页，编辑于2022年，星期六SARS冠状病毒、冠状病毒、禽流感病毒禽流感病毒第15页，共38页，编辑于20
5、22年，星期六朊病毒（蛋白质病毒）第16页，共38页，编辑于2022年，星期六原核生物界u细菌u蓝藻u支原体u衣原体u放线菌u立克次氏体第17页，共38页，编辑于2022年，星期六细菌的外形与大小图图1-1 常见的三种细菌典型形态常见的三种细菌典型形态A.球菌球菌 B.杆菌杆菌 C.弧菌弧菌第18页，共38页，编辑于2022年，星期六第19页，共38页，编辑于2022年，星期六 有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做休眠体，叫做芽孢芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强
6、的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3 3小时小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.第20页，共38页，编辑于2022年，星期六菌落：n单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落形态结构的子细胞群体，叫做菌落。n菌落是鉴定菌种的重要依据。
7、菌落是鉴定菌种的重要依据。第21页，共38页，编辑于2022年，星期六细菌的营养类型 n根据细菌所利用的根据细菌所利用的能源和碳源能源和碳源的不同，的不同，将细菌分为两大营养类型。将细菌分为两大营养类型。n自养菌自养菌:分类分类,举例举例?n异养菌异养菌:腐生菌腐生菌寄生菌寄生菌 大部分病原菌大部分病原菌光合自养型光合自养型:光合细菌光合细菌化能自养型化能自养型:硝化细菌硝化细菌,铁细菌铁细菌,硫细菌硫细菌第22页，共38页，编辑于2022年，星期六菌落细菌的菌落特征因细菌的菌落特征因种而异种而异 第23页，共38页，编辑于2022年，星期六放线菌放线菌1 1、结构：、结构：单细胞原核单细胞原
8、核分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）第24页，共38页，编辑于2022年，星期六（二）培养基（二）培养基 培养基（培养液）是由人工方法配制而成培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。（1 1）按物理状态分：）按物理状态分：固体培养基固体培养基和和液体培养基、液体培养基、半固体培养基半固体培养基。（2 2）按功能分：）按功能分：选择培养基选择培养基和和鉴别培养基鉴别培养基。（3 3）按成分分：）按成分分：天然培养基天然培养基和和合成培养基合成培养基。1.1.培养基的类型培养基的类型第25
9、页，共38页，编辑于2022年，星期六固体培养基：菌落固体培养基：菌落第26页，共38页，编辑于2022年，星期六液体培养基：液体培养基：表面生长表面生长均匀混浊生长均匀混浊生长沉淀生长沉淀生长第27页，共38页，编辑于2022年，星期六半固体培养基：半固体培养基：无动力无动力 有动力有动力(弥散弥散)第28页，共38页，编辑于2022年，星期六2.2.不同的微生物往往需要采用不同的培养不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方基配方 3.3.不管哪种培养基，一般都含有不管哪种培养基，一般都含有水水、碳源碳源、和和氮源氮源、无机盐无机盐、等等营养物质，另外还需营养物质，另外还需要满足微生物生长对
10、要满足微生物生长对pHpH、特殊营养物质以特殊营养物质以及氧气的要求及氧气的要求第29页，共38页，编辑于2022年，星期六4.4.培养基的用途培养基的用途液体培养基：增菌、工业生产液体培养基：增菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计固体培养基：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种数、保藏菌种半固体培养基：动力检测半固体培养基：动力检测第30页，共38页，编辑于2022年，星期六水无机盐碳源氮源生长因子概念供给微生物碳素营养的物质能被微生物吸收利用的含氮物质某些微生物生长所必需的少量物质来源磷酸盐、硫酸盐、钾、钠、钙、镁、铁等盐类无机碳:CO2、NaHCO3等有机碳源：糖类（最常
11、）、脂肪酸、花生粉饼、石油等无机氮源：N2、氨、铵盐、硝酸盐等有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、玉米浆、豆饼粉等维生素、氨基酸、碱基、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液（肝脏浸出液、麦芽汁）作用微生物细胞的组成成分，溶解物质，生物化学反应的介质为微生物生长繁殖及其一系列生命活动提供不可缺少的矿质元素要用于合成微生物的细胞物质和一些代谢产物;异养微生物的主要能源物质.主要用于合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物。一般是酶和核酸的组成成分。说明不同种类的微生物，对碳源的需要差别较大，而且微生物对碳源的需求量最大。异养微生物：含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源微生物之所以要补充生长因
12、子，往往是由于缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限第31页，共38页，编辑于2022年，星期六三、无菌技术三、无菌技术1.1.无菌技术的概念无菌技术的概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。有防止杂菌污染的方法。成功地培养微生物的关键。成功地培养微生物的关键。第32页，共38页，编辑于2022年，星期六（）（）消毒定义：消毒定义：2.2.消毒与灭菌的概念及两者的区别消毒与灭菌的概念及两者的区别（2 2）灭菌的定义：）灭菌的定义：3.3.常用的消毒与灭菌的方法常用的消毒与灭菌的方法条件结果能否消灭芽孢和孢子常用方法消毒较为温和的物理
13、或化学方法杀死物体表面或内部的部分对人体有害的微生物不能煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂消毒法紫外线消毒法等灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有微生物能高压蒸汽灭菌法干热灭菌法灼烧灭菌法第33页，共38页，编辑于2022年，星期六方 法操作过程应用范围消毒煮沸消毒法100煮沸56min日常生活中广泛使用巴氏消毒法6080下处理1530min牛奶、啤酒、果酒和果酱等不宜进行高温消毒的液体化学药物消毒法用体积分数为7075%的乙醇、碘酒涂抹，来速水喷洒等用于皮肤、伤口、动植物组织表面消毒，空气、手术器械、塑料或玻璃器皿等紫外线消毒法30W紫外灯照射30min接种室空气灭菌灼烧灭菌法酒精灯火焰灼烧微生物接
14、种工具如接种环、接种针或其它金属用具等，接种过程中试管口活锥形瓶瓶口等干热灭菌法电热鼓风干燥箱160170加热12h玻璃器皿（如吸管、培养皿等）、金属用具等凡是不适宜用其他方法灭菌而又能耐高温的物品。高压蒸汽灭菌法100kPa、121维持1530min培养基及多种器材、物品第34页，共38页，编辑于2022年，星期六1 1、灼烧灭菌、灼烧灭菌灭菌的方法：灭菌的方法：第35页，共38页，编辑于2022年，星期六2 2、干热灭菌：、干热灭菌：160-170 160-170 下加热下加热1-1-2h2h。3 3、高压蒸气灭菌：、高压蒸气灭菌：100kPa100kPa、121 121 下维下维持持15-30min.15-30min.第36页，共38页，编辑于2022年，星期六4.原理：在高温高压、化学药剂、强酸强碱作用下，使微生物蛋白质凝固变性，从而达到杀菌的目的。第37页，共38页，编辑于2022年，星期六再见第38页，共38页，编辑于2022年，星期六