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1、 受体阻滞剂代表药 摘要：目的探讨肺心病痛人抗M2、M3受体自身抗体的产生、作用及其与右心结构的关系。方法 用SAELISA法对108例肺伤心病人和30名健康人血清中抗M2、M3受体自身抗体进行检测，并与血气分析及心脏超声学检查结果进行比较。结果肺心病组病人血清抗M2、M3受体自身抗体的阳性率及平均几何滴度48.15，80(1.8460.351)；40.74，53(1.7250.273)均高于比照组13.33，40(1.6020.369)；10.00，20(1.3010.000)(P2受体自身抗体阴性组、阳性组指标比较及比照组与肺心病组中M3受体自身抗体阴性组、阳性组指标比较均表现为：血氧分压
2、(PaCO2)呈渐渐降低趋势，二氧化碳分压(PaCO2)右室流出道内径、右室内径呈渐渐增高趋势(P0.05)。肺心病病人M3受体自身抗体单阳性组，M2受体自身抗体单阳性组，M2、M3受体自身抗体双阳性组在心脏指标方面，3组呈渐渐增高趋势(P0.05)。结论M2、M3受体自身抗体可能与肺心病的发病过程亲密相关；M2、M3受体自身抗体可能与肺心病发病过程中的心脏损害有关；M2受体自身抗体在肺心病发病过程中可能起着较M3受体自身抗体更为主要的作用，两者在心脏形态学变更过程中可能起着协同作用。 关键词：肺心病；M2受体自身抗体；M3受体自身抗体 中图分类号：R541.5 R256.2 文献标识码：B文
3、章编号：16721349(2007)04029503 长期以来慢性肺源性心脏病(简称肺心病)探讨主要集中在缺氧导致肺动脉高压引起肺心病这一主要机制上。但近年来一些探讨发觉，大多数肺心病病人仅为轻中度肺动脉高压1，2。单纯的肺动脉压力增高并不能完全说明慢性肺心病的发病机制。因此，推想可能还有其他因素参加肺心病的发病。有试验证明，肺心病在慢性发病过程中，伴有免疫系统紊乱，免疫细胞活性增高，免疫球蛋白含量增加3。提示免疫因素可能参加了肺心病的发生发展。目前探讨已经证明心脏存在M2、M3受体。在肺心病大鼠模型中M2受体自身抗体的阳性率和滴度明显增高，且与大鼠左右心室病理变更高度相关。前期试验证明缺氧肺
4、心病大鼠模型中抗M3受体自身抗体阳性率和滴度增高。这些都提示在肺心病病人出现右心衰竭的发病过程中可能也有心脏受体抗体的免疫学机制参加，尤其可能有M2、M3受体自身抗体的参加。因此，探讨肺心病病人抗M2、M3受体自身抗体的产生、作用及其与右心结构的关系，为进一步探讨肺心病发病机制供应新的思路。 1资料与方法 1.1探讨对象选取2005年4月2006年11月我院住院及门诊的肺心病病人108例，全部入选病例均采纳其次次全国肺心病专业会议制定的诊断标准4，明确诊断为慢性堵塞性肺疾病(COPD)所致肺心病急性发作期的肺心病病人；同时选取我院门诊体检健康人30名作为比照。全部人选者均记录病史、体格检查，并
5、进行血气分析、心脏超声学检查。全部入选者均解除自身免疫性疾病及其他心脏疾病，近1个月未用免疫抑制剂治疗。 1.2 方法 1.2.1标本采集全部受检者均于采血前12 h禁食，于早晨07：0008：00抽取5 mL静脉血，静置，经43000 r/min离心20 min，收集上清液(血清)，放人70冰箱保存待测。 1.2.2抗原肽段的合成 M3受体抗原肽段的合成：根据人M2胆碱能受体细胞外其次环功能表位肽段序列(169193位氨基酸残，VRTVEDGECYIQFFSNAAVTFGTAIC)，由武汉生物化学探讨所合成。M3受体抗原肽段的合成：根据人M3胆碱能受体细胞外其次环功能表位肽段序列(1836位
6、氨基酸残，SSWIHSPDGLPPGTVTH)，由西安美联生物科技有限公司合成。 1.2.3链亲和素一酶联免疫吸附试验(SAELISA)包被抗原：将合成的M2、M3受体特异性抗原多肽配成浓度为5L/mL的抗原包被液，包被空白ELISA反应板，4冰箱过夜。封闭ELISA板：用含有5小牛血清的磷酸盐缓冲液(1PBS溶液，0.1Tween20和5小牛血清，pH 7.4，PMT)封闭ELISA板，37水浴1 h。稀释血清：将待测血清从1:20的浓度起倍比稀释于PMT溶液中，加样于ELISA板，37水浴1h。加标记有生物素的二抗：将生物素化羊抗人IgG单克隆抗体，按1:1000的浓度稀释于PMT溶液中，
7、加样于ELISA板，37水浴1 h。加标记有辣根过氧化酶的链亲和素将：SAHRP以1:1000的浓度稀释于PMT溶液中，加样于ELISA板，37水浴1 h。加底物：将底物(ABTS)按2 nmol/L的浓度溶于pH5.O的磷酸-枸橼酸底物缓冲液中，临加样前加入H2O2(2.5 mmol/L)，37水浴30 min，待反应稳定后测定光密度值。测定光密度值(OD)：用酶标仪于405nm处测定各孔的光密度值。以上步骤每孔加样50L，每步终了时用PBST溶液洗涤3次，每次5 min。 1.2.4结果判定抗体定性判定：P/N=(标本OD值空白OD值)(阴性OD值空白OD值)，以PN值2.1为阳性。抗体效
8、价判定：将血清标本从1:20起连续倍比稀释，以出现P/N值2.1的最高稀释度作为该标本的效价。 1.2.5 心脏超声心动图检查 SSH140A彩色心脏超声心动图检查仪(日本，东芝)。视察指标为：右室流出道内径、右室内径。 1.2.6 血气分析AVL995全自动血气分析仪(瑞典产)。 视察指标为：动脉血氧分压(PaO2)、二氧化碳分压(PaCO2)。 1.3统计学处理计量资料用均数标准差 描述，抗体滴度以几何均数标准差 表示，计数资料用百分数描述。两组间比较采纳T检验或X2检验，多组间比较采纳单因素方差分析及SNKq检验或秩和检验。用SPSS 11.5软件处理，以P0.05为差异有统计学意义。
9、2结果 2.1 两组M2、M3受体自身抗体阳性率及抗体滴度测定结果肺心病组病人血清M2受体的自身抗体的阳性率及抗体滴度48.15，80(1.8460.351)均高于比照组13.33，40(1.6020.369)，两组比较差异有统计学意义(P0.05)。肺心病组病人血清M3受体的自身抗体的阳性率及抗体滴度40.74，53(1.7250.273)均高于比照组10.00，20(1.3010.000)，两组比较差异有统计学意义(P0.05)。 2.2肺心病组中M2受体自身抗体阳性组、阴性组与比照组指标的比较3组在年龄、性别、体重指数等方面无统计学意义(P0.05)。比照组、M2受体自身抗体阴性组、M2
10、受体自身抗体阳性组3组比较PaO2(92.807 mmHg4.035 mmHg、61.461mmHg13.897 mmHg、47.539 mmHg13.879 mmHg)呈渐渐降低趋势，PaCO2(39.377 mmHg3。477 mmHg、50.689 mmHg7.495mmHg、59.865mmHg10.483mmHg)、右室流出道内径(25.067 mm2.840 mm、32.714 mm2.537 mm、36.6152.499 mm)、右室内径(18.700 mm2.879 mm、24.107 mm2.973 mm、呈渐渐增高趋势，差异有统计学意义(P0.05)。 2.3 肺心病组中M
11、3受体自身抗体阳性组、阴性组与比照组指标的比较 3组在年龄、性别、体重指数等方面无统计学意义(P0.05)。比照组、M3受体自身抗体阴性组、M3受体自身抗体阳性组3组比较PaO2(92.8074.035)mmHg、(61.35814.170)mmHg、(46.11812.752)mmHg呈渐渐降低趋势，PaCO2(39.3773.477)mmHg、(51.4819.937)mmHg、(60.3827.884)mmHg、右室流出道内径(25.0672.840)mm、(33.6882.693)mm、(35.9093.421)mm、右室内径(18.7002.879)mm、(24.8132.705)m
12、m、(26.5462.956)mm呈渐渐增高趋势，差异有统计学意义(P0.05)。 2.4肺心病病人M3受体自身抗体单阳性组、M2受体自身抗体单阳性组、M2、M3受体自身抗体双阳性组指标的比较3组在年龄、性别、体重指数、PaO2、PaCO2方面无统计学意义(P0.05)。在右室流出道内径(31.8571.345)mm、(35.0002.000)mm、(37.8002.178)mm、右室内径(23.5712.637)mm、(25.8181.251)mm、(27.9331.907)mm呈渐渐增高趋势，差异有统计学意义(P0.05)。 3讨论 随着近年来对心脏M受体(毒蕈碱乙酰胆碱能受体)各亚型相识
13、的渐渐加深，M受体在心脏功能调整方面作用的探讨日益受到重视。M受体属于G蛋白耦联受体，通过与不同的鸟苷酸调整蛋白(G蛋白)结合，引起不同的生理生化效应。有探讨显示在某些病理条件下，血清抗M受体抗体的产生与疾病的发生、发展亲密相关5。 Magnusson等6与Fu等7相继发觉在扩张性心肌病(DCM)病人血清中存在M2受体的自身抗体，提出可能与心肌病的发病有关。此后，M2受体自身抗体相继在高血压性心肌病、风湿性心肌病、缺血性心脏病等多种心脏疾病中发觉，且抗体滴度明显高于正常人8，9。本探讨结果显示，肺心病病人血清M2受体的自身抗体的阳性率及抗体滴度(48.15，80)明显高于比照组(13.33，4
14、0)(P0.05)。证明M2受体自身抗体的产生可能与肺心病的发生发展有亲密关系。进一步分析肺心病病人M2受体自身抗体阳性组与阴性组的临床资料，结果显示：M2受体阳身抗体阳性组病人的动脉PaCO2较低，动脉血PaCO2较高。而右室流出道内径、右室内径及左室内径均增大，与阴性组比较差异有统计学意义(P0.05)。表明M2受体自身抗体的产：生与肺心病心脏形态学变更亲密相关。慢性肺心病病人的急性发作多并发呼吸衰竭、心力衰竭，使得机体长期或反复处于高碳酸血症和缺氧状态，可能诱发了心脏M2受体自身抗体的产生。而自身抗体反过来又通过影响受体功能而加剧心脏病理改变和功能失调8，10。因此在肺心病出现右心衰竭的
15、发病过程中可能也有心脏受体抗体的免疫学机制参加。 Hellengen应用放射自显影技术首次证明心脏上还存在M3受体，此后又阐明白M3受体是通过磷脂酶C(PLC)途径发挥作用的11。马满玲等12从胆碱对大鼠和家兔心脏M3受体作用试验探讨中也证明心肌上存在M3受体。探讨显示在各种心脏疾病病理过程中都伴有氧化应激反应13。心肌在缺氧状况下可产生氧自由基，大量氧自由基可引起心肌组织的严峻损伤。李丽等14以外源性H2O2诱导大鼠培育心肌细胞损伤模型为基础，赐予M3受体激烈剂胆碱和M3受体阻断剂4DAMP进行干 预，结果显示：M3受体激烈对H2O2诱导的心肌细胞损伤有爱护作用。Yang等15探讨发觉，激烈
16、心肌M3受体可激活Bcl2和ERK等抗凋亡信号分子，并抑制凋亡前体蛋白Fas和p38MAPK的表达，削减细胞内Ca2超载，从而发挥对心肌细胞的爱护作用。本探讨发觉，在肺心病病人的血清中存在M3受体自身抗体，其阳性率和抗体滴度(40.74，53)均高于比照组(10.00，20)，PO.05。提示M3受体自身抗体可能与肺心病的发病有关。进一步分析肺心病组中M3受体自身抗体阳性组与阴性组临床资料显示：M3受体自身抗体阳性组病人的PaCO2较低，PaCO2较高。而右室流出道内径、右室内径及左室内径均增大与阴性组比较差异有统计学意义(P0.05)。进一步提示M3受体自身抗体可能也与肺心病心脏形态学变更有
17、关，推想肺心病病人M3受体自身抗体表达增加，该抗体与M3受体长期结合，可以降低M3受体对乙酰胆碱的敏感性，从而抑制心肌细胞中的Bcl2(凋亡抑制基因)蛋白表达，加速心肌细胞凋亡，进而抑制了对心肌细胞的爱护作用，同时还可以造成M3受体的进行性破坏，导致受体的降解，数量削减，以上可能是导致心功能从“代偿”向“失代偿”转折的缘由之一。 本探讨结果显示，M2受体自身抗体与M3受体自身抗体均可能与肺心病的发生发展有关，那么两者的关系如何?故本探讨又将肺心病病人分为M3受体自身抗体单阳性组、M2受体自身抗体单阳性组及M2、M3受体自身抗体双阳性组，3组进行比较显示：M2受体自身抗体单阳性组右室流出道内径、
18、右室内径及左室内径明显高于M3受体自身抗体单阳性组，提示M2受体自身抗体在肺心病病人心脏结构改变过程中所起的作用较M3受体自身抗体明显；同时，M2、M3受体自身抗体双阳性组心脏指标较单阳性组明显增高，表明两者可能有协同作用。分析以上结果可能与心脏上M受体分布数量有关。有探讨显示，M受体各亚型在心房和心室表达水平各不相同，但从总量上看，心房和心室M受体表达水平无明显差异。心脏上主要存在M2受体，M3受体只占316。 总之，M2受体自身抗体与M3受体自身抗体的产生可能参加了肺心病的发生发展，导致心脏病理改变和功能失调，且两者呈协同作用，其中M2体自身抗体起着更为主要的作用，但两者作用的详细机制及其
19、二者的相互关系有待于进一步探讨。 参考文献： 1罗慰慈现代呼吸病学M北京：人民军医出版社，1997：4357 2张珍祥慢性堵塞性肺疾病缓解期肺循环血流淌力学的探讨J中华结核和呼吸杂志，1991，14：237 3胡觉文，王晓玲，宗文九慢性肺心病患者的免疫功能与临床视察J临床内科杂志，1994，11(2)：2930 4张珍祥慢性肺源性心脏病M/叶任高，陆再英内科学第6版北京：人民卫生出版社，2004：8691 5Fu LXAntiM2muscarinic receptor autoantibodies and idiopathicdilated cardiomyopathyJInt J Cardi
20、ol，1996，54：127135 6Magnusson Y，Marullo S，Hoyer s，et alMapping of a functional au-toimmune epitope on the 1adrenergic receptor in patients with idio-pathic dilated cardiomyopathyJJ Clin Invest，1990，86：1658 7 Fu LX，Yvonne M，ClaesMakanB，et alLocalization of afunction-al autoimmune eptiope on the muscar
21、nic acetylcholine receptor2 inpatients with idiopathic dilated cardiomyopathyJJ Clin Invest，19939：1964 8张麟，张健，陶贞寅，等高血压性心脏病抗G蛋白偶联1肾上腺素能受体与M2胆碱能受体自身抗体的初步探讨J高血压杂志，1998，6(1)：57 9 Matsui s，Fu LX，Shimizu M，et alDilated cardiomyopathy definesserum autoantibodies against Gproteincoupled cardiovascular re-ce
22、ptorsJImmnuol，1995，21：8588 10李静，胡大一，张麟，等靶剂量比索洛尔治疗慢性心力衰竭对心脏1，和M2受体自身抗体和心功能的影响J中华心血管病杂志，2003，31(9)：665669 11Ponicke K，HeinrothHoffnmnn I，Brodde OE Demonstration offunctional M3muscarinic receptor in ventricular cardiomyocytes ofadult ratsJBr J Pharmacol，2003，138(1)：156160 12马满玲，刘艳，王玲，等胆碱对大鼠和家兔心脏M3受体作用
23、试验探讨J哈尔滨医科高校学报，2003，37(4)：302304 13Dhalla NS，ElmoselhiAB，HataT，et alStatus of myocardial antiox-idants in ischemicreperfusion injuryJCardiorasc Res，2000，47(3)：446456 14李丽，刘艳，李呼论，等M3受体激烈对心肌细胞损伤的爱护作用J哈尔滨医科高校学报，2004，38(5)：416417 15 Yang BF，Lin HX，Xu CQ，et alImprovement of control functionand promotion
24、of cardiomyocyte survival inishemic hearts：Evidencefor the role of cardiac M3 subtype muscarinic acetylcholine receptorsJCell Physiol Biochem,2005，16：163174 16 Krejci A，Tucek SQuantitation of mRNKs for M(1)to M(5)sub-types of muscarinic receptors in rat heart and brain cortexJMolPharmacol，2002，61(6)：12671272 作者简介：仲剑克(1970)，男，现为山西医科高校第一临床医学院硕士探讨生(邮编：030001)；刘学军、祁琨，工作于山西医科高校第一医院。 (本文编辑郭怀印)