常见临床标本的细菌学检验ppt课件.ppt

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1、经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用常见临床标本的细菌学检验l一、常见临床标本 1、血液 2、尿液 3、粪便、肛拭子 4、脓汁及脓拭子 5、穿刺液(胸水、腹水、心包液、关节液、脑脊液、鞘膜液)6、痰 7、胆汁 8、咽拭子 9、空气经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用二、标本采集的一般原则1、应在病程的一定阶段(一般为发病早期)尽可能在施实抗生素疗法、化学方法、血清学疗法之前采集标本。2、方法要恰当,标本应来自

2、真正的感染部位,避免其它微生物特别是正常微生物的污染。3、所有采集的标本均应置于无菌容器中(灭菌不能使用消毒剂)加入适当保存液 。4、标本应尽快接种(最好是床边接种),若必须传送时,应根据培养目的作保温、冷藏、厌氧运送。防止污染及扩散。5、检样不宜过少,否则易干燥死亡。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用三、常见标本的采集(一般由临床医师执行)(一)血液:1、一般在发热高峰期采集(发热初期1-2天,此时阳性率较高)尽量在实施血清疗法、化学疗法和抗生素疗法之前进行。2、采血部位:一般为静脉(动脉阳性率更

3、高些)。3、采血量:5-1ml,直接加入酚红葡萄糖肉汤中(血/肉汤=1:10)(防止血凝、稀释Ab等因子)如不能直接接种应置入已灭菌适量20%枸橼酸盐瓶中。尽快送检。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用 4、如病人已实施治疗,应在酚红葡萄糖肉汤中加入相应对抗剂。磺胺类药物对氨基苯甲酸5mg/100ml.青霉素2u青霉素酶/ml其他抗生素MgSO4 5mg/100ml(二)粪便:1、应尽量在用药前自然排便;取有胧血、粘液部分2-3 g(新鲜)液壮便应取絮壮物1-2ml于无菌广口瓶中。经营者提供商品或者服

4、务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用2、如无法获取粪便,应用直肠拭子,小儿入肛门2-3cm。成人入肛门4-5cm.取直肠粘液入无菌试管/保存液。3、如需保送运送测量PH7.0甘油PSB中(0.033mol/L PSB与等体积甘油混匀。PH7.0)经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用(三)、脓汁 1、创伤:先以无菌NS清洗创口周围,再以棉签来取脓汁/分泌物脓拭子置无菌试管。2、脓肿:先消毒患部表面皮肤,再以注射器抽吸/切开脓时接留

5、脓汁1-2ml置无菌试管。3、厌氧菌:一定要由伤口深处取样,半小时内接种完毕。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用(四)咽拭子:1、由咽部扁桃体处采集分泌物(注意部位、方式)2、如凝为白喉患者,则应先除去咽不表层分泌物去深层组织分泌物,再取样。3、凝为百日咳患者,可采用咳碟法。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用(五)痰:1、先让病人用清水嗉口数次,以除去口腔内大量杂菌。2、取清晨第一口咳出的痰,(晨痰)3、

6、作结核杆菌培养可收集24h痰。(冰箱保存)经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用(六)胆汁:1、行十二指肠引流水收集“胆汁乙”10-15ml。胆汁甲胆总管()胆汁乙胆素(柠黄色)胆汁丙肝胆管(金黄色)胆汁丁十二指肠()经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用(七)穿刺液:1:原则上由临床医生先穿刺获得。2:采样量:胸水,腹水:5-10ml 3:如需抗凝:3.8%枸橼酸钠。1:10经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,

7、应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用(八)尿液:1、一般用导尿.5-10ml,也可用中段尿.(应消注明),留中段尿应冲洗尿道口/外阴部(1:1000高锰酸钾,2%红汞.1:1000新洁尔灭,先消毒液冲洗,再无菌纱布或干棉球拭干)。2、作结核杆菌培养,留取24h尿,将沉淀部分送检。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用3、肾盂尿,应标明右、左,每侧分3份留联(导尿管插入输尿管。)4、通常宜取清晨第一次尿。5、采集后应立即送检,接种,一般不得超过1h

8、,冰箱保存,不过6h。经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用四、常见临床标本鉴定程序 染色镜检 变浊、色、质 BA 菌落 染色镜检l1血液酚红葡萄糖肉汤 有菌落l 无改变BAl 报告:无菌生长 无菌落l 无菌落l BAl 有菌落染色镜检l 变浊、色、质BA菌落染色镜检l2穿刺液 血肉汤 有菌落l 无改变BAl 报告:无菌生长 无菌落l 染色 经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用3,拭子(咽、脓)BA菌落分类、编

9、号、染色镜检染色镜检注:接种血平板时,拭子作原划线、接种环划开经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用4、痰BA菌落分类、编号、染色TB培养罗氏斜面(先消化处理)4%NaOH 6%H2SO4经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用5、尿液BA(直径=9.0cm,接种量0.01ml)注:将标本充分划开集菌(3000n/min 15)沉渣革兰氏染色BA 无菌落报告:无菌生长有菌落染色镜检菌落计数经营者提供商品或者服务有欺

10、诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用报告:检出*菌 *个/ml10万/ml感染6、粪便(含肛拭子)SS、MaC(强弱各1个)无可疑菌落 报告:无致病菌生长可疑菌落(透明/半、无酸色)增菌(一般不进行)经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用T.T增菌液(四硫磺酸盐肉汤)M.M增菌液(MgCL2孔雀绿肉汤)S.F增菌液(亚硫酸盐肉汤)沙门氏菌煌绿增菌液亚硒酸盐增液沙志G.N志贺氏菌碱性蛋白胨水霍乱弧菌经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当

11、按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用革兰氏染色球菌 G+杆菌:根据菌落特征,细菌染色性,形态排列选择恰当生化反应,免疫学反应及动物试验报告G-杆菌KIA菌落描述:颜色,大小,溶血性,透明度,硬度,润湿度,表面光滑度,粘稠度,凸起度,边缘整齐度经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用根据KIA结果选择适当生化反应项目+/+I M Vi C 七叶+-/+I MAN SUC C U PA_ _ _ _I项“+”非沙门氏菌 +I项“+”非志贺氏菌 +变+普经营

12、者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用-/-I 葡 C 不动杆菌 绿脓杆菌+/-一般不会出现,可考虑接种不当,空 气污染根据生化反应结果,结合相应血清学实验 报告结果经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用五、空气细菌计数l将直径9.0cm/普通琼脂平板/血琼脂平板按五点法/三点法打开盖暴露20,盖好37 24h计数菌落数,称出平均每个板菌落数N经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损

13、失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用奥梅梁斯基法则:100cm2 510L A t *10L At100*50XX个/M3=*1000=39.32N N *10 At100*550000N At(49.0;20)结果报告应注明“普通琼脂平板培养”/“血琼脂平板培养”经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用肠杆菌科各属KIA结果 斜面 底层 产气 H2S 动力埃希氏菌属 A/K A +/-(+)/-志贺氏菌属 K A -沙门氏菌属 K A +/-d/+枸橼酸盐菌属 d A +d +克雷伯

14、氏菌属 A A +-肠杆菌属 A A +-+欧文氏菌属 K/A A -/+/-+/-沙雷氏菌属 K/A A +/-/d 哈夫尼亚菌属 K/A A +-+/-爱得华氏菌属 K A +/d +/-+经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用 斜面 低层 产气 H2S 动力变形杆菌属 K A +/-+普罗菲登斯菌属 K A +/-+摩根氏菌属 K A (+)-+耶尔森氏菌属 K/d A d/-肥杆菌属 K A -致病性杆菌属 K A -+克沃尔氏菌属 A A +-+/(+)拉思氏菌属 A A (+)-西地西菌属

15、K/d A (+)/+-塔特母氏菌属 -A -注:A 产酸;K 产碱;+90-100%菌株阳性;(+)76-89%菌株阳性;d 26-75%菌株阳性;-0-10%菌株菌阳性经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用七、肠杆菌微量快速鉴定l一、机理:不同种细菌有不同酶系。首 先获得待测菌的纯培养物,制成悬液,将其示为酶 予成酶 l 酶+低物+显色剂(或其他添加剂)观察现象经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用二、装置:

16、反应板16孔内含16和底物等径真空,低温干燥,密封保存备用。12 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 H2S N PD I LD OD M U VP E ONPG SKA AR AD 1N SO序号 实验名称 英文缩写 阴性 阳性 1 H2S H2S 无色 棕色、黑色 2 硝酸盐还原 N 淡黄/白色 粉红 3 苯丙胺酸 P 白色 绿色 4 吲哚 I 白色 粉红经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用序号 实验名称 英文缩写 阴性 阳性5 赖胺酸 LD 黄色 紫兰色6 乌胺

17、酸 OD 黄色 桔色 7 丙二酸盐 M 黄缘色 湖兰色8 尿素 U 黄色 粉红9 VP VP 白色 粉红10 七叶苷 E 白色 棕黑色 11 ONPG ONPG 白色 黄色12 蔗糖 S 紫色 黄色13 阿拉伯糖 A 紫色 黄色14 侧金盏花醇 AD 紫色 黄色15 肌醇 1N 紫色 黄色1 6 山梨醇 SO 紫色 黄色 经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用1 2 3 4 5 6 7 8H2S N PD I LD OD M U 4 2 1 4 2 1 4 2-+-+-+0 5 29 10 11 12 13 14 15 16VP E ONPG SAK AR AD 1N SO1 4 2 1 4 2 1 4-+-1 0 0经营者提供商品或者服务有欺诈行为的,应当按照消费者的要求增加赔偿其受到的损失,增加赔偿的金额为消费者购买商品的价款或接受服务的费用细菌编码052100 查编码鉴定手册得摩根氏变形杆菌操作步骤:取3-4个同细菌菌落用 4mlNS制成悬液,每孔加0.2ml,加盖。35 4h 观察结果(某些项目要加入相应试剂)。

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