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1、第二十六章第二十六章临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验2标本采集标本采集培养方法培养方法检验程序检验程序检查单据检查单据第一节第一节 临床标本采集及检验程序临床标本采集及检验程序3( (一一) ) 检查单据检查单据随时登记随时登记姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；及时检查及时检查标本类型、来源、送检目的。标本类型、来源、送检目的。4（二）标本采集二）标本采集无菌操作无菌操作血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；
2、盛放容器盛放容器原则上应置于无菌容器内；原则上应置于无菌容器内；容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。5（二）标本采集（二）标本采集采集时间和部位采集时间和部位抗菌药物使用之间，选择合适部位；抗菌药物使用之间，选择合适部位；送检时间和方法送检时间和方法采集后应当立即送检采集后应当立即送检可将标本放入转运培养基中，部分标本可放可将标本放入转运培养基中，部分标本可放44保存；保存；脑膜炎和淋病奈瑟军需脑膜炎和淋病奈瑟军需35373537保温送检。保温送检。6（二）标本采集（二）标本采集安全防护安全防护防止污染、传播和自身感染；防止污染、传播和自身感染；及时检验
3、和报告及时检验和报告收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。7（三）培养方法（三）培养方法培养基培养基增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等培养方法培养方法需氧培养需氧培养厌氧培养厌氧培养二氧化碳培养二氧化碳培养8（三）培养方法（三）培养方法区分污染菌和病原菌区分污染菌和病原菌观察菌落是否在划线上观察菌落是否在划线上加做
4、无菌对照加做无菌对照结合培养细菌的生长特点对照判断结合培养细菌的生长特点对照判断注意培养时间注意培养时间涂片染色检查涂片染色检查（四）检验程序（四）检验程序9标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告10血液标本血液标本尿液标本尿液标本粪
5、便标本粪便标本痰液标本痰液标本脑脊液标本脑脊液标本生殖道标本生殖道标本穿刺液、引流液标本穿刺液、引流液标本脓液及分泌物标本脓液及分泌物标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验11血液的采集血液的采集采血指征采血指征发热（发热（38 ）或低温（）或低温（ 36 ）；）；寒战、白细胞增多（寒战、白细胞增多（10 109/L ）、核左移；）、核左移；粒细胞减少、血小板减少、粒细胞减少、血小板减少、CRP升高；升高；皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。12血液的采集血液的采集皮肤消毒皮肤消毒70%70%乙醇乙醇 30s30s；10%10%聚维酮
6、碘或聚维酮碘或1%2% 1%2% 碘酊，由内向外大于碘酊，由内向外大于3cm3cm；穿刺后用穿刺后用70%70%乙醇脱碘；乙醇脱碘；对碘过敏患者，对碘过敏患者，70%70%乙醇脱碘乙醇脱碘60s60s干燥后采血。干燥后采血。13血液的采集血液的采集采血部位（采血部位（肘静脉）肘静脉）疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml1ml14血液的采集血液的采集静脉穿刺静脉穿刺可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；取血后
7、勿换针头，直接注入血培养瓶；轻轻颠倒混匀以防凝血；轻轻颠倒混匀以防凝血；采血量采血量成人成人1020ml/1020ml/瓶；儿童瓶；儿童15ml/15ml/瓶。瓶。15血液的采集血液的采集采血时间和次数采血时间和次数使用抗菌药物之前即刻采血；使用抗菌药物之前即刻采血；24h24h内采集内采集2323次，多次采血宜更换部位；次，多次采血宜更换部位；入院前入院前2 2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；间歇性寒战或发热：发病前间歇性寒战或发热：发病前0.51h0.51h采血；采血；16血液的采集血液的采集特殊患者采血方式特殊患者采血方式间歇性寒战或发热间歇性寒战或发热发
8、病前发病前0.51h采血；采血；急性发热可疑菌血症急性发热可疑菌血症10min内采集内采集2份；份；接种于需氧和厌氧瓶；接种于需氧和厌氧瓶；非急性感染可疑菌血症非急性感染可疑菌血症24h内采集内采集2或或3份；份；采血间隔不应小于采血间隔不应小于3h；急性细菌性心内膜炎急性细菌性心内膜炎在在12h内采集内采集3份；份；若若24h后阴性，再采集后阴性，再采集3份以上。份以上。17血液的采集血液的采集特殊患者采血方式特殊患者采血方式亚急性细菌性心内膜炎亚急性细菌性心内膜炎24h24h内采集内采集3 3份血；份血；每次采血间隔大于每次采血间隔大于1h1h；若若24h24h后阴性；后阴性；再采集再采集
9、2 2份以上血；份以上血；不明原因发热不明原因发热24h24h内采集内采集2323份血标本；份血标本；每次间隔大于每次间隔大于1h1h；若若2436h2436h培养阴性；培养阴性；再采集再采集2 2份以上血标本。份以上血标本。 18血液的运送血液的运送采集后立即送检采集后立即送检可短时间室温保存可短时间室温保存切勿冷藏切勿冷藏（四）检验程序（四）检验程序19标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养)
10、 )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告血液标本常见的病原菌血液标本常见的病原菌G+G-球菌球菌金葡、表葡金葡、表葡球菌球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌A A、B B、草、肺链、草、肺链卡他布拉汉菌卡他布拉汉菌肠球菌肠球菌杆菌杆菌伤寒、副伤寒沙门菌伤寒、副伤寒沙门菌厌氧链球菌厌氧链球菌变形杆菌变形杆菌杆菌杆菌产单核李斯特菌产单核李斯特菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌大肠埃希菌大肠埃希菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌不
11、动杆菌不动杆菌20血液检验的临床意义血液检验的临床意义疖、痈、和脓肿继发的败血症疖、痈、和脓肿继发的败血症 金葡、溶血性链球菌金葡、溶血性链球菌尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症 大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌急性细菌性心内膜炎急性细菌性心内膜炎金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌21亚急性细菌性心内膜炎亚急性细菌性心内膜炎草链、肠球菌草链、肠球菌化脓性心包炎化脓性心包炎金葡、溶血性链球菌、肺链金葡、溶血性链球菌、肺链血液检验的临床意义血液检验的临床意义22肝硬化败血症肝硬化败血症金葡、铜绿金葡、铜绿烧
12、伤后败血症烧伤后败血症 金葡、铜绿金葡、铜绿23血液标本血液标本尿液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验24尿液的采集尿液的采集采集指征采集指征尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛肉眼脓尿或血尿肉眼脓尿或血尿不明原因发热，无局部感染不明原因发热，无局部感染留置导尿管的患者出现发热留置导尿管的患者出现发热膀胱排空功能受损，有尿潴留膀胱排空功能受损，有尿潴留25尿液的采集尿液的采集采集原则采集原则用药前采集用药前采集尿液在膀胱至少停留尿液在膀胱至少停留4h4h26尿液的采集尿液的采集采集容
13、器采集容器不与尿液发生反应的惰性材料不与尿液发生反应的惰性材料广口、容积广口、容积50ml50ml洁净、无菌、加盖、封闭洁净、无菌、加盖、封闭盖子容易开启盖子容易开启不含防腐剂和抑菌剂不含防腐剂和抑菌剂27尿液的采集尿液的采集采集方法采集方法清洁中段尿清洁中段尿最常用的尿培养标本收集方法最常用的尿培养标本收集方法耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺评估膀胱内细菌感染的评估膀胱内细菌感染的“金标准金标准”28尿液的采集尿液的采集采集方法采集方法直接导尿、小儿收集包、留置导尿管直接导尿、小儿收集包、留置导尿管29尿液的运送尿液的运送采集后立即送检采集后立即送检室温保存不超过室温保存不超过2h2h4 4 保
14、存不超过保存不超过8h8h淋病奈瑟菌培养不能冷藏淋病奈瑟菌培养不能冷藏（四）检验程序（四）检验程序30标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告31尿液的检验尿液的检验菌落计数菌落计数定量接种尿液培养标本定量接种尿液培养标本根据细菌在平板
15、上的生长情况根据细菌在平板上的生长情况定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/mlCFU/ml）尿液标本常见的病原菌尿液标本常见的病原菌G+G-病原菌病原菌金葡金葡病原菌病原菌淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌化脓性链球菌化脓性链球菌大肠埃希菌大肠埃希菌肠球菌肠球菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌变形杆菌变形杆菌正常正常葡萄球菌葡萄球菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌菌群菌群枯草杆菌枯草杆菌沙雷菌沙雷菌非致病性棒状杆菌非致病性棒状杆菌不动杆菌不动杆菌四联球菌四联球菌正常正常大肠埃希菌大肠埃希菌八叠球菌八叠球菌菌群菌群32尿液检验的临床意义（清洁中段尿）尿液检验
16、的临床意义（清洁中段尿）菌落数菌落数 (CFU/ml)结果评价结果评价10 5 纯培养有意义，需报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果纯培养有意义，需报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果混合菌生长，但其中某种菌落数混合菌生长，但其中某种菌落数10 5 也有意义也有意义，需报告菌落计数和细需报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果菌鉴定、药敏试验结果4 4种及以上细菌生长无意义，报告标本污染种及以上细菌生长无意义，报告标本污染3334血液标本血液标本尿液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验35粪便的采集粪便的采集采集指征采集指征体温
17、体温38.538.5 ，重症腹泻，血便、脓便；重症腹泻，血便、脓便；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；来自疫区的患者。来自疫区的患者。36粪便的采集粪便的采集采集容器（与尿液类似）采集容器（与尿液类似）不与尿液发生反应的惰性材料；不与尿液发生反应的惰性材料；广口、不宜使用纸盒；广口、不宜使用纸盒；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；不含防腐剂和抑菌剂。不含防腐剂和抑菌剂。37 粪便的采集粪便的采集采集方法采集方法自然排便法自然排便法采集脓血、粘液部分采集脓血、粘液部分13g13g，液体取絮状物，液体取絮状物13ml13ml；置无
18、菌容器内送检；置无菌容器内送检；直肠拭子法直肠拭子法适于排便困难或婴幼儿患者；适于排便困难或婴幼儿患者；湿润的棉拭子插入肛门，成人湿润的棉拭子插入肛门，成人45cm45cm，儿童，儿童23cm23cm。38粪便的运送粪便的运送立即送检，室温保存不超过立即送检，室温保存不超过2h；不能及时送检的标本可保存于不能及时送检的标本可保存于46 ；培养艰难梭菌的标本应保存于培养艰难梭菌的标本应保存于-20以下；以下；pH7.0磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过24h。39粪便的保存粪便的保存改良改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌的标本；培基不能运送培养志贺菌的标
19、本；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加CaCl2。（四）检验程序（四）检验程序40标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告粪便
20、标本常见的病原菌粪便标本常见的病原菌G+G-球菌球菌金葡金葡杆菌杆菌沙门菌沙门菌厌氧链球菌厌氧链球菌大肠埃希菌大肠埃希菌肠球菌肠球菌志贺菌志贺菌杆菌杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌霍乱弧菌霍乱弧菌 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌副溶血弧菌副溶血弧菌 难辨梭菌难辨梭菌弯曲菌弯曲菌小肠结肠炎耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌 变形杆菌变形杆菌41粪便检验的临床意义粪便检验的临床意义肠道致病菌肠道致病菌霍乱弧菌霍乱弧菌-霍乱，志贺菌霍乱，志贺菌-细菌性痢疾，伤寒沙门菌细菌性痢疾，伤寒沙门菌-伤寒；伤寒；食物中毒食物中毒沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。4243血液标本血液标本
21、尿液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验44痰液的采集痰液的采集采集指征采集指征下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；X X线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液严重可致感染性休克和呼衰。严重可致感染性休克和呼衰。45痰液的采集和运送痰液的采集和运送采集方法采集方法自然咳痰法自然咳痰法支气管镜采集法支气管镜采集法防污染毛刷采集防污染毛刷采集 法法支气管肺泡灌洗法支气管肺泡灌洗法胃
22、内采痰法胃内采痰法小儿取痰法小儿取痰法46痰液的采集和运送痰液的采集和运送标本运送标本运送 立即送检；立即送检；室温保存不超过室温保存不超过2h2h；作结核分枝杆菌培养的痰液可置入作结核分枝杆菌培养的痰液可置入4 4 冰箱保存。冰箱保存。（四）检验程序（四）检验程序47标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增
23、菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告痰液标本常见的病原菌痰液标本常见的病原菌G+G-球菌球菌金葡金葡球菌球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌肺链、化脓链肺链、化脓链杆菌杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌厌氧链球菌厌氧链球菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌杆菌杆菌白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌产气肠杆菌产气肠杆菌炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌嗜肺军团菌嗜肺军团菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌鼠疫耶尔森菌鼠疫耶尔森菌48痰液检验的临床意义痰液检验的临床意义急性细菌性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿急性细菌
24、性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿金葡、化脓性链球菌和铜绿金葡、化脓性链球菌和铜绿慢性副鼻窦炎慢性副鼻窦炎需氧菌和厌氧菌混合感染需氧菌和厌氧菌混合感染急性副鼻窦炎急性副鼻窦炎肺炎链球菌肺炎链球菌49急性咽炎急性咽炎链球菌链球菌痰液检验的临床意义痰液检验的临床意义几乎每一份标本都是有菌的；几乎每一份标本都是有菌的；分离出来的细菌却不一定是病原菌；分离出来的细菌却不一定是病原菌；有时病原菌受到抑制而检测不出来；有时病原菌受到抑制而检测不出来；应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。5051小结（小结（临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检
25、验） 临床标本采集及检验程序临床标本采集及检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验血、尿、便、痰血、尿、便、痰52标本采集标本采集培养方法培养方法检验程序检验程序检查单据检查单据第一节第一节 临床标本采集及检验程序临床标本采集及检验程序53( (一一) ) 检查单据检查单据随时登记随时登记姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；姓名、性别、年龄、临床诊断以及是否已用抗生素；及时检查及时检查标本类型、来源、送检目的。标本类型、来源、送检目的。54（二）标本采集二）标本采集无菌操作无菌操作血液、脑脊
26、液、穿刺液等注意严格无菌；血液、脑脊液、穿刺液等注意严格无菌；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；粪便、肛拭子、咽拭子等注意避免杂菌污染；盛放容器盛放容器原则上应置于无菌容器内；原则上应置于无菌容器内；容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。容器灭菌应采用干热、湿热或紫外线照射。55（二）标本采集（二）标本采集采集时间和部位采集时间和部位抗菌药物使用之间，选择合适部位；抗菌药物使用之间，选择合适部位；送检时间和方法送检时间和方法采集后应当立即送检采集后应当立即送检可将标本放入转运培养基中，部分标本可放可将标本放入转运培养基中，部分标本可放44保存；保存；脑膜炎和淋病奈瑟军需脑膜炎和淋病奈瑟军
27、需35373537保温送检。保温送检。56（二）标本采集（二）标本采集安全防护安全防护防止污染、传播和自身感染；防止污染、传播和自身感染；及时检验和报告及时检验和报告收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；收到标本后，及时登记、检验并报告有关结果；国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。国家规定的传染病检验结果，及时汇报并送上级部门。57（三）培养方法（三）培养方法培养基培养基增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧增菌肉汤、血平板、麦康凯平板、伊红美蓝平板、巧克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等克力平板、新耶尔森菌培养基、沙保培养基等等培养方法培养方法需氧培养需氧培养厌
28、氧培养厌氧培养二氧化碳培养二氧化碳培养58（三）培养方法（三）培养方法区分污染菌和病原菌区分污染菌和病原菌观察菌落是否在划线上观察菌落是否在划线上加做无菌对照加做无菌对照结合培养细菌的生长特点对照判断结合培养细菌的生长特点对照判断注意培养时间注意培养时间涂片染色检查涂片染色检查（四）检验程序（四）检验程序59标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清
29、学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告60血液标本血液标本尿液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本脑脊液标本脑脊液标本生殖道标本生殖道标本穿刺液、引流液标本穿刺液、引流液标本脓液及分泌物标本脓液及分泌物标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验61血液的采集血液的采集采血指征采血指征发热（发热（38 ）或低温（）或低温（ 36 ）；）；寒战、白细胞增多（寒战、白细胞增多（10 109/L ）、核左移；）、核左移；粒细胞减少、血小板减少、粒细胞减少、血小板减少、CRP升高；升高；皮肤、粘膜
30、出血、昏迷、多器官衰竭。皮肤、粘膜出血、昏迷、多器官衰竭。62血液的采集血液的采集皮肤消毒皮肤消毒70%70%乙醇乙醇 30s30s；10%10%聚维酮碘或聚维酮碘或1%2% 1%2% 碘酊，由内向外大于碘酊，由内向外大于3cm3cm；穿刺后用穿刺后用70%70%乙醇脱碘；乙醇脱碘；对碘过敏患者，对碘过敏患者，70%70%乙醇脱碘乙醇脱碘60s60s干燥后采血。干燥后采血。63血液的采集血液的采集采血部位（采血部位（肘静脉）肘静脉）疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似细菌性心内膜炎：肘动脉或股动脉疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓疑似骨髓炎或伤寒：病灶或髂前（后）上棘取骨髓1ml1
31、ml64血液的采集血液的采集静脉穿刺静脉穿刺可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；可戴手套固定静脉，严禁触碰穿刺点；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；取血后勿换针头，直接注入血培养瓶；轻轻颠倒混匀以防凝血；轻轻颠倒混匀以防凝血；采血量采血量成人成人1020ml/1020ml/瓶；儿童瓶；儿童15ml/15ml/瓶。瓶。65血液的采集血液的采集采血时间和次数采血时间和次数使用抗菌药物之前即刻采血；使用抗菌药物之前即刻采血；24h24h内采集内采集2323次，多次采血宜更换部位；次，多次采血宜更换部位；入院前入院前2 2周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；周内接受抗菌药：选用中和培养瓶；间歇性寒战或发热：
32、发病前间歇性寒战或发热：发病前0.51h0.51h采血；采血；66血液的采集血液的采集特殊患者采血方式特殊患者采血方式间歇性寒战或发热间歇性寒战或发热发病前发病前0.51h采血；采血；急性发热可疑菌血症急性发热可疑菌血症10min内采集内采集2份；份；接种于需氧和厌氧瓶；接种于需氧和厌氧瓶；非急性感染可疑菌血症非急性感染可疑菌血症24h内采集内采集2或或3份；份；采血间隔不应小于采血间隔不应小于3h；急性细菌性心内膜炎急性细菌性心内膜炎在在12h内采集内采集3份；份；若若24h后阴性，再采集后阴性，再采集3份以上。份以上。67血液的采集血液的采集特殊患者采血方式特殊患者采血方式亚急性细菌性心内
33、膜炎亚急性细菌性心内膜炎24h24h内采集内采集3 3份血；份血；每次采血间隔大于每次采血间隔大于1h1h；若若24h24h后阴性；后阴性；再采集再采集2 2份以上血；份以上血；不明原因发热不明原因发热24h24h内采集内采集2323份血标本；份血标本；每次间隔大于每次间隔大于1h1h；若若2436h2436h培养阴性；培养阴性；再采集再采集2 2份以上血标本。份以上血标本。 68血液的运送血液的运送采集后立即送检采集后立即送检可短时间室温保存可短时间室温保存切勿冷藏切勿冷藏（四）检验程序（四）检验程序69标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片
34、报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告血液标本常见的病原菌血液标本常见的病原菌G+G-球菌球菌金葡、表葡金葡、表葡球菌球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌A A、B B、草、肺链、草、肺链卡他布拉汉菌卡他布拉汉菌肠球菌肠球菌杆菌杆菌伤寒、副伤寒沙门菌伤寒、副伤寒沙门菌厌氧链球菌厌氧链球菌变形杆菌变形杆菌杆菌杆菌产单核李斯特菌产单
35、核李斯特菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌大肠埃希菌大肠埃希菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌不动杆菌不动杆菌70血液检验的临床意义血液检验的临床意义疖、痈、和脓肿继发的败血症疖、痈、和脓肿继发的败血症 金葡、溶血性链球菌金葡、溶血性链球菌尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症尿路、胆道、胃肠道炎症粘膜败血症 大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌大肠埃希菌、变形杆菌、产气肠杆菌急性细菌性心内膜炎急性细菌性心内膜炎金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌金葡、溶血性链球菌、脑膜炎奈瑟菌71亚急性细菌性心内膜炎亚急性细菌性心内膜炎草链、肠球菌草链、肠球菌化脓性
36、心包炎化脓性心包炎金葡、溶血性链球菌、肺链金葡、溶血性链球菌、肺链血液检验的临床意义血液检验的临床意义72肝硬化败血症肝硬化败血症金葡、铜绿金葡、铜绿烧伤后败血症烧伤后败血症 金葡、铜绿金葡、铜绿73血液标本血液标本尿液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验74尿液的采集尿液的采集采集指征采集指征尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛尿频、尿急、尿痛、排尿困难、耻骨上压痛肉眼脓尿或血尿肉眼脓尿或血尿不明原因发热，无局部感染不明原因发热，无局部感染留置导尿管的患者出现发热留置导尿管的患者出现发热膀胱排空功能受损，有尿潴留膀胱排空
37、功能受损，有尿潴留75尿液的采集尿液的采集采集原则采集原则用药前采集用药前采集尿液在膀胱至少停留尿液在膀胱至少停留4h4h76尿液的采集尿液的采集采集容器采集容器不与尿液发生反应的惰性材料不与尿液发生反应的惰性材料广口、容积广口、容积50ml50ml洁净、无菌、加盖、封闭洁净、无菌、加盖、封闭盖子容易开启盖子容易开启不含防腐剂和抑菌剂不含防腐剂和抑菌剂77尿液的采集尿液的采集采集方法采集方法清洁中段尿清洁中段尿最常用的尿培养标本收集方法最常用的尿培养标本收集方法耻骨上膀胱穿刺耻骨上膀胱穿刺评估膀胱内细菌感染的评估膀胱内细菌感染的“金标准金标准”78尿液的采集尿液的采集采集方法采集方法直接导尿、
38、小儿收集包、留置导尿管直接导尿、小儿收集包、留置导尿管79尿液的运送尿液的运送采集后立即送检采集后立即送检室温保存不超过室温保存不超过2h2h4 4 保存不超过保存不超过8h8h淋病奈瑟菌培养不能冷藏淋病奈瑟菌培养不能冷藏（四）检验程序（四）检验程序80标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧
39、、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告81尿液的检验尿液的检验菌落计数菌落计数定量接种尿液培养标本定量接种尿液培养标本根据细菌在平板上的生长情况根据细菌在平板上的生长情况定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（定量报告每毫升尿液中所含有的细菌数（CFU/mlCFU/ml）尿液标本常见的病原菌尿液标本常见的病原菌G+G-病原菌病原菌金葡金葡病原菌病原菌淋病奈瑟菌淋病奈瑟菌化脓性链球菌化脓性链球菌大肠埃希菌大肠埃希菌肠球菌肠球菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌变形杆菌变形杆菌正常正常葡萄球菌葡萄球菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌菌群菌群枯草杆菌枯草杆菌沙雷菌沙雷菌非致病性
40、棒状杆菌非致病性棒状杆菌不动杆菌不动杆菌四联球菌四联球菌正常正常大肠埃希菌大肠埃希菌八叠球菌八叠球菌菌群菌群82尿液检验的临床意义（清洁中段尿）尿液检验的临床意义（清洁中段尿）菌落数菌落数 (CFU/ml)结果评价结果评价10 5 纯培养有意义，需报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果纯培养有意义，需报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果混合菌生长，但其中某种菌落数混合菌生长，但其中某种菌落数10 5 也有意义也有意义，需报告菌落计数和细需报告菌落计数和细菌鉴定、药敏试验结果菌鉴定、药敏试验结果4 4种及以上细菌生长无意义，报告标本污染种及以上细菌生长无意义，报告标本污染8384血液标本血液标本尿
41、液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验85粪便的采集粪便的采集采集指征采集指征体温体温38.538.5 ，重症腹泻，血便、脓便；重症腹泻，血便、脓便；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；未经抗菌药物治疗的持续性腹泻；来自疫区的患者。来自疫区的患者。86粪便的采集粪便的采集采集容器（与尿液类似）采集容器（与尿液类似）不与尿液发生反应的惰性材料；不与尿液发生反应的惰性材料；广口、不宜使用纸盒；广口、不宜使用纸盒；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；洁净、无菌、加盖、封闭，盖子容易开启；不含防腐剂和抑菌剂。不含防腐剂和抑菌剂。87 粪
42、便的采集粪便的采集采集方法采集方法自然排便法自然排便法采集脓血、粘液部分采集脓血、粘液部分13g13g，液体取絮状物，液体取絮状物13ml13ml；置无菌容器内送检；置无菌容器内送检；直肠拭子法直肠拭子法适于排便困难或婴幼儿患者；适于排便困难或婴幼儿患者；湿润的棉拭子插入肛门，成人湿润的棉拭子插入肛门，成人45cm45cm，儿童，儿童23cm23cm。88粪便的运送粪便的运送立即送检，室温保存不超过立即送检，室温保存不超过2h；不能及时送检的标本可保存于不能及时送检的标本可保存于46 ；培养艰难梭菌的标本应保存于培养艰难梭菌的标本应保存于-20以下；以下；pH7.0磷酸盐甘油或转运培养基保存不
43、超过磷酸盐甘油或转运培养基保存不超过24h。89粪便的保存粪便的保存改良改良Cary-Blair培基不能运送培养志贺菌的标本；培基不能运送培养志贺菌的标本；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；直肠活检标本容器内盛无菌蒸馏水以防沉淀；保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加保存培养弯曲菌和弧菌的标本，需加CaCl2。（四）检验程序（四）检验程序90标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片
44、检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告粪便标本常见的病原菌粪便标本常见的病原菌G+G-球菌球菌金葡金葡杆菌杆菌沙门菌沙门菌厌氧链球菌厌氧链球菌大肠埃希菌大肠埃希菌肠球菌肠球菌志贺菌志贺菌杆菌杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌霍乱弧菌霍乱弧菌 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌副溶血弧菌副溶血弧菌 难辨梭菌难辨梭菌弯曲菌弯曲菌小肠结肠炎耶尔森菌小肠结肠炎耶尔森菌 变形杆菌变形杆菌91粪便检验的临床意义粪便检验的临床意义肠道致病菌肠道致病菌霍乱弧菌霍乱弧菌-霍乱，志贺菌霍乱，志贺菌-细菌性痢疾，伤寒沙门菌
45、细菌性痢疾，伤寒沙门菌-伤寒；伤寒；食物中毒食物中毒沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。沙门菌、弯曲菌、葡萄球菌、副溶血弧菌。9293血液标本血液标本尿液标本尿液标本粪便标本粪便标本痰液标本痰液标本第二节第二节 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验94痰液的采集痰液的采集采集指征采集指征下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰下呼吸道感染者可有发热、咳嗽和咳痰可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；可伴有胸痛、气急甚至呼吸困难，肺部可闻及湿罗音；X X线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液线检查肺部有炎性浸润或胸腔积液严重可致感染性休克和呼衰。严重可致感染性休克和呼衰。95痰液的采集和
46、运送痰液的采集和运送采集方法采集方法自然咳痰法自然咳痰法支气管镜采集法支气管镜采集法防污染毛刷采集防污染毛刷采集 法法支气管肺泡灌洗法支气管肺泡灌洗法胃内采痰法胃内采痰法小儿取痰法小儿取痰法96痰液的采集和运送痰液的采集和运送标本运送标本运送 立即送检；立即送检；室温保存不超过室温保存不超过2h2h；作结核分枝杆菌培养的痰液可置入作结核分枝杆菌培养的痰液可置入4 4 冰箱保存。冰箱保存。（四）检验程序（四）检验程序97标本选择标本选择采集（保存运送）采集（保存运送）观察、前处理观察、前处理直接直接涂片涂片报告报告快速快速检验检验报告报告分离培养分离培养 （需、厌氧、（需、厌氧、COCO2 2培
47、养）培养）可疑菌落可疑菌落( (必要时先做培养必要时先做培养) )涂片检查涂片检查生化试验生化试验血清学鉴定血清学鉴定药敏试验药敏试验动物试验动物试验增菌增菌( (需氧、厌氧、需氧、厌氧、COCO2 2培养培养) )报报 告告痰液标本常见的病原菌痰液标本常见的病原菌G+G-球菌球菌金葡金葡球菌球菌脑膜炎奈瑟菌脑膜炎奈瑟菌肺链、化脓链肺链、化脓链杆菌杆菌流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌厌氧链球菌厌氧链球菌肺炎克雷伯菌肺炎克雷伯菌杆菌杆菌白喉棒状杆菌白喉棒状杆菌大肠埃希菌大肠埃希菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌产气肠杆菌产气肠杆菌炭疽芽孢杆菌炭疽芽孢杆菌铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌嗜肺军团菌
48、嗜肺军团菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌鼠疫耶尔森菌鼠疫耶尔森菌98痰液检验的临床意义痰液检验的临床意义急性细菌性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿急性细菌性鼻炎、鼻前庭炎、鼻腔脓肿、鼻中隔脓肿金葡、化脓性链球菌和铜绿金葡、化脓性链球菌和铜绿慢性副鼻窦炎慢性副鼻窦炎需氧菌和厌氧菌混合感染需氧菌和厌氧菌混合感染急性副鼻窦炎急性副鼻窦炎肺炎链球菌肺炎链球菌99急性咽炎急性咽炎链球菌链球菌痰液检验的临床意义痰液检验的临床意义几乎每一份标本都是有菌的；几乎每一份标本都是有菌的；分离出来的细菌却不一定是病原菌；分离出来的细菌却不一定是病原菌；有时病原菌受到抑制而检测不出来；有时病原菌受到抑制而检测不出来；应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。应当加强微生物学工作者与临床医师之间的沟通。100101小结（小结（临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验） 临床标本采集及检验程序临床标本采集及检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序检查单据、标本采集、培养方法、检验程序 临床常见标本的细菌学检验临床常见标本的细菌学检验血、尿、便、痰血、尿、便、痰