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1、关于种子生活力测定第一页，本课件共有12页一、实验目的一、实验目的 通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、基本操作和结果计算。基本操作和结果计算。氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮唑（TTCTTC）法）法红墨水（酸性大红）染色法红墨水（酸性大红）染色法第二页，本课件共有12页二、实验原理二、实验原理1 1、氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮唑（TTCTTC）法）法 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当应，而无生活力的种胚则无此反应。当TTCTTC溶液渗入种
2、胚的活溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或或NADPH2)还原时，还原时，可产生红色的可产生红色的三苯基三苯基甲腙甲腙（TTFTTF），胚便染成红色。当种胚生，胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。强弱。第三页，本课件共有12页2、红墨水（酸性大红）染色法红墨水（酸性大红）染色法 有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外有生活力
3、的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的界物质能力，某些染料如红墨水中的酸性大红酸性大红不能进入细胞内，不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。是否染色来判断种子的生活力。第四页，本课件共有12页第五页，本课件共有12页三、试材与设备三、试材与设备【实验材料实验材料】玉米种子玉米种子【仪器与用具】【仪器与用具】培养皿培养皿、镊子镊子
4、、单面刀片单面刀片、垫板（切种子用）垫板（切种子用）、烧杯烧杯、棕色试剂棕色试剂瓶瓶、搪瓷盘搪瓷盘、pHpH试纸。试纸。【试剂】【试剂】TTCTTC溶液的配制：溶液的配制：取取1g TTC1g TTC溶于溶于L L蒸馏水或冷开水中，配制蒸馏水或冷开水中，配制成成0.10.1的的TTCTTC溶液。药液溶液。药液p p应在应在6.56.57.57.5，以，以pHpH试纸试之（如试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。红墨水溶液的配制：红墨水溶液的配制：取市售红墨水稀释取市售红墨水稀释2020倍（倍（1 1份红墨水加份红墨水加1919份
5、份自来水）作为染色剂。自来水）作为染色剂。第六页，本课件共有12页四、实验步骤四、实验步骤 1.1.将玉米种子用温水（将玉米种子用温水（3030）浸泡）浸泡2 26h6h，使种子充分吸，使种子充分吸胀。胀。（待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3 35min5min，作为死种子，作为死种子）2.2.随机取种子随机取种子5050粒，沿种胚中央准确切开粒，沿种胚中央准确切开，并取几粒死，并取几粒死种子作为对照。种子作为对照。3.3.将将每粒种子的一半每粒种子的一半用用TTCTTC法染色，溶液法染色，溶液以浸没种子为以浸没种子为度。度。第七页，本课件共有1
6、2页4.TTC4.TTC染色的种子染色的种子放入放入30303535的恒温箱内保温的恒温箱内保温30min.30min.也可在也可在2020左右的室温下放置左右的室温下放置404060min60min；红墨水法室温；红墨水法室温染色染色101020min20min5.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗保温后，倾出药液，用自来水冲洗2 23 3次，立即观察种胚着色次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表1 1内。内。第八页，本课件共有12页表表1 1 染色法测定种子生活力记载表染色法测定种子生活力记载表种子活力（）有活力的种子数种子
7、活力（）有活力的种子数/种子总数种子总数100%100%第九页，本课件共有12页【注意事项】【注意事项】1.TTC1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。2.2.染色温度一般以染色温度一般以25253535为宜。为宜。3.3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。4.TTC4.TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放TTCTTC本身会本身会变色。变色。5.5.不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入下下表。表。第十页，本课件共有12页第十一页，本课件共有12页感感谢谢大大家家观观看看第十二页，本课件共有12页