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1、关于种子生活力测定现在学习的是第1页，共12页一、实验目的一、实验目的 通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、基本操作和结果计算。基本操作和结果计算。氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮唑（TTCTTC）法）法红墨水（酸性大红）染色法红墨水（酸性大红）染色法现在学习的是第2页，共12页二、实验原理二、实验原理1 1、氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮唑（TTCTTC）法）法 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当生活力的种胚则无此反应。当TTCTTC溶
2、液渗入种胚的活细胞内，并作为氢溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶受体被脱氢辅酶(NADH2或或NADPH2)还原时，可产生红色的还原时，可产生红色的三苯三苯基基甲腙甲腙（TTFTTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明，胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。染色的程度推知种子的生活力强弱。现在学习的是第3页，共12页2、红墨水（酸性大红）染色法红墨水（酸性大红）染色法 有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸
3、收外有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的界物质能力，某些染料如红墨水中的酸性大红酸性大红不能进入细胞内，不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。来判断种子的生活力。现在学习的是第4页，共12页现在学习的是第5页，共12页三、试材与设备三、试材与设备【实验材料实验材料】玉米种子玉米种子【仪器与用具】【仪器与用具】培
4、养皿培养皿、镊子镊子、单面刀片单面刀片、垫板（切种子用）垫板（切种子用）、烧杯烧杯、棕色试剂瓶棕色试剂瓶、搪瓷盘搪瓷盘、pHpH试纸。试纸。【试剂】【试剂】TTCTTC溶液的配制：溶液的配制：取取1g TTC1g TTC溶于溶于L L蒸馏水或冷开水中，配制成蒸馏水或冷开水中，配制成0.10.1的的TTCTTC溶液。药液溶液。药液p p应在应在6.56.57.57.5，以，以pHpH试纸试之（如不易试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。红墨水溶液的配制：红墨水溶液的配制：取市售红墨水稀释取市售红墨水稀释2020倍（倍（1 1份红墨水加
5、份红墨水加1919份自份自来水）作为染色剂。来水）作为染色剂。现在学习的是第6页，共12页四、实验步骤四、实验步骤 1.1.将玉米种子用温水（将玉米种子用温水（3030）浸泡）浸泡2 26h6h，使种子充分吸，使种子充分吸胀。胀。（待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3 35min5min，作为死种子作为死种子）2.2.随机取种子随机取种子5050粒，沿种胚中央准确切开粒，沿种胚中央准确切开，并取几粒死种子，并取几粒死种子作为对照。作为对照。3.3.将将每粒种子的一半每粒种子的一半用用TTCTTC法染色，溶液法染色，溶液以浸没种子为度。以浸没种子为度
6、。现在学习的是第7页，共12页4.TTC4.TTC染色的种子染色的种子放入放入30303535的恒温箱内保温的恒温箱内保温30min.30min.也可在也可在2020左左右的室温下放置右的室温下放置404060min60min；红墨水法室温；红墨水法室温染色染色101020min20min5.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗保温后，倾出药液，用自来水冲洗2 23 3次，立即观察种胚着色次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表1 1内。内。现在学习的是第8页，共12页表表1 1 染色法测定种子生活力记载表染色法测定种子生活力记载表
7、种子活力（）有活力的种子数种子活力（）有活力的种子数/种子总数种子总数100%100%现在学习的是第9页，共12页【注意事项】【注意事项】1.TTC1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。2.2.染色温度一般以染色温度一般以25253535为宜。为宜。3.3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。4.TTC4.TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放TTCTTC本身会本身会变色。变色。5.5.不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入下下表。表。现在学习的是第10页，共12页现在学习的是第11页，共12页感感谢谢大大家家观观看看现在学习的是第12页，共12页