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1、关于种子生活力测定第1页，讲稿共12张，创作于星期二一、实验目的一、实验目的 通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、通过实验，掌握主要作物种子生活力测定方法、基本操作和结果计算。基本操作和结果计算。氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮唑（TTCTTC）法）法红墨水（酸性大红）染色法红墨水（酸性大红）染色法第2页，讲稿共12张，创作于星期二二、实验原理二、实验原理1 1、氯化三苯基四氮唑（氯化三苯基四氮唑（TTCTTC）法）法 凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，凡有生活力的种子胚部在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当而无生活力的种胚则无此反应。当T
2、TCTTC溶液渗入种胚的活细胞内，溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或或NADPH2)还原时，可产生红色还原时，可产生红色的的三苯基三苯基甲腙甲腙（TTFTTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸，胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化不明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。由染色的程度推知种子的生活力强弱。第3页，讲稿共12张，创作于星期二2、红墨水（酸性大红）染色法红墨水（酸性大红）染色法 有生活力的种子其胚细胞的原生质具
3、有半透性，有选择吸收有生活力的种子其胚细胞的原生质具有半透性，有选择吸收外界物质能力，某些染料如红墨水中的外界物质能力，某些染料如红墨水中的酸性大红酸性大红不能进入细不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种了选择吸收的能力，染料进入细胞内使胚部染色，所以可根据种子胚部是否染色来判断种子的生活力。子胚部是否染色来判断种子的生活力。第4页，讲稿共12张，创作于星期二第5页，讲稿共12张，创作于星期二三、试材与设备三、试材与设备【实验材料实验材料】玉米种子玉米种子
4、【仪器与用具】【仪器与用具】培养皿培养皿、镊子镊子、单面刀片单面刀片、垫板（切种子用）垫板（切种子用）、烧杯烧杯、棕色试剂瓶棕色试剂瓶、搪瓷盘搪瓷盘、pHpH试纸。试纸。【试剂】【试剂】TTCTTC溶液的配制：溶液的配制：取取1g TTC1g TTC溶于溶于L L蒸馏水或冷开水中，配制成蒸馏水或冷开水中，配制成0.10.1的的TTCTTC溶液。药液溶液。药液p p应在应在6.56.57.57.5，以，以pHpH试纸试之（如不易溶试纸试之（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水）。红墨水溶液的配制：红墨水溶液的配制：取市售红墨水稀释取市售红墨水稀释2
5、020倍（倍（1 1份红墨水加份红墨水加1919份自份自来水）作为染色剂。来水）作为染色剂。第6页，讲稿共12张，创作于星期二四、实验步骤四、实验步骤 1.1.将玉米种子用温水（将玉米种子用温水（3030）浸泡）浸泡2 26h6h，使种子充分吸，使种子充分吸胀。胀。（待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸待充分吸胀后取出一部分种子，在沸水中煮沸3 35min5min，作为死种子作为死种子）2.2.随机取种子随机取种子5050粒，沿种胚中央准确切开粒，沿种胚中央准确切开，并取几粒死种，并取几粒死种子作为对照。子作为对照。3.3.将将每粒种子的一半每粒种子的一半用用TTCTTC法染色，溶液法染色
6、，溶液以浸没种子为度。以浸没种子为度。第7页，讲稿共12张，创作于星期二4.TTC4.TTC染色的种子染色的种子放入放入30303535的恒温箱内保温的恒温箱内保温30min.30min.也可在也可在2020左右的室温下放置左右的室温下放置404060min60min；红墨水法室温；红墨水法室温染色染色101020min20min5.5.保温后，倾出药液，用自来水冲洗保温后，倾出药液，用自来水冲洗2 23 3次，立即观察种胚着色次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表1 1内。内。第8页，讲稿共12张，创作于星期二表表1 1 染色
7、法测定种子生活力记载表染色法测定种子生活力记载表种子活力（）有活力的种子数种子活力（）有活力的种子数/种子总数种子总数100%100%第9页，讲稿共12张，创作于星期二【注意事项】【注意事项】1.TTC1.TTC溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴溶液最好现配现用，如需贮藏则应贮于棕色瓶中，放在阴凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。凉黑暗处，如溶液变红则不可再用。2.2.染色温度一般以染色温度一般以25253535为宜。为宜。3.3.判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；判断有生活力的种子应具备：胚发育良好、完整、整个胚染成鲜红色；子叶有小部分坏死，其部位不是
8、胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部子叶有小部分坏死，其部位不是胚中轴和子叶连接处；胚根尖虽有小部分坏死，但其它部位完好。分坏死，但其它部位完好。4.TTC4.TTC反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放反应结束，从黑暗下取出后立即观察，因光下久放TTCTTC本本身会变色。身会变色。5.5.不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入间不同。现将主要作物种子生活力测定所需条件列入下下表。表。第10页，讲稿共12张，创作于星期二第11页，讲稿共12张，创作于星期二感感谢谢大大家家观观看看第12页，讲稿共12张，创作于星期二