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1、菊花的组织培养本讲稿第一页，共十五页肌肉细胞肌肉细胞一、植物组织培养的基本过程一、植物组织培养的基本过程1 1、细胞分化、细胞分化实质：基因选择性表达实质：基因选择性表达神经细胞神经细胞红细胞红细胞本讲稿第二页，共十五页具有该生物的具有该生物的全部遗传信息全部遗传信息的任何一个已的任何一个已经经分化分化的细胞，都具有发育完整个体的的细胞，都具有发育完整个体的潜能潜能。2 2、细胞的全能性、细胞的全能性1 1）概念：）概念：【思考思考】以下举例哪个能体现全能性？以下举例哪个能体现全能性？A A、玉米种子长成植株；、玉米种子长成植株；B B、癌细胞体外繁殖数代；、癌细胞体外繁殖数代；C C、DNA
2、DNA扩增扩增10001000次；次；D D、棉花叶肉细胞培养成抗虫棉植株、棉花叶肉细胞培养成抗虫棉植株2 2）条件）条件D本讲稿第三页，共十五页3 3、植物组织培养的基本过程、植物组织培养的基本过程愈伤组织愈伤组织生根生根生芽生芽本讲稿第四页，共十五页1 1、材料的选择、材料的选择菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。二、影响植物组织培养的因素二、影响植物组织培养的因素2 2、MSMS培养基培养基本讲稿第五页，共十五页1 1、材料的选择、材料的选择菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
3、菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。二、影响植物组织培养的因素二、影响植物组织培养的因素2 2、MSMS培养基培养基MS培养基培养基大量元素、微量元素大量元素、微量元素无机盐无机盐蔗糖蔗糖碳源、渗透压碳源、渗透压甘氨酸、维生素等甘氨酸、维生素等特殊营养物质特殊营养物质植物激素植物激素生长素、细胞分裂素生长素、细胞分裂素本讲稿第六页，共十五页编编号号生长素生长素(mol/L)根根的的平均数目平均数目1蒸馏水蒸馏水20.2210-1227.8310-1132.5410-1033.7510-928.5610-828.1710-723.7810-
4、620.8910-519.61010-411.11110-34.21210-201）激素浓度）激素浓度适宜适宜本讲稿第七页，共十五页2）激素使用先后顺序）激素使用先后顺序使用顺序使用顺序 实验结果实验结果 先生长素，先生长素，后细胞分裂素后细胞分裂素 有利于细胞分裂但不分化有利于细胞分裂但不分化 先细胞分裂素，先细胞分裂素，后生长素后生长素 细胞既分裂也分化细胞既分裂也分化 同时使用同时使用 分化频率提高分化频率提高 本讲稿第八页，共十五页3）激素用量比例）激素用量比例生长素生长素细胞分裂素细胞分裂素生长素生长素/细胞分裂素比值细胞分裂素比值1：促进生根：促进生根生长素生长素/细胞分裂素比值细
5、胞分裂素比值1：促进生芽：促进生芽生长素生长素/细胞分裂素比值细胞分裂素比值=1：促进愈伤组织的生长：促进愈伤组织的生长本讲稿第九页，共十五页1 1、材料的选择、材料的选择菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。菊花：一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。二、影响植物组织培养的因素二、影响植物组织培养的因素2 2、MSMS培养基培养基MS培养基培养基大量元素、微量元素大量元素、微量元素无机盐无机盐蔗糖蔗糖碳源、渗透压碳源、渗透压甘氨酸等甘氨酸等特殊营养物质特殊营养物质植物激素植物激素生长素、细胞
6、分裂素生长素、细胞分裂素3 3、环境条件（、环境条件（pHpH、温度、光照）、温度、光照）本讲稿第十页，共十五页三、实验操作三、实验操作本讲稿第十一页，共十五页1 1、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形、在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需要的（要的（）A.A.消毒灭菌消毒灭菌B.B.适宜的温度适宜的温度C.C.充足的光照充足的光照D.D.适宜的养料和激素适宜的养料和激素 习题巩固习题巩固C本讲稿第十二页，共十五页2 2下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（）下列关于植物组织培养的叙述中，正确的是（）A A为了
7、提供营养和调节渗透压，培养基中应添加葡为了提供营养和调节渗透压，培养基中应添加葡萄糖萄糖B B培养液中的生长素和细胞分裂素会影响愈伤组织培养液中的生长素和细胞分裂素会影响愈伤组织的生长和分化的生长和分化C C器官、组织的细胞在不离体的情况下必须通过脱分器官、组织的细胞在不离体的情况下必须通过脱分化才能形成愈伤组织化才能形成愈伤组织D D同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织的基因是相同的的愈伤组织的基因是相同的B本讲稿第十三页，共十五页3 3在菊花的组织培养操作完成了在菊花的组织培养操作完成了3 34 4天后，观察天后，观察同一温室中的外
8、植体，发现有的瓶内外植体正同一温室中的外植体，发现有的瓶内外植体正常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体常生长，有的瓶内外植体死亡，你认为外植体死亡的原因不可能是（）死亡的原因不可能是（）A A接种时培养基灭菌不彻底接种时培养基灭菌不彻底 B B接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体接种工具灼烧后未待冷却就接种外植体C C愈伤组织形成初期没有给予充足的光照愈伤组织形成初期没有给予充足的光照D D培养过程中保持温度、培养过程中保持温度、pHpH的适宜，但没有及时的适宜，但没有及时调整各种营养物质、激素的比例调整各种营养物质、激素的比例C本讲稿第十四页，共十五页4微型繁殖的基本过程如下：微型繁殖的基
9、本过程如下：外植株外植株愈伤组织愈伤组织芽、根芽、根植株植株（1）在过程）在过程中，常用的中，常用的MS培养基主要成分包括大量元培养基主要成分包括大量元素、微量元素和素、微量元素和，在配制好的培养基中，常常，在配制好的培养基中，常常需要添加需要添加，有利于外植体启动细胞分裂形成，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织。（2）在过程）在过程中，愈伤组织在诱导生根的培养基中中，愈伤组织在诱导生根的培养基中未形成根，但分化出了芽，其原因可能是未形成根，但分化出了芽，其原因可能是 。有机物有机物植物激素植物激素生长素生长素/细胞分裂素类物质的比值细胞分裂素类物质的比值1 本讲稿第十五页，共十五页