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1、菊花的组织培养本讲稿第一页，共十四页阅读课题背景阅读课题背景,总结总结:什么是植物组织培养什么是植物组织培养?思考：一、基础知识1 1、细胞分化、细胞分化（1）概念：）概念：在生物个体发育过程中，细胞在形态、结构、功能上产生稳定性差异的过程。（2）特点：）特点：持久性：发生在整个生活活动过程中，胚胎期分化程度达到最大。不可逆性：稳定性：分化过程，遗传物质是不变的，稳定的。（3）原因：）原因：基因选择性表达的结果（4）结果：）结果：产生不同的组织和器官本讲稿第二页，共十四页2 2、植物细胞的全能性、植物细胞的全能性（1）概念：）概念：高度分化的植物细胞，仍具有发育成完整植株的潜能。（2）特点：）
2、特点：受精卵生殖细胞体细胞体细胞中：分生区细胞成熟区细胞高度分化的动物体细胞全能性受到限制，但体细胞核仍具有全能性。（3）原因：）原因：体细胞都是通过有丝分裂由同一个受精卵增殖形成的，遗传物质（染色体）相同，携带有本物种的全部遗传信息。（）表达的条件：（）表达的条件：离体、在一定的营养物质、激素和其它外界条件(适宜的温度、PH值、光照等)才能表达。本讲稿第三页，共十四页3 3、植物组织培养、植物组织培养（1）概念：）概念：是指离体的植物器官、组织或细胞，在无菌条件下，通过脱分化和再分化形成完成植株的过程。（2）过程：）过程：人工种子人工种子植株植株外植体外植体愈伤组织愈伤组织胚状体胚状体脱分化
3、脱分化再分化再分化加上人工种皮加上人工种皮外植体：外植体：离体的植物器官、组织或细胞脱分化：脱分化：由高度分化的植物组织或细胞，恢复分裂增生能力，产生愈伤组织的过程愈伤组织：愈伤组织：外植体在培养过程中，通过细胞分裂所产生的、排列疏松不规则、高度液泡化的薄壁细胞群再分化：再分化：愈伤组织通过细胞分裂、分化（表达全能性）形成根、芽等器官的过程胚状体：胚状体：有类似胚根、胚芽结构的新植物幼体本讲稿第四页，共十四页4 4、影响植物组织培养的因素、影响植物组织培养的因素（1）材料：）材料：幼嫩的植物组织器官（全能性高，有毒物质少）（2）营养：）营养：无机营养：大量元素：N、P、S、K、Ca、Mg 微量
4、元素：有机营养：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等（3）植物激素：）植物激素：是启动细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。参见练习册P36页（4）外界条件：）外界条件：温度、PH值、光照等 菊花组织培养的要求：温度1822，PH=5.8，光照每日12h本讲稿第五页，共十四页二、实验设计1、实验流程、实验流程制备制备MSMS固体培养基固体培养基外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养移栽移栽2、实验步骤、实验步骤（1 1）制备）制备MSMS固体培养基固体培养基 MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，是植物组织培养过程中最常用的一种固体培养基。实验室一般使用4保存的
5、配制好的母液来配制培养基。配制母液：配制母液：将各种成分按比例配制成浓缩液，使用时根据浓缩比例计算用量，加水稀释。配制培养基：配制培养基：计算、称量、熔化、调PH值、分装、灭菌本讲稿第六页，共十四页（）外植体消毒（茎段）（）外植体消毒（茎段）流水冲洗流水冲洗加洗衣粉，软刷刷洗加洗衣粉，软刷刷洗流水冲洗流水冲洗20min无菌吸水纸吸干无菌吸水纸吸干无菌吸水纸吸干无菌吸水纸吸干70%酒精摇动酒精摇动6-7s无菌水清洗无菌水清洗无菌吸水纸吸干无菌吸水纸吸干0.1%HgCl浸泡浸泡1-2min无菌水清洗至少无菌水清洗至少3次次漂净消毒液漂净消毒液本讲稿第七页，共十四页（3 3）接种：）接种：要注意茎段
6、的方向，形态学上端朝上（4 4）培养：）培养：菊花组织培养的要求：温度1822，PH=5.8，光照每日12h（5 5）移栽：）移栽：本讲稿第八页，共十四页本讲稿第九页，共十四页本讲稿第十页，共十四页本讲稿第十一页，共十四页植物组织培养过程示意图植物组织培养过程示意图 2、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？、上面的示意图中还有什么地方不够完善的？没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。本讲稿第十二页，共十四页你能将下面六个图正确排序吗？你能将下面六个图正确排序吗？本讲稿第十三页，共十四页思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？思考：以下培养基出现的现象反应了什么问题？本讲稿第十四页，共十四页