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1、论著常见精练油中植物甾醇测定方法的建立及含量分析冯妹元!，韩军花!刘成梅杨月欣!（!#中国疾病预防控制中心营养与食品安全所，北京!$%$；&南昌大学食品科学教育部重点实验室，江西南昌$()）摘要：为对我国常见的植物油中植物甾醇含量进行测定，建立了植物甾醇气相色谱分析方法，并对!类共%种精炼植物油中的!*谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、!*谷甾烷醇、菜油甾烷醇及菜籽甾醇等的含量进行分析。本方法相对标准差为!&!+,-&.+；菜油甾醇、豆甾醇、!*谷甾醇的回收率的!#值范围为&$+,(&)+。玉米胚芽油中植物甾醇含量最高，其次是菜籽油和芝麻油。不同种类的植物油植物甾醇的含量和比例各不相同，同一种类不同品
2、牌的植物油中各植物甾醇所占的比例基本接近。对我国居民植物油中植物甾醇的摄入量进行了初步估计。本研究建立的方法可靠，具有较高的准确度和精密度，可以作为精炼植物油中植物甾醇的测定方法。建议我国居民可以通过食用含植物甾醇较高的食用油来增加植物甾醇的摄入量。关键词：植物油类；植物甾醇类；色谱法，气相!#$%&()*$+,$-*.)/%$*0#,#*+12,1$2$%3)/,$,#*$4 12 342,514/012 3456789:，;89，?A B4:C6D45，E5:4J4 BOB，P45Q5:C!$%$，B5:9）67,*8,：:HLM4L GH 4JG9RI5J G4 2B D4GHMJ KH
3、L M4G4LD5:9G5H:S7GHJG4LHIJ TH:G4:G 5:SI9:G H5IJ THDDH:I7 TH:J8D4M 5:B5:9，7MLHI7J5J，4FGL9TG5H:9:M 2B6/O TH:M5G5H:J U4L4 HSG5D5J4M 9:M G4 TH:G4:GJ HK!6J5GHJG4LHI，T9DS4JG4LHI，JG5CD9JG4LHI，!6J5GHJG9:HI，T9DS4JG9:HI 9:M RL9JJ5T9JG4LHI 5:%J9DSI4J HK!V5:MJ HK SI9:G H5IJ U4L4 9:9I7W4M#X4 L4J8IGJ JHU4M G9G G4
4、!#HK G5J D4GHM U9J L9:C4M KLHD!&!+GH-&.+9:M G4!#HK L4THY4L7 L9:C4M KLHD&$+GH(&)+#4!4M5RI4 H5IJ9:9I7W4M THL:4DRL7H H5I TH:G95:4M G4 5C4JG S7GHJG4LHIJ，9:M G4 KHIIHU5:C H:4J U4L4 L9S4J44M H5I 9:M J4J9D4 H5I#PHG G4TH:G4:GJ 9:M L9G5HJ HK S7GHJG4LHIJ U4L4 Y9L59RI4 5:M5KK4L4:G V5:MJ HK SI9:G H5IJ，U5I4 G4 S
5、4LT4:G9C4 HK 49T S7GHJG4LHI U9J 9IDHJGTH:J5JG4:G 5:M5KK4L4:G RL9:MJ HK G4 J9D4 H5I#X4 M95I7 M54G9L7 5:G9V4J HK S7GHJG4LHIJ KLHD G4 SI9:G H5IJ HK B5:4J4 S4HSI4 U4L49IJH 4JG5D9G4M#X4 2B6/O D4GHM 5J L4I59RI4 9:M 9TT8L9G4，9:M T9:R4 8J4M GH 9:9I7W4 G4 S7GHJG4LHIJ TH:G4:GJ 5:4M5RI4 H5IJ#X4 5:G9V4 HK H5IJ
6、U5G 5C4L S7GHJG4LHIJ T9:4IS GH 5:TL49J4 G4 5:G9V4 HK S7GHJG4LHIJ 5:B5:4J4 S4HSI4#9#/:$*;：ZI9:G 5IJ；Z7GHJG4LHIJ；BLHD9GHCL9S7，29J基金项目：中国营养学会营养科研基金$(年资助作者简介：冯妹元女硕士生通讯作者：韩军花女博士植物甾醇（S7GHJG4LHI HL SI9:G JG4LHI）是植物中一种具有多种生理功能的活性成分!，主要包括!6谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、菜籽甾醇和相应的烷醇等，化学结构与胆固醇非常相似，仅侧链结构不同。植物甾醇几乎存在于所有植物性食物中，植物油和谷
7、物是植物甾醇最主要的膳食来源，其次是豆类、蔬菜、水果、浆果以及坚果等。大量研究证明，植物甾醇具有降低血液胆固醇、防治前列腺肥大、抗癌、类激素等多种生理功能。目前，一些国家已经展开了食物中植物甾醇的含量测定工作，并估计居民膳食摄入量，(。测定植物甾醇的方法较多，早期有毛地黄皂甙法、比色法、酶法等，但这些方法只能测定总甾醇含量，不能对各甾醇组分分离定量。后来文献报道有化学法、薄层色谱法（X?B）、高效液相色谱法（;Z?B）和气相色谱法（2B）等。在众多方法中，由于 2B 法分离效果好、分析速度快、灵敏度高、操作简便，所以本研究在参照国外文献的基础上,%，建立起了精炼植物油植物甾醇的测定方法*气相色
8、谱法，并在建立植物油植物甾醇的气相色谱（2B*/O）分析方法的基础上，对我国常见!类共%种精炼植物油中植物甾醇的含量进行了分析，为估计居民摄入量并指导我国居民合理膳 食 提 供 基 础数据。!材料与方法!&!标准品与试剂!*谷甾醇（!6J5GHJG4LHI）、豆甾醇（JG5CD9JG4LHI）、!*谷甾烷醇（!6J5GHJG9:HI）标准物质购自 N5CD9 公司；菜油甾醇（T9DS4JG4LHI）和菜籽甾酶).!常见精练油中植物甾醇测定方法的建立及含量分析 冯妹元韩军花刘成梅等万方数据（!#$%&()*）标准品购自陕西天维生物制品有限责任公司；+!,胆甾烷（+!-!.)*%&(%）购自/01
9、&2(.%&%公司；34567 8 59:4（;8#公司；无水乙醇、氢氧化钾、三氯甲烷、甲苯、吡啶、酸酐等常用试剂购自汕头西陇化工厂。?仪器岛津气相色谱仪 A:,;7（带氢火焰离子检测器），岛津:3B 毛细管柱（C?+#，C?D#E+#），41)1=F&7 G)&电子天平、六孔恒温水浴锅、3F!.=HI 旋转蒸发器、5AJ,IA 台式离心机、K,/L7B 吹氮仪。?D样品的选择根据我国居民食用植物油的种类和销售情况，确定选取植物油样的种类及同一类型植物油的采样数。本实验中，所有油样均为市售精练油，大豆色拉油、花生油、芝麻油各购买 H 个品牌的样品，菜籽油、橄榄油各购买 D 个品牌的样品，茶油购
10、买 个品牌的样品，其余样品包括山茶油、葵花籽油、胡麻籽油、红花籽油、玉米油各购买 各品牌的样品。每个品牌的样品混合均匀后称样，取双样进行分析。的试样置于加了内标物（+!,胆甾烷）的三角瓶中，加入氢氧化钾,乙醇溶液，在沸水浴中皂化 DC#=(；冷却后利用三氯甲烷萃取，接着用去离子水洗至中性，过无水硫酸钠除残余水分，浓缩后用氮气吹干，加入 345678 59:4（;8）进行衍生，定容至#*，上机。?+气相色谱条件采用气相色谱仪，6MG 检测器；进样量为*；分流比为 D;N；氮气流量为 HC#*O#=(；进样口和检测器温度为 DCCP。采用程序升温，初始温度为 CP，以 C PO#=(升至Q+P，保
11、留+#=(。结果与讨论?皂化温度和时间及衍化分别采用不同浓度的氢氧化钾,乙醇溶液进行皂化，并对皂化温度和时间进行比较和优化，最终确定以饱和氢氧化钾 8乙醇（8）进行皂化，皂化时间为沸水浴 DC#=(。将未衍生的标准品直接上机可以得到各甾醇的峰，但各主要甾醇分离效果不理想，且有拖尾（如图 所示）。而将标准品经 34567 8 59:4 试剂处理后，各甾醇的活性氢原子被硅烷基所取代，使甾醇的热稳定性更高，更易挥发，同时其极性下降，检测灵敏度提高（如图 所示）。采用上述前处理方法和 A:,6MG 分析方法，各甾醇可得到很好的分离，而且杂峰少（如图 D 所示），各甾醇保留时间、相对保留时间以及相对校正
12、因子如表 所示。本研究分析结果表明，各甾醇的保留图 标准物质未经衍生的 A:,6MG 图谱图 标准物质经衍生后的 A:,6MG 图谱时间稳定，绝对保留时间在 C?#=(以内，相对保留时间差在 C?C#=(以内。以大豆油、花生油、芝麻油为测定样品进行了回收率的测定，D 种主要植物甾醇即#,谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇的回收率如表 所示，说明该方法的准确度较高。同时测定 I 次大豆油中植物甾醇的含量，测定结果表明，#,谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇和#,谷甾烷醇的相对标准偏差分别为?R、H?DR、+?R 和 I?;R，说明本方法的重复性较好，且精密度较高，方法可靠。该方法前处理简单易行，且所确定的 A:,6
13、MG 条件能够很好地分离各类植物甾醇，准确度和精密度均较好，分析速度快（只需 S#=(），在各实验室容易实现。图 D大豆油的 A:,6MG 图谱?常见精炼植物油中植物甾醇含量表 显示S;中国食品卫生杂志:TMK/4/UVWXK7J V6 6VVG TYAM/K/CCI 年第 S 卷第 D 期万方数据表!各甾醇单体的保留时间、相对保留时间及相对校正因子组分保留时间（#$）相对保留时间%相对校正因子&!胆甾烷（内标）!(&)!(*谷甾醇)+(*!)(*,!()!*-*(*./菜油甾醇)*(/+!(,*!(!+*-*(*+&豆甾醇)!(/.!(,0!(*0,/-*(*&.谷甾烷醇)+(&*)(!1!
14、(!&00-*(*&/菜油甾烷醇)!(!*!(,1!(!+*-*(*&1菜籽甾醇!,(.*!(.!(!&1!-*(*&1注：%各组分保留时间2内标物的保留时间了不同种类精炼植物油中各甾醇的含量及其百分比，总的来说，不同种类的植物油，植物甾醇的含量和比例各不相同，多数植物油中以 谷甾醇为最主要的植物甾醇，在&.(+3 4,!()3之间；而茶籽油中植物甾醇组成比较特殊，是以 谷甾烷醇为主，占总甾醇的.)3 4.,3。同一种类不同品牌的植物油中各植物甾醇所占的比例基本接近，说明原料种类是影响植物油中植物甾醇含量和比例的关键因素，这与国外的报道相一致&。表)1 种主要植物甾醇的回收率甾醇种类样品种类样
15、品测定值（#5）加标量（#5）加标后测定值（#5）回收率3!#（3）菜油甾醇大豆油花生油菜籽油!)1(,1.)(/&!,+(0&0/(+!,(0).)(/&!/0(.0.(,!.()!)&(&*)1.(*10&(&!)!(/!)&(&*)&)(!*!*+(!.,()0.)(/&!1!()*!*(!.&(.).)(/&!),(!+00(.0(.)!)&(&*!0/(/1!*)(!/*(.)!)&(&*!0.(0/!*(/)&/(*.)(/&1)(/+!*+(,)./(/,.)(/&11+(+!*1(*),.(,!)&(&*+!&(!1!*)()/!()!)&(&*10+()10,(*1(*豆甾醇
16、大豆油花生油菜籽油!)(,/./(/&!/(!)0+(,!*,(+./(/&!/)(+10+(+!*/(*!1&(&*)1.(0,0&(0!()&!1&(&*)+.(./!*(.+,(0*./(/&!1(/,0+(+.(00./(/&!*0(&)0)(1+0(,&!1&(&*!/+(!)0!(/&*(&/!1&(&*!/)(0,0*(+)(+&./(/&,!()*,.(/)1(&./(/&,0(.,0/(.)&(*&!1&(&*!&().0.(!)1(.0!1&(&*!10(!1,&()+(/$谷甾醇1.+()/!*(&*+/1(/00(!大豆油1&!(/1!*(&*+.!(&)00(+1+)
17、(+.)!(*&.+(10!*(+1&0(1+)!(*&0.(.*!*/(+1&0(.&!*(&*+/)(!*!(,花生油1+&(.)!*(&*+.&(!)!*,(!1.(./)!(*.*0(1)!*0(,1/!(01)!(*.!1(&.!*0(1&/1(&!*(&*.,1(+&00(&菜籽油.*)(*1!*(&*/!.(1/!*1(&.+*(*&)!(*,.0(.0!*1(0.*&()*)!(*,)*(&10/(+()00!常见精练油中植物甾醇测定方法的建立及含量分析 冯妹元韩军花刘成梅等万方数据所测定的不同种类精炼植物油中，玉米胚芽油中植物甾醇的含量最高，总植物甾醇的含量超过了!#$%!$
18、，其中!&谷甾醇占总甾醇的()!*；菜籽油和芝麻油也是甾醇含量比较高的食用油，总甾醇含量均在+,#$%!$之间。菜籽油中菜油甾醇所占比例在各种植物油中为最高，占总甾醇的-+*,-.*，并且含有一定量的菜籽甾醇，平均所占比例为.)/*。大豆油和花生油是我国北方居民普遍食用的植物油，本研究分别测定了(个不同品牌的大豆油和花生油，其中(个不同品牌的大豆油中植物甾醇的总平均含量为/0（-01,/-.）#$%!$，(个不同品牌的 花 生 油 中 总 平 均 含 量 为-(+（-!,-0+）#$%!$，大豆油中豆甾醇的比例大于花生油而!&谷甾醇比例相对较低，与文献报道一致。其它种类的植物油包括胡麻油、葵花
19、籽油、橄榄油、红花籽油、茶油及山茶油等各种植物甾醇的含量和比例详见表/。表/-+种精练食用植物油中的植物甾醇含量#$%!$样品名称!&谷甾醇菜油甾醇豆甾醇!&谷甾烷菜油烷醇菜籽甾醇#$%!$*#$%!$*#$%!$*#$%!$*#$%!$*#$%!$*总含量花生油!11)!/1)+/1).!/).-+)-.)-/)!01)(-0()+花生油-!0+)-+)./1)0-!()1-/).1)1-+)-.)+-)1花生油/!/-)+.+)1/!)-!+)(-)+!)-!0)-(1)-!)/花生油(!-).+0)-/()+!()/-/)!(.)+-!)0-.)-(-)/0花生油均值!()0/0)-/+
20、)!()+-/).)(-!)0.1).-(+)!-豆油!1.)/.+0)+-)!.)!1)/!0)+)-/-.)-豆油-!+.)/+0)(+)+!1)(.)/+!0)0!)+)-)().-01)/豆油/!01)1+0)-)0-!.)(+)1!0)1!+)0+)!)1)/!-).豆油(!0()+!+)(+1)1/!.)+.)0!.)!+)!().!)1/)/.)-+豆油均值!0+)+0)!+1)+!1).+)!1)/!)1+)-!)+-)+/0)/(菜籽油!/!1)(+1)/!+0)/(-1).+)!/).!/)+-)(/).)0(0)1.1)1+(+)!(菜籽油-/)-!+.)1!+!)+!-
21、0)(!()(1-)!).-)(+)!/1)-+-)/菜籽油/0)-(!)(!+)!.-+)+()+-)0!)/!)/!)1!/)!菜籽油均值/(!)+.).!+)!-0)-1)(!)(!)/-)!)-/)-+/)-.)/+0)!芝麻油!/)+0!)-.1).-!)+)+-1)+1!)-+!/)0+.()-0芝麻油-.!)-!)01-)!0)(+/)(!)-(+)(.)(0!)芝麻油/.)-/+)0!/()+!-)-.)11+)/.)(-)+.()/芝麻油(/+0).-).+)01!)()11)!0)01!/)/+00)!(芝麻油均值/+)0/-)0!-)1!1)(+)/1)!)0!).+.)
22、-0橄榄油!-+)(-1!)-!-)10/).().1!)+(/).!/)(/-).橄榄油-()1+01)+!-)11()!()!)+(.)0!+)./!-)-橄榄油/!/1)1!1-)/)/)-)!)+-/).!()-!0!)/玉米胚芽油!)0()!.+)0-!.)+)(+().!-)(!).!)00!)!/-)0胡麻油-/0)+/)0!-)-+)(+/)+/!-)!-.)+.)0.)/-)!(!)1/葵花籽油-1)0-)+/)+!()(/!)1!1)+!1).+)!/0-)-红花油!1)/(-)-+)!1)+-+)(/.)(-/)-.1)/)/.!)/-0)(+茶油!(+)+-)1!+).
23、1)!()!10)!-()!.-)-!.)0.茶油-/!).!.)1!)!0)/.)/)!.)0+1)!)(0山茶油+-)+.)/-!)+-()+!()!(!)!/)-/()(10)0-注：“”为低于检测限。-)/我国居民精炼植物油中植物甾醇摄入量粗估-年全国营养调查结果显示0，我国城市居民植物油的摄入量为()-$%标准人日，农村为/)!$%标准人日。我国北方居民以花生油和大豆油为主，南方居民以食用菜籽油为主，本实验中花生油和大豆油中总植物甾醇的平均含量为-0)-/#$%!$，菜-中国食品卫生杂志2345676 89:;5 99?3A4656-年第!1 卷第/期万方数据籽油中总甾醇的含量为!#
24、$%&()%#(，由此估计我国北方城市居民和农村居民从精炼植物油中摄入的植物甾醇分别为%、*+()标准人日，其中!,谷甾醇摄入量约占&-.；南方城市居民和农村居民从植物油中摄入的植物甾醇分别为-/、%-()标准人日，其中!,谷甾醇摄入量约占&#.。我国南方居民从植物油中摄入的植物甾醇量远高于北方居民。由本研究测定结果可知，植物油中以!,谷甾醇和菜油甾醇为主，其次是!,谷甾烷醇、豆甾醇、菜籽甾醇和菜油甾烷醇。同一类别而品牌不同的植物油中植物甾醇的比例基本一致，总含量存在一定的差异，可能与精炼方法、储存条件、原料的品种以及生长季节等多种因素有关。大豆油和花生油的植物甾醇含量低于菜籽油，所以我国南方
25、居民从植物油中摄入的植物甾醇的量高于北方居民。因此建议居民可以通过食用植物甾醇含量高的植物油如玉米胚芽油、菜籽油等来增加植物甾醇的摄入量，以达到降低慢性病发生率的作用。参考文献%01234 5，67889:，5;9?1 A8321=3A832A 94B!CA;81A8941=3A832 9A;4D;E;812A 1F GD1=3A8321=9EA12H8;14;4 D794A9=E1I3=J$ND3HD81A8321=A G148348 1F A13 G3239=F11B G114=G14A73B;4?I3B34 94B;4 8D3 038D32=94BA J J17249=1F O11BK1
26、H1A;8;14 94B P Q;341:;21434，J92;N1;R1，S;889:77HH1434C:;9:=948A8321=A;4 R3(389E=3A，F27;8A 94B E322;3A J J17249=1F 8D3?G;34G3 1F O11B 94B!J92;N1;R1，T98D32;43:D;=;HA，63832;498;14 1F A8321=A;4 F11BA：23G1R32 1F F233，3A832;F;3B94B(=G1A;B;G A8321=A J J17249=1F O11B K1H1A;8;14 94B&T98D32;43 M:D;=;HA，69R;B M
27、 S7(;1，J92;V N1;R1，38 9=O233 94B 3A832;F;3B A8321=G1H1A;8;14 1F 3B;E=3 1;=A 94B F98AJ J17249=1F O11B K1H1A;8;14 94B 王陇德，主编 中国居民营养与健康状况调查报告之一-#-综合报告 S 北京：人民卫生出版社-#!收稿日期：-#&,#+,#-中图分类号：S%!；N?-!$%；W&-/$-%文献标识码：K文章编号：%#P,*P!&（-#&）#+,#%/,#!上接暗码-管理在不断地总结教训与问题、借鉴经验和进行改进。彭军等的“卫生部批准的/!种参类保健食品情况分析”在对大量材料的分析后指
28、出：“绝大多数的参类保健食品申报的功能都在高度重复，而审批部门却针对同一类产品，同一种功效成分，同一种功能，进行着重复的功效成分定性、定量分析，动物或人群功能实验，用以证明其是否具有特定的保健功能。这样的重复不仅带来财力、物力、人力及时间上的巨大浪费，也不利于评审后的监督管理，更不利于保健食品的健康发展。”+张李伟等的“中国保健食品功能宣称流通现状与分析”文章，通过调查指出了目前保健食品存在宣称同质化的严重倾向，绝大多数保健食品产品集中在少数几个功能宣称上，并介绍了有关部门对所存在问题在政策上的引导。从农田到餐桌，农产品、养殖产品、自然状态生长的食品是一切食品的源头，由于科学的发展，农业和养殖
29、业在方法方面应用和正在应用很多现代的手段和物质，知道这些方法和物质会对后续阶段的食品安全管理有很大的帮助。为此我们特请中国农业大学的陈芳老师为本刊撰写了“种植和养殖过程中的食品安全”一文。为保证从“水面到餐桌”的安全，张卫兵等在“海产贝类食品安全预警研究”中做了海产贝类的养殖安全方面的探索。我国改革开放后，国际的、国内的，会议的、活动的，政府的、民间的重大活动越来越多。食品安全是重大活动安全举办的主要保证之一。多年来，各级政府和食品卫生监督管理者对重大活动的食品安全管理进行了不断的探索和研究，总结了不少经验和教训。在这个基础上，卫生部发布了 重大活动食品卫生监督管理规范（本期刊登），将重大活动的食品安全管理程序化、标准化、法制化，对提高重大活动的安全系数提供了制度上的保证。食品的专项整治和抽检是保证某些食品安全卫生的有效手段，卫生部每年都要进行。各级监督机构多年来积累了大量的资料，是很大的一笔资源，希望能有同志将其本地本单位的这方面的工作进行总结和归纳，从多个角度审视，形成文章，为今后的工作提供数据和借鉴。卫生部卫生监督中心要于-#&年开展“卫下转第-+页%#-常见精练油中植物甾醇测定方法的建立及含量分析 冯妹元韩军花刘成梅等万方数据