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1、第三章 灭菌制剂与无菌制剂教学内容 第一节第一节 概述概述 第二节第二节 注射剂注射剂 第三节第三节 注射剂的制备注射剂的制备 第四节第四节 输液输液 第五节第五节 注射用无菌粉末注射用无菌粉末 第六节第六节 眼用液体制剂眼用液体制剂 第七节第七节 其他灭菌与无菌制剂其他灭菌与无菌制剂第一节 概述 基本概念：基本概念：灭菌与无菌制剂：灭菌与无菌制剂：主要是指直接注入体内或直主要是指直接注入体内或直接接触创伤面、粘膜等的一类制剂。接接触创伤面、粘膜等的一类制剂。灭菌灭菌(sterilization)sterilization)：应用物理或化学等方法应用物理或化学等方法杀灭或除去所有致病和非致病微
2、生物繁殖体和芽杀灭或除去所有致病和非致病微生物繁殖体和芽孢的手段。孢的手段。灭灭菌菌法法(the the technique technique of of sterilization)sterilization)：杀杀灭灭或或除除去去所所有有致致病病和和非非致致病病微微生生物物繁繁殖殖体体和和芽芽孢的方法或技术。孢的方法或技术。无菌无菌(sterility)sterility)：指在任一指定的物体、介质或环境指在任一指定的物体、介质或环境中，不得存在任何活的微生物。中，不得存在任何活的微生物。无无菌菌操操作作法法(aseptic aseptic technique)technique)：指指
3、在在整整个个操操作作过过程程中中利利用用或或控控制制一一定定的的条条件件，使使产产品品避避免免被被微微生生物物污污染染的的一种操作方法或技术。一种操作方法或技术。防腐防腐(antisepsis)antisepsis)：用物理或化学方法抑制微生物的用物理或化学方法抑制微生物的生长与繁殖的手段，亦称抑菌。对微生物的生长与繁殖生长与繁殖的手段，亦称抑菌。对微生物的生长与繁殖具有抑制作用的物质称具有抑制作用的物质称防腐剂或抑菌剂防腐剂或抑菌剂。消毒消毒(disinfection)disinfection)：用物理或化学方法杀灭或除去用物理或化学方法杀灭或除去病原微生物的手段。对病原微生物具有杀灭或除去
4、作用病原微生物的手段。对病原微生物具有杀灭或除去作用的物质的物质消毒剂消毒剂。第一节内容框架一、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类一、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类二、灭菌与无菌技术二、灭菌与无菌技术（一）物理灭菌技术（一）物理灭菌技术（二）化学灭菌法（二）化学灭菌法四、冷冻干燥技术四、冷冻干燥技术三、空气净化技术三、空气净化技术（三）无菌操作法（三）无菌操作法一、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类一、灭菌制剂与无菌制剂的定义与分类 1 1、药物制剂分类、药物制剂分类 按给药途径：按给药途径：无菌制剂和非规定无菌制剂无菌制剂和非规定无菌制剂(即即限菌制剂限菌制剂)。按除去活微生物的制备工艺：按除去活微
5、生物的制备工艺：无菌制剂分灭菌无菌制剂分灭菌制剂和无菌制剂。制剂和无菌制剂。广广义义上上，无无菌菌制制剂剂和和非非无无菌菌制制剂剂都都规规定定有有染染菌菌的的限限度度，前前者者要要求求不不得得检检出出活活菌菌，后后者者限限制制染染菌的种类与数量。菌的种类与数量。2 2、定义、定义灭菌制剂：灭菌制剂：指采用某一物理、化学方法杀灭或指采用某一物理、化学方法杀灭或除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物除去所有活的微生物繁殖体和芽孢的一类药物制剂。制剂。无无菌菌制制剂剂：采采用用某某一一无无菌菌操操作作方方法法或或技技术术制制备备的的不不含含任任何何活活的的微微生生物物繁繁殖殖体体和和芽芽孢孢的的一
6、一类类药药物制剂。物制剂。3 3、无菌制剂的种类、无菌制剂的种类注射用制剂：注射用制剂：注射剂、输液、注射粉针等；注射剂、输液、注射粉针等；眼用制剂：眼用制剂：滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂、凝胶滴眼剂、眼用膜剂、软膏剂、凝胶剂等；剂等；植入型制剂：植入型制剂：植入片等；植入片等；创面用制剂：创面用制剂：溃疡、烧伤及外伤用溶液、软膏溃疡、烧伤及外伤用溶液、软膏剂、气雾剂等。剂、气雾剂等。手术用制剂：手术用制剂：止血海绵剂和骨蜡等。止血海绵剂和骨蜡等。药剂学中灭菌法的分类：二、灭菌与无菌技术二、灭菌与无菌技术 1 1、干热灭菌法（熟悉）、干热灭菌法（熟悉）干热空气灭菌法：干热空气灭菌法：指用指用高温干
7、热空气高温干热空气灭菌的方法。灭菌的方法。(1)(1)干热灭菌条件：干热灭菌条件：一般规定为一般规定为1 135-14535-145，3-5h3-5h；160-160-170170，2-42-4h h；180-180-200200，0.5-0.5-1 1h h（从灭菌物品全达到（从灭菌物品全达到特定温度后开始计时）。特定温度后开始计时）。(2)(2)适用范围：适用范围：耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿气透耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿气透的油脂类的油脂类(如油性软膏基质、注射用油等如油性软膏基质、注射用油等)和耐高温的粉和耐高温的粉末化学药品等的灭菌。末化学药品等的灭菌。(3)3)缺点：
8、缺点：在干燥状态下，热穿透力弱，温度不易均匀，由在干燥状态下，热穿透力弱，温度不易均匀，由于灭菌温度过高，不适用橡胶、塑料及大部分药品。于灭菌温度过高，不适用橡胶、塑料及大部分药品。（一）物理灭菌技术（一）物理灭菌技术火焰灭菌法：火焰灭菌法：指用指用火焰直接灼烧火焰直接灼烧灭菌的方法。灭菌的方法。适适用用范范围围：此此法法灭灭菌菌迅迅速速、可可靠靠、简简便便，适适用用于于耐耐火火焰焰材材质质(如如金金属属、玻玻璃璃及及瓷瓷器器等等)的的物物品品与与用用具具，不不适适合合于于药物。药物。高速风灭菌法：高速风灭菌法：应应用用的的风风速速为为30-8030-80m/sm/s，风风温温度度高高为为19
9、0190。2 2mlml的的安安瓿瓿注注射射液液应应用用此此法法灭灭菌菌（由由于于降降低低了了安安瓿瓿周周围围的的滞滞流流层层的的厚厚度度，能能于于短短时时间间内内使使安安瓿瓿内内液液体体迅迅速速升升至至高高温温，呈呈现现显著灭菌效果）。显著灭菌效果）。2 2、湿热灭菌法、湿热灭菌法定义：定义：指用指用饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽饱和蒸汽、沸水或流通蒸汽进行灭菌进行灭菌的方法。的方法。优点：优点：由于由于蒸气比热大，穿透力强，容易使蛋白蒸气比热大，穿透力强，容易使蛋白变性，同时还有灭菌效率高，操作简便等优点变性，同时还有灭菌效率高，操作简便等优点，湿热灭菌法是应用最广泛的一种灭菌方法湿热灭菌法是应
10、用最广泛的一种灭菌方法。类别：类别：包括包括热压灭菌法、流通蒸气灭菌法、煮沸热压灭菌法、流通蒸气灭菌法、煮沸灭菌法和低温间歇灭菌灭菌法和低温间歇灭菌等方法，根据药品性质进等方法，根据药品性质进行选用合适的方法。行选用合适的方法。（1 1）热压灭菌法（掌握）热压灭菌法（掌握）定义：定义：指用高压饱和水蒸汽加热杀灭微生物的方法。指用高压饱和水蒸汽加热杀灭微生物的方法。本本法一般公认为最可靠的湿热灭菌法。法一般公认为最可靠的湿热灭菌法。灭灭菌菌条条件件：热热压压灭灭菌菌所所需需的的温温度度及及与与温温度度相相当当的的压压力力及及时间如下（湿热灭菌一般要求时间如下（湿热灭菌一般要求F F0 01 11
11、212分）：分）：1)1151)115，1.71.7atm(67kPaatm(67kPa，7.1kg/cm7.1kg/cm2 2)，30min30min；2)121 2)121，2.0atm(97kPa2.0atm(97kPa，11kg/cm11kg/cm2 2)，20min20min；3)126 3)126，2.4atm(139kPa2.4atm(139kPa，14.1kg/cm14.1kg/cm2 2)，15min15min。适适用用范范围围：耐耐高高温温和和耐耐高高压压蒸蒸气气的的所所有有药药物物制制剂剂、玻玻璃璃和金属容器、瓷器、橡皮塞、滤膜过滤器等。和金属容器、瓷器、橡皮塞、滤膜过滤
12、器等。热压灭菌器：热压灭菌器：1 1）设备特点：）设备特点：热压灭菌器主要由灭菌腔室、锅炉蒸汽热压灭菌器主要由灭菌腔室、锅炉蒸汽加热夹套、真空系统、进入灭菌腔室净化空气的加热加热夹套、真空系统、进入灭菌腔室净化空气的加热系统（需干燥处理的灭菌物品）、纯蒸汽系统、压力系统（需干燥处理的灭菌物品）、纯蒸汽系统、压力控制系统和温度控制系统、计算机控制系统等组成。控制系统和温度控制系统、计算机控制系统等组成。2 2）常用种类：）常用种类：手提式热压灭菌器手提式热压灭菌器 卧式热压灭菌柜卧式热压灭菌柜灭菌操作：夹套通入普通蒸汽预热加压放置待灭菌物品抽尽空气通入纯饱和蒸汽灭菌一定时间停止通气排气减压冷却检
13、漏热压灭菌器使用时应注意的问题：热压灭菌器使用时应注意的问题：(1)(1)应先进行灭菌条件试验，确保灭菌效果。应先进行灭菌条件试验，确保灭菌效果。考考虑虑灭灭菌菌器器的的构构造造、被被灭灭菌菌物物体体积积、数数量量、排排布布对对灭菌效果的影响，确定灭菌条件。灭菌效果的影响，确定灭菌条件。(2)(2)必须将灭菌器内的空气排出。必须将灭菌器内的空气排出。附有真空装置，在通入蒸气前将室内空气抽出：附有真空装置，在通入蒸气前将室内空气抽出：保证通入的是饱和蒸气灭菌；保证通入的是饱和蒸气灭菌；可加快预热过程，缩短灭菌时间；可加快预热过程，缩短灭菌时间；有效地将多孔性物质中空气驱除，有利于水蒸气的穿有效地
14、将多孔性物质中空气驱除，有利于水蒸气的穿透，同时灭菌器内温度均匀。透，同时灭菌器内温度均匀。(3)(3)灭菌时间必须由全部药液温度达到所要求的温度时灭菌时间必须由全部药液温度达到所要求的温度时算起，压力应与规定压力一致。算起，压力应与规定压力一致。温度：温度：采用灭菌温度和时间自动控制记录的装置；使用采用灭菌温度和时间自动控制记录的装置；使用温度批示剂如化学药品指示剂或生物性指示剂温度批示剂如化学药品指示剂或生物性指示剂压力：压力：压力表指示与规定压力不一致，则有可能空气没压力表指示与规定压力不一致，则有可能空气没有排尽，也可能压力表失灵，也可能不是饱和蒸气，应有排尽，也可能压力表失灵，也可能
15、不是饱和蒸气，应找出原因，加以解决。找出原因，加以解决。(4)(4)灭菌完毕后，停止加热，减压至零后，放出柜内蒸灭菌完毕后，停止加热，减压至零后，放出柜内蒸气，使柜内压力与大气压相等后，稍稍打开灭菌锅待气，使柜内压力与大气压相等后，稍稍打开灭菌锅待10101515分钟，再全部打开。这样可避免内外压力差太大而分钟，再全部打开。这样可避免内外压力差太大而使物品冲出锅外和使玻璃瓶炸裂使物品冲出锅外和使玻璃瓶炸裂（必须注意，以免发生（必须注意，以免发生工伤事故）工伤事故）。为了缩短灭菌周期，也有对灭菌器内盛有。为了缩短灭菌周期，也有对灭菌器内盛有溶液的容器喷雾水冷却，以加速冷却。溶液的容器喷雾水冷却，
16、以加速冷却。（2 2）流通蒸气灭菌法）流通蒸气灭菌法 定义定义：指在常压下，采用指在常压下，采用100100流通蒸气加热杀灭微生流通蒸气加热杀灭微生物的方法。物的方法。灭菌条件：灭菌条件：常压下（常压下（1.0 1.0 atmatm），），100 100流通蒸气，时流通蒸气，时间间30-6030-60minmin。适用范围适用范围：用于消毒及不耐高热制剂的灭菌。：用于消毒及不耐高热制剂的灭菌。缺点：缺点：不能保证杀灭所有的芽孢，如破伤风等厌气性菌不能保证杀灭所有的芽孢，如破伤风等厌气性菌的芽孢，是非可靠的灭菌法。的芽孢，是非可靠的灭菌法。制备过程中要尽可能避免污染，这点必须充分注意。制备过程中
17、要尽可能避免污染，这点必须充分注意。目前我国药厂生产注射剂，特别是目前我国药厂生产注射剂，特别是1-21-2mlml注射剂及不耐高热注射剂及不耐高热的品种，可考虑采用这种灭菌法。的品种，可考虑采用这种灭菌法。（3 3）煮沸灭菌法）煮沸灭菌法定义：定义：指将待灭菌物置沸水中加热灭菌的方法。指将待灭菌物置沸水中加热灭菌的方法。灭菌条件：灭菌条件：沸水，时间沸水，时间30-6030-60minmin。适用范围：适用范围：常用于安瓿、注射器、注射针头等器常用于安瓿、注射器、注射针头等器皿的消毒皿的消毒。缺点：缺点：此法灭菌效果差，必要时加入抑菌剂，如此法灭菌效果差，必要时加入抑菌剂，如三氯叔丁醇、甲酚
18、等。三氯叔丁醇、甲酚等。（4 4）低温间歇灭菌法）低温间歇灭菌法定义：定义：指将待灭菌物置指将待灭菌物置60-8060-80的水或流通蒸汽中加热的水或流通蒸汽中加热60min60min，杀灭微生物繁殖体后，在室温条件下放置，杀灭微生物繁殖体后，在室温条件下放置2424h h，让待灭菌物中的芽孢发育成繁殖体，再次加热灭菌、放让待灭菌物中的芽孢发育成繁殖体，再次加热灭菌、放置，反复多次，直至杀灭所有芽孢。置，反复多次，直至杀灭所有芽孢。适用范围：适用范围：适合于不耐高温、热敏感物料和制剂。适合于不耐高温、热敏感物料和制剂。缺点：缺点：费时、工效低、灭菌效果低。加适量抑菌剂，以费时、工效低、灭菌效果
19、低。加适量抑菌剂，以增加灭菌效力。增加灭菌效力。影响湿热灭菌的因素影响湿热灭菌的因素 1)1)微生物的种类和数量：微生物的种类和数量：芽孢繁殖体衰老体芽孢繁殖体衰老体每个容器的细菌数，控制在每个容器的细菌数，控制在1010个以内为宜；最初菌数愈个以内为宜；最初菌数愈少，达到灭菌时间愈短。少，达到灭菌时间愈短。整个生产过程应尽可能避免微生物污染，尽可能缩短生整个生产过程应尽可能避免微生物污染，尽可能缩短生产过程，并力求在灌封后立即菌。产过程，并力求在灌封后立即菌。2)2)蒸气性质：蒸气性质：蒸气有饱和、湿饱和、过热三种。蒸气有饱和、湿饱和、过热三种。3)3)注射液的性质：注射液的性质：注射液若含
20、有营养物质，如糖类注射液若含有营养物质，如糖类,蛋白质等，对微生物蛋白质等，对微生物可能有一种保护作用，能增强其抗热性，应适当提高可能有一种保护作用，能增强其抗热性，应适当提高灭菌温度或延长灭菌时间。灭菌温度或延长灭菌时间。4)4)介质介质pHpH：药液药液pHpH对细菌的活性也有影响：一般微生物在中性液对细菌的活性也有影响：一般微生物在中性液中耐热性最大，在碱性溶液中次之，酸性不利于微生中耐热性最大，在碱性溶液中次之，酸性不利于微生物的发育。所以，一般在生物碱盐类的注射液，因物的发育。所以，一般在生物碱盐类的注射液，因pH pH 较低，用流通蒸气灭菌即可。较低，用流通蒸气灭菌即可。5)5)药
21、物的稳定性：药物的稳定性：灭菌温度增高，化学反应速度增加；灭菌时间愈长，起灭菌温度增高，化学反应速度增加；灭菌时间愈长，起反应的药物愈多。因此，反应的药物愈多。因此，灭菌需要考虑杀死细菌和保证灭菌需要考虑杀死细菌和保证药物有效性两个方面。药物有效性两个方面。在能达到灭菌的前提下，尽可能在能达到灭菌的前提下，尽可能降低灭菌温度和缩短灭菌时间。降低灭菌温度和缩短灭菌时间。实实践践证证明明在在力力求求避避免免微微生生物物污污染染和和严严格格质质量量控控制制的的条条件件下下，维维生生素素C C（不不稳稳定定药药物物）注注射射液液用用流流通通蒸蒸气气灭灭菌菌1515分钟是可行的。分钟是可行的。6)6)抑
22、菌剂的添加：抑菌剂的添加：添加适当抑菌剂时，药液经添加适当抑菌剂时，药液经100100，3030分钟加热，分钟加热，可杀可杀死抵抗力强的芽孢。死抵抗力强的芽孢。常用抑菌剂：常用抑菌剂：甲酚甲酚(0.1-0.3%)(0.1-0.3%)、氯甲酚、氯甲酚(0.05-0.1%)(0.05-0.1%)、三、三氯叔丁醇氯叔丁醇(0.2-0.5%)(0.2-0.5%)、苯酚、苯酚(0.1-0.5%)(0.1-0.5%)、硝酸苯汞或醋、硝酸苯汞或醋酸苯汞酸苯汞(0.001-0.002%)(0.001-0.002%)。注射量超过注射量超过5 5mlml的注射液，添加抑箘剂必须审慎选择。的注射液，添加抑箘剂必须审
23、慎选择。供供静静脉脉(除除另另有有规规定定外外)或或椎椎管管注注射射用用的的注注射射液液，均均不不得得添加抑菌剂。添加抑菌剂。定义：定义：指采用过滤法除去微生物的方法。即指采用过滤法除去微生物的方法。即药物药物溶液通过无菌的溶液通过无菌的除菌过滤器除菌过滤器，除去活的或死的微，除去活的或死的微生物而得到不含微生物的滤液。属于机械除菌方生物而得到不含微生物的滤液。属于机械除菌方法。法。适适用用范范围围：适适于于对对热热不不稳稳定定的的药药物物溶溶液液、气气体体、水等物品的灭菌。水等物品的灭菌。3 3、过滤灭菌法、过滤灭菌法过滤除菌滤器的要求：过滤除菌滤器的要求：(1)(1)能有效除净微生物，溶液
24、通过滤器顺畅，滤器容易清能有效除净微生物，溶液通过滤器顺畅，滤器容易清洗，操作简便。洗，操作简便。(2)(2)孔孔径径大大小小必必须须足足以以阻阻止止细细菌菌和和芽芽孢孢进进入入滤滤孔孔之之内内，以以LRVLRV（在在规规定定条条件件下下，指指定定菌菌液液通通过过滤滤器器后后截截留留在在滤滤膜膜上上的的 孢孢 子子 数数 的的 对对 数数 值值）表表 示示 过过 滤滤 能能 力力。孔孔 径径 通通 常常 为为0.20.22m2m（每每平平方方厘厘米米有有效效过过滤滤面面积积的的LRVLRV不不小小于于7 7）或或更更小。小。(3)(3)采用采用微孔滤膜滤器微孔滤膜滤器除菌，常选用孔径除菌，常选
25、用孔径0.220.22mm的滤膜。的滤膜。(4)(4)G6G6号号垂垂熔熔玻玻璃璃漏漏斗斗，其其滤滤孔孔直直径径在在1.51.5mm以以下下，可可以以除除去去细细菌菌，对对药药物物不不吸吸附附，也也不不影影响响药药液液的的pHpH，是是常常用用灭菌滤器。灭菌滤器。定义：定义：采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽孢的方法。采用辐射、微波和紫外线杀灭微生物和芽孢的方法。（1 1）辐射灭菌法辐射灭菌法 定义：定义：系采用放射性同位素素系采用放射性同位素素(6060CoCo和和137137Cs)Cs)放射的放射的 射线杀射线杀灭微生物和芽孢的方法。辐射灭菌剂量一般为灭微生物和芽孢的方法。辐射灭菌剂量一
26、般为2.5102.5104 4 GyGy(戈瑞戈瑞)。适用范围：适用范围：适合于热敏物料和制剂，常用于维生素、抗生素、适合于热敏物料和制剂，常用于维生素、抗生素、激素、生物制品、中药材和中药制剂、医疗器械、药用包装激素、生物制品、中药材和中药制剂、医疗器械、药用包装材料及药用高分子材料等物质的灭菌。材料及药用高分子材料等物质的灭菌。特特点点：不不升升高高产产品品温温度度，穿穿透透力力强强，灭灭菌菌效效率率高高，但但设设备备贵贵，有有潜潜在在危危险险性性，对对某某些些药药物物(特特别别是是溶溶液液型型)可可能能产产生生药药效效降低或产生毒性物质和发热物质等。降低或产生毒性物质和发热物质等。4 4
27、、射线灭菌法、射线灭菌法（2 2）微波灭菌法）微波灭菌法定义：定义：系采用微波系采用微波(频率为频率为300300MHz-300kMHz)MHz-300kMHz)照射产生照射产生的热能杀灭微生物和芽孢的方法。的热能杀灭微生物和芽孢的方法。适用范围：适用范围：适合于液体和固体物料，对固体物料具有适合于液体和固体物料，对固体物料具有干燥作用。干燥作用。特特点点：微微波波能能穿穿透透到到介介质质和和物物料料的的深深部部，表表里里加加热热一一致致，且且具具有有低低温温、常常压压、高高效效、快快速速(2-3(2-3min)min)、低低能能耗耗、无无污污染染、易易操操作作、易易维维护护，产产品品保保质质
28、期期长长(可可延延长长1/31/3以上以上)等。等。（3 3）紫外线灭菌法）紫外线灭菌法定义：定义：采用紫外线（能量）照射杀灭微生物和采用紫外线（能量）照射杀灭微生物和芽孢的方法。属于表面灭菌。芽孢的方法。属于表面灭菌。灭菌条件：灭菌条件：一般用于灭菌的紫外线波长是一般用于灭菌的紫外线波长是200-200-300300nmnm，灭菌力最强的是波长为灭菌力最强的是波长为254254nmnm的紫外线。的紫外线。适适用用范范围围：适适合合于于照照射射物物表表面面灭灭菌菌、无无菌菌室室空空气气及及蒸蒸馏馏水水的的灭灭菌菌；不不适适合合于于药药液液的的灭灭菌菌及及固固体物料深部的灭菌。体物料深部的灭菌。
29、定义：定义：是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀灭的方法，同时不应损害制品的质量。法，同时不应损害制品的质量。杀菌剂：杀菌剂：对微生物具有触杀作用的化学药品。分为气体杀对微生物具有触杀作用的化学药品。分为气体杀菌剂和液体杀菌剂。菌剂和液体杀菌剂。不能杀死芽孢，仅对繁殖体有效。不能杀死芽孢，仅对繁殖体有效。影响杀菌效果的因素：影响杀菌效果的因素：微生物的种类与数量、物体表面状微生物的种类与数量、物体表面状况、杀菌剂的性质。况、杀菌剂的性质。化学杀菌的目的：化学杀菌的目的：减少微生物的数目以控制一定的无菌状减少微生物的数目以控制一定的无菌状态。态。常用
30、的方法：常用的方法：（1 1）气体灭菌法气体灭菌法和和（2 2）药液灭菌法。）药液灭菌法。（二）化学灭菌法（二）化学灭菌法(1)气体灭菌法 定义：指采用气态杀菌剂进行灭菌的方法。适用范围：适合环境消毒以及不耐加热灭菌的医用器具、设备和设施等的消毒，粉末注射剂。应注意杀菌剂的残留量和与药物的相互作用。品种：环氧乙烷、甲醛、过氧乙酸等1)1)环氧乙烷环氧乙烷 性性质质：沸沸点点10.910.9，室室温温下下为为气气体体，水水中中溶溶解解度度为为1 1mlml水水中中可可溶溶195195ml(20ml(20，760mmHg)760mmHg)，易易穿穿透透塑塑料料，纸纸板板及及固固体体粉粉末末。暴暴露
31、露于于空空气气中中，环环氧氧乙乙烷烷就就可可从从这这些些物物质质消消散，对大多数固体呈惰性。散，对大多数固体呈惰性。杀菌作用：杀菌作用：由于其为烷化剂的性质，使菌体蛋白的由于其为烷化剂的性质，使菌体蛋白的-COOHCOOH、-NH-NH2 2、-SH-SH、-OH-OH的的H H，被被-CHCH2 2-CH-CH2 2-OH-OH所取代，从所取代，从而变性失活。而变性失活。适适用用范范围围：可可用用于于塑塑料料容容器器、对对热热敏敏感感的的固固体体药药物物、纸纸或或塑塑料料包包装装的的药药物物、橡橡胶胶制制品品、注注射射筒筒、注注射射针针头头、衣衣着着敷敷料料及及器器械械等等的的灭灭菌菌。但但
32、是是，一一些些塑塑料料、皮皮革革及及橡橡胶胶与与环环氧氧乙乙烷烷有有强强亲亲和和力力，故故需需长长达达12-2412-24h h通通空空气气驱除。驱除。环氧乙烷具环氧乙烷具可燃可爆可燃可爆，用时需用惰性气体二氧化碳或，用时需用惰性气体二氧化碳或氟利昂稀释。氟利昂稀释。环环氧氧乙乙烷烷的的吸吸入入毒毒性性较较大大，与与氨氨相相近近，但但无无氨氨样样的的剌剌激激嗅嗅味味，损损害害皮皮肤肤及及眼眼粘粘膜膜，可可产产生生水水泡泡或或结结膜膜炎炎，故应用时要注意。故应用时要注意。环氧乙烷灭菌的程序：环氧乙烷灭菌的程序：将灭菌物品置于灭菌器内后，减压排除空气，预将灭菌物品置于灭菌器内后，减压排除空气，预热
33、，环氧乙烷采用混合气，一般用环氧乙烷热，环氧乙烷采用混合气，一般用环氧乙烷1212氟利氟利昂昂8888或用环氧乙烷或用环氧乙烷1010二氧化碳二氧化碳9090，在减压下输，在减压下输入混合气，保持一定浓度、湿度、及温度，保持一定入混合气，保持一定浓度、湿度、及温度，保持一定时间后，抽真空排除环氧乙烷，然后送入无菌空气完时间后，抽真空排除环氧乙烷，然后送入无菌空气完全排除环氧乙烷。全排除环氧乙烷。灭菌条件：灭菌条件：浓度为浓度为850-900850-900mg/L(3mg/L(3小小时、时、45)45)，4545mg/L(5mg/L(5小时，小时，45)45)，相对湿度以，相对湿度以4040-6
34、060为宜，温度为为宜，温度为22-5522-55。2)2)甲醛甲醛 加热熏蒸甲醛溶液，每立方米空间用加热熏蒸甲醛溶液，每立方米空间用4040甲醛溶液甲醛溶液30 30 m1m1，室内相对湿度宜高，以增进甲醛气体灭菌效果。，室内相对湿度宜高，以增进甲醛气体灭菌效果。3)3)丙二醇丙二醇 丙丙二二醇醇用用于于室室内内空空气气灭灭菌菌具具有有不不挥挥发发性性和和无无引引火火性性等等特特点，灭菌用量为点，灭菌用量为1 1ml/mml/m3 3。4)4)乳酸乳酸 灭菌用量为灭菌用量为2 2ml/mml/m3 3，杀菌力不及甲醛，但对人无害。杀菌力不及甲醛，但对人无害。5)5)过氧乙酸过氧乙酸 过过氧氧
35、乙乙酸酸用用于于车车间间灭灭菌菌，效效力力比比相相同同浓浓度度的的甲甲醛醛大大两两倍倍半半，对对粘粘膜膜，眼眼部部无无剌剌激激性性，对对木木制制品品、金金属属制制品品、医医疗器械均无影响。疗器械均无影响。气态杀菌剂蒸汽发生装置(2)2)药液灭菌法药液灭菌法定义：定义：指采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法。指采用杀菌剂溶液进行灭菌的方法。适用范围：适用范围：常应用于其他灭菌法的辅助措施，适合于常应用于其他灭菌法的辅助措施，适合于皮肤、无菌器具和设备的消毒。皮肤、无菌器具和设备的消毒。常用品种：常用品种：0.10.1-0.2-0.2新洁尔灭溶液、新洁尔灭溶液、7575乙醇、乙醇、1 1聚维酮碘溶液、酚或
36、煤酚皂溶液等。聚维酮碘溶液、酚或煤酚皂溶液等。使使用用注注意意：由由于于化化学学杀杀菌菌剂剂常常施施用用于于物物体体表表面面，也也要要注意其浓度不要过高，以防其化学腐蚀作用。注意其浓度不要过高，以防其化学腐蚀作用。定义定义：指整个过程控制在无菌条件下进行的一指整个过程控制在无菌条件下进行的一种操作方法，该方法在技术上并非灭菌操作。种操作方法，该方法在技术上并非灭菌操作。适适用用范范围围：适适用用于于一一些些不不耐耐热热药药物物的的注注射射剂剂、眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂的制备。眼用制剂、皮试液、海绵剂和创伤制剂的制备。避箘操作：避箘操作：尽量避免微生物污染。尽量避免微生物污染。（三）无
37、菌操作法（三）无菌操作法(1)无菌操作室的灭菌 无菌操作前，无菌操作室的环境均须应用灭菌法灭菌：无菌操作前，无菌操作室的环境均须应用灭菌法灭菌：1)1)定期应用环氧乙烷、甲醛、丙二醇或乳酸等对空气定期应用环氧乙烷、甲醛、丙二醇或乳酸等对空气进行较彻底的灭菌。每天工作前开启紫外线一小时，进行较彻底的灭菌。每天工作前开启紫外线一小时，中午休息时间也要开中午休息时间也要开0.5-10.5-1小时。小时。2)2)用用3%3%酚溶液、酚溶液、2%2%煤酚皂溶液、煤酚皂溶液、0.20.2%新洁尔灭溶液或新洁尔灭溶液或7575%酒精等用对室内的空间、用具酒精等用对室内的空间、用具(桌椅等桌椅等)、地面、墙、
38、地面、墙壁等喷洒或擦试。壁等喷洒或擦试。3)3)其它用具：尽量用热压灭菌法或干热灭菌法灭菌。其它用具：尽量用热压灭菌法或干热灭菌法灭菌。(2)无菌操作无菌操作场所：无菌操作场所：无菌操作室无菌操作室层流洁净工作台层流洁净工作台无无菌操作柜菌操作柜无菌操作所用的一切用具、材料以及环境均需按前述无菌操作所用的一切用具、材料以及环境均需按前述灭菌法灭菌。灭菌法灭菌。操作人员进入操作之前要洗澡并换上已经灭菌的工作操作人员进入操作之前要洗澡并换上已经灭菌的工作服和清洁的鞋子，不使头发、内衣等露出来，以免造服和清洁的鞋子，不使头发、内衣等露出来，以免造成污染机会。成污染机会。(3)3)无菌检查法无菌检查法
39、药剂或药品经灭菌或无菌操作法处理后，需经无菌检验药剂或药品经灭菌或无菌操作法处理后，需经无菌检验证实已无微生物生存，方能使用。证实已无微生物生存，方能使用。灭菌效果，应以杀死芽孢为标准灭菌效果，应以杀死芽孢为标准(细菌的芽孢具有较强细菌的芽孢具有较强的抗热力，不易杀死的抗热力，不易杀死)。法定的无菌检查法：法定的无菌检查法：包括试管接种法和薄膜过滤法。包括试管接种法和薄膜过滤法。薄薄膜膜过过滤滤法法用用于于无无菌菌检检查查的的突突出出优优点点：可可滤滤过过较较大大量量的的样样品品，可可滤滤除除抑抑菌菌性性物物质质，滤滤过过后后的的薄薄膜膜，即即可可直直接接接接种种于于培培养养基基管管中中，或或
40、直直接接用用显显微微镜镜观观察察，故故此此法法灵灵敏敏度度高高，不不易易产产生生假假阴阴性性结结果果，检检测测次次数数减减少少，节节省省培培养养基基，操作比较简单。操作比较简单。1 1、灭菌参数在灭菌中的意义与作用、灭菌参数在灭菌中的意义与作用 无菌检验往往难以检出极微量微生物，为了保证产品无无菌检验往往难以检出极微量微生物，为了保证产品无菌，有必要对灭菌方法的可靠性进行验证是很必要的。菌，有必要对灭菌方法的可靠性进行验证是很必要的。主要原因：主要原因：灭菌温度多系测量灭菌器内的温度，不是灭菌物体内灭菌温度多系测量灭菌器内的温度，不是灭菌物体内的温度；的温度；无菌检验方法也在局限性，难以用现行
41、的无菌检验法无菌检验方法也在局限性，难以用现行的无菌检验法检出微量的微生物。检出微量的微生物。（四）灭菌参数（四）灭菌参数（F值和值和F0值）值）2 2、D D值值 杀灭微生物速度杀灭微生物速度-时间过程符合一级动力学过程：时间过程符合一级动力学过程：dN/dtdN/dt=-=-ktkt，即即lgNlgNt t=lgN=lgN0 0-kt/2.303-kt/2.303 令令D D值为斜率的负倒数，即值为斜率的负倒数，即D D=2.303/k=2.303/kt/t/（lgNlgN0 0-lgN-lgNt t）当当lgNlgN0 0-lgN-lgNt tlg100-lg10lg100-lg101
42、1时，时，D D=t/(lg100-lg10)=t/(lg100-lg10)D D值值：在在一一定定温温度度下下杀杀死死被被灭灭菌菌物物品品中中9090微微生生物物所所需需的的灭灭菌菌时时间间；也也可可定定义义为为降降低低微微生生物物一一个个十十位位数数或或一一个个对数值（如对数值（如log100log100降低到降低到log10log10）所需的时间。所需的时间。D D值值因因待待灭灭微微生生物物的的种种类类、药药液液的的配配方方及及性性质质、用用作作生生物物指指示示剂剂的的微微生生物物种种类类；微微生生物物所所接接触触的的表表面面的的性性质质、灭菌工序（如温度）等不同而各异。灭菌工序（如温
43、度）等不同而各异。3 3、Z Z值值 灭菌温度升高，速度常数灭菌温度升高，速度常数k k值增大，值增大，D D值减少。在（值减少。在（100100138138）范围内，）范围内，lgDlgD与与T T呈直线关系：呈直线关系：Z=(TZ=(T2 2-T-T1 1)/(lgD)/(lgD2 2-lgD-lgD1 1)即即D D2 2/D/D1 1=10=10(T2-T1)/Z(T2-T1)/Z 当当lgDlgD2 2-lgD-lgD1 11 1时，时，Z ZT T2 2-T-T1 1Z Z值：值：为为D D值降低一个对数值所需升高的温度数，即灭菌时值降低一个对数值所需升高的温度数，即灭菌时间减少到
44、原来的间减少到原来的1/101/10时所需升高的温度或在相同灭菌时间时所需升高的温度或在相同灭菌时间内，杀灭内，杀灭99%99%的微生物所需要提高的温度。的微生物所需要提高的温度。在在不不同同温温度度下下对对特特定定的的微微生生物物在在特特定定介介质质或或环环境境中中求求得得D D值值后后，再再计计算算Z Z值值。Z Z值值通通常常在在湿湿热热灭灭菌菌时时取取1010，在在干干热热灭菌时取灭菌时取2020。4 4、F F值与值与F F0 0值值 F(F(或或F F0 0)值可作用验证灭菌可靠性的参数。值可作用验证灭菌可靠性的参数。(1)(1)F F值值 F F为为在在一一定定温温度度(T)T)
45、，给给定定Z Z值值所所产产生生的的干干热热灭灭菌菌效效果果与与参参比比温温度度(T T0 0)给给定定Z Z值值所所产产生生的的灭灭菌菌效效果果相相同同时时，T T0 0温温度度下下所所相相当当的的时时间间(equivalent equivalent time)time)，以以分分为为单单位位。即即整个灭菌过程的效果相当于整个灭菌过程的效果相当于T T0 0温度下温度下F F时间的灭菌效果。时间的灭菌效果。数学表达式：数学表达式：F=F=t t 1010(T-T0)/Z(T-T0)/Z t t是测量被灭菌物温度的时间间隔，一般为是测量被灭菌物温度的时间间隔，一般为0.5-10.5-1minm
46、in，T T是每个时间间隔是每个时间间隔 t t所测量被灭菌物的温度，所测量被灭菌物的温度，T T0 0是参比是参比温度。温度。干热灭菌中，干热灭菌中，Z Z常取常取2020，T T0 0取取170170。(2)(2)F F0 0值值 F F0 0值值为为在在一一定定灭灭菌菌温温度度(T)T)、Z Z值值为为1010所所产产生生的的湿湿热热灭灭菌菌效效果果与与121121，Z Z值值为为1010所所产产生生的的灭灭菌菌效效果果相相同同时时所相当的时间所相当的时间(min)min)。物理物理F F0 0=t t 1010(T-121)/Z(T-121)/Z 即即F F0 0是将灭菌过程（升温、恒
47、温、冷却）中各种灭菌是将灭菌过程（升温、恒温、冷却）中各种灭菌温度使微生物的致死效力转换为灭菌物品完全暴露于温度使微生物的致死效力转换为灭菌物品完全暴露于121121使微生物致死的效力。使微生物致死的效力。生物生物F F0 0=D=D121121(lgN(lgN0 0-lgN-lgNt t)N Nt t为为灭灭菌菌后后预预计计达达到到的的微微生生物物残残存存数数，即即染染菌菌度度概概率率(probability probability of of nonsterilitynonsterility)，当当N Nt t为为1010-6-6时时(原原有有菌数的百万分之一菌数的百万分之一)，可认为灭菌
48、效果较可靠。，可认为灭菌效果较可靠。F F0 0值值的的计计算算对对于于验验证证灭灭菌菌效效果果极极为为有有用用，当当产产品品以以121121湿湿热热灭灭菌菌时时，灭灭菌菌器器内内的的温温度度虽虽能能迅迅速速升升到到 121121，而而被被灭灭菌菌物物品品内内部部则则不不然然，由由于于包包装装材材料料性性能能及及其其他他因因素素影影响响而而使使升升温温度度各各异异，而而F F0 0将将随随着着产产品品温温度度(T)T)变变化化而而呈呈指指数数的的变变化化，故故温温度度即即使使很很小小的的差差别别(如如0.1-1)0.1-1)将将对对F F0 0 值值产产生生显显著著的的影影响响。同同时时要要求
49、求测测定定灭灭菌菌物物品品内内的的实实际际温温度度，故故用用F F0 0 来来监监测测灭灭菌菌效效果果有有重重要要的的意意义义。由由于于F F0 0 是是将将不不同同灭灭菌菌温温度度折折算算到到相相当当于于 121121湿湿热热灭灭菌菌时时的的效效力力，故故F F0 0值值可可作作为为灭菌过程的比较参数。灭菌过程的比较参数。影响影响F F0 0值的因素：值的因素：容器大小、形状及热的穿透性等。容器大小、形状及热的穿透性等。灭菌产品溶液的性质、填充量等。灭菌产品溶液的性质、填充量等。容器在灭菌器中的数量及分布等。容器在灭菌器中的数量及分布等。测定测定F F0 0值应注意：值应注意：先应选择灵敏度
50、高，重现性好，精密度为先应选择灵敏度高，重现性好，精密度为0.10.1的热电的热电偶，并对热电偶进行校验。偶，并对热电偶进行校验。灭灭菌菌时时应应将将热热电电偶偶的的探探针针置置于于被被测测物物的的内内部部，经经灭灭菌菌器器通通向向柜柜外外的的湿湿度度记记录录仪仪，有有些些灭灭菌菌记记录录仪仪附附有有F F0 0计计算器，在灭菌过程中和灭菌后，自动显示算器，在灭菌过程中和灭菌后，自动显示F F0 0值。值。为了确保灭菌效果，还应注意两个问题：为了确保灭菌效果，还应注意两个问题：根根据据F F0 0 =D=D121121(logNo-logNt)(logNo-logNt)，若若N N越越大大，即