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1、LOGO微生物培养基的配制微生物培养基的配制v一、培养基一、培养基v二、培养基配制原则二、培养基配制原则v三、培养基的种类三、培养基的种类v四、培养基配制的一般程序四、培养基配制的一般程序LOGO一、培养基：一、培养基：v为人工培养微生物而制备的、提供适合微生为人工培养微生物而制备的、提供适合微生物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。物生长、繁殖或积累代谢产物的营养基质。LOGO二、培养基配制原则：二、培养基配制原则：v（1）目的要明确：根据微生物的种类、培养）目的要明确：根据微生物的种类、培养目的等确定配制培养基的种类，因为不同的目的等确定配制培养基的种类，因为不同的微生物对培养物质的需求不
2、同。微生物对培养物质的需求不同。v（2）营养要协调：注意各种营养物质的浓）营养要协调：注意各种营养物质的浓度和比例。度和比例。v（3）pH要适宜：各种微生物适宜生长的要适宜：各种微生物适宜生长的pH范围不同。范围不同。v 细菌细菌pH为：；为：；v 放线菌放线菌pH为：；为：；v 真菌真菌pH为：。为：。LOGOv 微生物正常代谢过程中微生物正常代谢过程中pH会不会改变？会不会改变？v 如何维持培养基中如何维持培养基中pH的相对恒定？的相对恒定？v微生物在生长代谢过程中，由于营养物质的微生物在生长代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成，往往会改变环境中利用和代谢产物的形成，往往会改变环
3、境中的的pH。v可在培养基中加入可在培养基中加入缓冲剂缓冲剂，最常用的缓冲剂，最常用的缓冲剂是是KHPO4/KH2PO4LOGO三、培养基的种类三、培养基的种类v据组成成分可分为:1.合成培养基：合成培养基：由各种纯化学物质按一定比例配制而成。v2.半合成培养基：半合成培养基：有一部分纯化学物质和另一部分天然物质配制而成。3.天然培养基：天然培养基：利用天然来源的有机物配制而成。v从培养基的物理状态可分为 1.液体培养基：液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。2.固体培养基：固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基或农副产品培养基。3.半固体培养基：半固体培养基：在液
4、体培养基中加入0.20.5%凝固剂而成的半固体状培养基。LOGOv天然培养基是用化学成分并不十分清楚或化学成分不恒定的天然有机物质配制而成培养基。常用的有机物有牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、麦芽汁、豆芽汁、玉米粉、麸皮、牛奶、血清等。如实验室常用于培养细菌的牛肉膏蛋白胨培养基，及培养酵母菌的麦芽汁培养基等就属于此类培养基。LOGO按用途不同分为：按用途不同分为：v1基础培养基基础培养基:含有一般细菌生长繁殖需要的基本的营养物质。最常用的基础培养基是上面提及的天然培养基中的牛肉膏蛋白胨培牛肉膏蛋白胨培养基。养基。v2营养培养基（加富培养基）营养培养基（加富培养基）:在基础培养基中加入某些特殊营养物质，
5、如血液、血清、血液、血清、酵母浸膏或生长因子酵母浸膏或生长因子等。用以培养对营养要求高的微生物，如培养百日咳杆菌需要含有血液的培养基。在研究致病微生物致病微生物时常采用加富培养基。LOGOv3鉴别培养基鉴别培养基:是一类含有某种特定化合物或试剂的培养基。主要用于不同类型微生物的快速鉴定，如糖发酵管管。v4选择培养基选择培养基:利用微生物对某种或某些化学物质的敏感性不同，在培养基中加入这类物质，抑制不需要的微生物生长，而利于所需分离的微生物生长，从而达到分离或鉴别某种微生物的目的，如分离真菌的马丁氏培马丁氏培养基养基。LOGO 选择培养基选择培养基v加入青霉素的培养基：v 分离酵母菌、霉菌等真菌
6、分离酵母菌、霉菌等真菌v加入高浓度食盐的培养基：v 分离金黄色葡萄球菌分离金黄色葡萄球菌v不加氮源的无氮培养基：v 分离固氮菌分离固氮菌v不加含碳有机物的无碳培养基：v 分离自养型微生物分离自养型微生物v加入青霉素等抗生素的培养基：v 分离导入的目的基因的受体细胞分离导入的目的基因的受体细胞v加入氨基嘌呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基：v 分离杂交瘤细胞分离杂交瘤细胞LOGO四、培养基配制的一般程序四、培养基配制的一般程序v称量：称量：按照配方正确称取各种原料放于搪瓷杯中。v溶化：溶化：在搪瓷杯中加入所需水量，玻棒搅匀，加热溶解。v调调pH值：值：用1N NaOH或1N HCl调pH，用pH
7、试纸对照。v加琼脂溶化加琼脂溶化：加热过程中要不断搅拌，可适当补水。v过滤过滤v分装：分装：注意不要污染棉塞。v包扎成捆包扎成捆，挂上标签（必须用铅笔写），注明何种培养基。v灭菌灭菌v摆斜面摆斜面v检查：检查：培养基灭菌后必须在370C下恒温培养24h，确定无菌生长，方可使用。按培养基按培养基配方称量配方称量加水加加水加热熔化热熔化调节调节pH值值过滤过滤分装分装包装包装灭菌灭菌检查灭菌检查灭菌彻底与否彻底与否LOGOv牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（用于分离和培养细菌，是一种天牛肉膏蛋白胨琼脂培养基（用于分离和培养细菌，是一种天然培养基）然培养基）属基础培养基属基础培养基v营养琼脂培养基是营养琼脂培
8、养基是天然培养基，属基础培养基天然培养基，属基础培养基v马铃薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）琼脂培养基（用于分马铃薯（或豆芽汁）蔗糖（或葡萄糖）琼脂培养基（用于分离和培养真菌之用，是一种离和培养真菌之用，是一种半合成培养基半合成培养基）选选择性合成培养择性合成培养基。基。v淀粉琼脂培养基（高氏一号淀粉琼脂培养基（高氏一号Gause1），用于分离和培养放），用于分离和培养放线菌，是一种线菌，是一种合成培养基合成培养基。用于放线菌培养。选用于放线菌培养。选择性合成培择性合成培养基。养基。v伊红美兰培养基（伊红美兰培养基（EMB培养基培养基）用于分离和）用于分离和鉴别鉴别大肠菌群。大肠菌群。v用于分离
9、、培养土壤真菌的用于分离、培养土壤真菌的马丁氏培养基马丁氏培养基：属选：属选择性合成培择性合成培养基。养基。v乳糖胆盐发酵管用于分离和培养大肠菌群属乳糖胆盐发酵管用于分离和培养大肠菌群属选择性培养基选择性培养基LOGOv牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏蛋白胨培养基（用于用于细菌细菌培养培养）v高氏高氏1号培养基号培养基(用于用于放线菌放线菌培养培养)v马丁氏（马丁氏（Martin）培养基（）培养基（用于从土壤中分离用于从土壤中分离真菌真菌）v马铃薯培养基马铃薯培养基(PDA)(用于用于霉菌或酵母菌霉菌或酵母菌培养培养)v察氏培养基察氏培养基(蔗糖硝酸钠培养基蔗糖硝酸钠培养基)(用于用于霉菌霉菌培养培
10、养)v葡萄糖蛋白胨水培养基葡萄糖蛋白胨水培养基(用于用于甲基红甲基红试验试验)v蛋白胨水培养基蛋白胨水培养基(用于用于吲哚吲哚试验试验)v糖发酵培养基糖发酵培养基(用于细菌用于细菌糖发酵糖发酵试验试验)v乳酸菌培养基乳酸菌培养基(用于用于乳酸乳酸发酵发酵)LOGOv酒精发酵培养基酒精发酵培养基(用于用于酒精酒精发酵发酵)v乳糖蛋白胨半固体培养基乳糖蛋白胨半固体培养基(用于水体中用于水体中大肠菌群大肠菌群测定测定)v乳糖蛋白胨培养液乳糖蛋白胨培养液(用于多管发酵法检测水体中用于多管发酵法检测水体中大肠大肠菌群菌群)v三倍浓乳糖蛋白胨培养液三倍浓乳糖蛋白胨培养液(用于水体中用于水体中大肠菌群大肠菌群测定测定)v伊红美蓝培养基伊红美蓝培养基(EMB培养基培养基)(用于水体中用于水体中大肠菌群大肠菌群测定和细菌转导测定和细菌转导)v加倍肉汤培养基加倍肉汤培养基(用于用于细菌转导细菌转导)