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1、分解纤维素的微生物的分分解纤维素的微生物的分离离pptppt课件课件(自制自制)一一.基础知识基础知识.纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶1.1.纤维素纤维素 纤维素是一种由纤维素是一种由葡萄糖葡萄糖首尾相连而成首尾相连而成的的高分子高分子化合物，是含量最丰富的化合物，是含量最丰富的多糖多糖类物质。类物质。思考：纤维素是地球上含量最丰富的思考：纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，植物每年产生的纤维素多糖类物质，植物每年产生的纤维素超过超过7070亿吨，但却不会在地球上大量亿吨，但却不会在地球上大量的积累，为什么？的积累，为什么？纤维素能被土壤中某些微生物分解纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，
2、这是因为它们能够产生利用，这是因为它们能够产生纤维素酶纤维素酶。棉花棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。是自然界中纤维素含量最高的天然产物。2.2.纤维素酶纤维素酶 纤维素酶是一种纤维素酶是一种复合酶复合酶，一般认为它，一般认为它至少包括三种组分至少包括三种组分，即，即C C1 1酶酶(外切酶外切酶)、C CX X酶酶(内切酶内切酶)和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶，前两种酶使纤，前两种酶使纤维素分解成维素分解成纤维二糖纤维二糖，第三种酶将，第三种酶将纤维二纤维二糖糖分解成分解成葡萄糖葡萄糖。纤维二糖纤维二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纤维素纤维素一一.基础知识
3、基础知识.纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶 能分解纤维素的微生物，有各种细能分解纤维素的微生物，有各种细菌、真菌和少数放线菌。菌、真菌和少数放线菌。一一.基础知识基础知识.纤维素与纤维素酶纤维素与纤维素酶3.3.纤维素的分解：纤维素的分解：一一.基础知识基础知识.纤维素分解细菌的筛选纤维素分解细菌的筛选：1.1.方法：方法：刚果红染色法。刚果红染色法。刚果红刚果红可以与可以与纤维素纤维素形成形成红色复合物红色复合物，当纤维素被当纤维素被纤维素酶纤维素酶分解后，红色复合分解后，红色复合物无法形成，物无法形成，出现以出现以纤维素分解菌纤维素分解菌为中为中心的心的透明圈透明圈，我们可以通过，我们可以
4、通过是否产生透是否产生透明圈明圈来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。2.2.原理：原理：一一.基础知识基础知识.纤维素分解细菌的筛选纤维素分解细菌的筛选：该方法可以通过该方法可以通过颜色颜色反应反应直接直接筛选。筛选。一一.基础知识基础知识.纤维素分解细菌的筛选纤维素分解细菌的筛选：3.3.优点：优点：二二.实验设计与操作实验设计与操作.实验设计：实验设计：土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培纤维素分解菌的培养基上养基上挑选产生透明圈挑选产生透明圈的菌落的菌落分布环境分布环境1 1、土壤取样：、土壤取样：富含纤维素的环境中富含纤维
5、素的环境中操作步骤操作步骤由于由于生物适应一定的环境，环境对生物有选生物适应一定的环境，环境对生物有选择作用择作用，在富含纤维素的环境中，纤维素分，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。得目的微生物的几率要高于普通环境。原因原因实例：树林中多年落叶形成的腐殖实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。土，多年积累的枯枝败叶等。讨论讨论:如果找不到合适的环境，可以将滤如果找不到合适的环境，可以将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸
6、应该埋在土壤中多深？作用？你认为滤纸应该埋在土壤中多深？答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分答：将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是解菌相对集中，实际上是人工设置纤人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境维素分解菌生存的适宜环境。一般应。一般应将滤纸埋于深约将滤纸埋于深约10cm10cm左右左右的土壤中。的土壤中。2 2、选择培养、选择培养 增加增加纤维素分解菌的纤维素分解菌的浓度浓度，以，以确保确保能够能够从样品中从样品中分离所需要的微生物分离所需要的微生物。目的：目的：阅读书本阅读书本P29 P29 纤维素分解菌的选择培养基纤维素分解菌的选择培养基配方，回答问题。配方，回答问题。答：用
7、答：用牛肉膏蛋白胨培养基牛肉膏蛋白胨培养基与之对照。或与之对照。或者将者将纤维素改为葡萄糖纤维素改为葡萄糖。2 2、选择培养、选择培养制备选择培养基：制备选择培养基：A A A A、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？、旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？答：是答：是液体液体培养基，原因是配方中培养基，原因是配方中无凝固剂无凝固剂（琼脂）（琼脂）B B B B、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，、这个培养基对微生
8、物是否具有选择作用？如果具有，、这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？是如何进行选择的？是如何进行选择的？是如何进行选择的？答：有选择作用，本配方中以答：有选择作用，本配方中以纤维素作为纤维素作为唯一碳源唯一碳源，只有能分解纤维素的微生物可以，只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。大量繁殖。C C C C、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用、你能否设计一个对照实验，说明选择培养基的作用 称取土样称取土样20 g20 g，在，在无菌条件无菌条件下加入装下加入装有有30
9、mL30 mL培养基的摇瓶中。将摇瓶置于培养基的摇瓶中。将摇瓶置于摇床摇床上，在上，在30 30 下振荡培养下振荡培养1 12 d2 d，至至培养基变混浊培养基变混浊。吸取一定的培养液。吸取一定的培养液（约（约5 mL5 mL），转移至另一瓶新鲜的），转移至另一瓶新鲜的选择选择培养基培养基中，以同样的方法培养到中，以同样的方法培养到培养液培养液变浑浊变浑浊。操作：操作：2 2、选择培养、选择培养提示：在选择培养的条件下，可以使那提示：在选择培养的条件下，可以使那些能够些能够适应适应这种营养条件的微生物得到这种营养条件的微生物得到迅速繁殖迅速繁殖，而那些，而那些不适应不适应这种营养条件这种营养条
10、件的微生物的繁殖被的微生物的繁殖被抑制抑制，因此可以起到，因此可以起到“浓缩浓缩”的作用。的作用。旁栏思考题旁栏思考题为什么选择培养能够为什么选择培养能够“浓缩浓缩”所需的微生物？所需的微生物？按照课题按照课题1 1的稀释操作方法，将选的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释择培养后的培养基进行等比稀释10101 110107 7倍。倍。3.3.梯度稀释梯度稀释4.4.将样品涂布到将样品涂布到鉴别纤维素分解菌鉴别纤维素分解菌的培养的培养基上基上制备鉴别培养基制备鉴别培养基:配方见书本配方见书本2929页。操作过程见课题页。操作过程见课题1 1（2 2）涂布平板：将稀释度为）涂布平板：将
11、稀释度为10104 410106 6的菌悬的菌悬液各取液各取0.1ml0.1ml涂布到平板培养基上，涂布到平板培养基上，3030倒置倒置培养。培养。5.5.刚果红染色法刚果红染色法方法一：先方法一：先 ，再加入刚果红进，再加入刚果红进行颜色反应。行颜色反应。方法二：在方法二：在 时就加入刚果红。时就加入刚果红。培养微生物培养微生物倒平板倒平板旁栏思考题旁栏思考题这两种方法各有哪些优点这两种方法各有哪些优点与不足？与不足？染色法染色法染色法染色法优点优点优点优点缺点缺点缺点缺点方法一方法一方法一方法一方法二方法二方法二方法二颜色反应基本颜色反应基本上是纤维素分上是纤维素分解菌的作用解菌的作用操作
12、繁琐操作繁琐刚果红会使菌落之间发生刚果红会使菌落之间发生混杂混杂操作简便不操作简便不存在菌落混存在菌落混杂问题杂问题1.1.产生淀粉酶的微生物也产生淀粉酶的微生物也产生模糊透明圈产生模糊透明圈2.2.有些微生物能降解色素，有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。形成明显的透明圈。在在产生明显的透明圈产生明显的透明圈的菌落，挑取的菌落，挑取并接种到纤维素分解菌的选择培养并接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在基上，在30300 0C C 37370 0C C培养，可获得培养，可获得纯化培养纯化培养。6 6、纯化培养、纯化培养提示：课题提示：课题2 2是将土样制成的菌悬液是将土样制成的菌悬液直直接涂
13、布在以尿素为惟一氮源的选择性培接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上养基上，直接分离得到菌落。，直接分离得到菌落。本课题先通过本课题先通过选择培养选择培养，使纤维素分解，使纤维素分解菌得到增殖后，再将菌液涂布在菌得到增殖后，再将菌液涂布在鉴别培鉴别培养基养基上。其他步骤基本一致。上。其他步骤基本一致。旁栏思考题旁栏思考题本实验的流程与课题本实验的流程与课题2 2中的中的实验流程有哪些异同？实验流程有哪些异同？.操作过程：操作过程：1.1.土壤取样：土壤取样：采集土样时，应选择富含纤维素的环境。若找不采集土样时，应选择富含纤维素的环境。若找不采集土样时，应选择富含纤维素的环境。若找不采集土样时
14、，应选择富含纤维素的环境。若找不到合适环境，可将滤纸埋在土壤中一个月左右，也会到合适环境，可将滤纸埋在土壤中一个月左右，也会到合适环境，可将滤纸埋在土壤中一个月左右，也会到合适环境，可将滤纸埋在土壤中一个月左右，也会有能分解纤维素的微生物生长。有能分解纤维素的微生物生长。有能分解纤维素的微生物生长。有能分解纤维素的微生物生长。旁栏思考题旁栏思考题旁栏思考题旁栏思考题为什么要在富含纤维素的环境中寻找为什么要在富含纤维素的环境中寻找为什么要在富含纤维素的环境中寻找为什么要在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌？纤维素分解菌？纤维素分解菌？纤维素分解菌？答：答：答：答：生物适应一定环境，环境对生物具有
15、选择作用，生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌的含量只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌的含量只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌的含量只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌的含量才会高于其它普通环境，从而提高获得目的微生物的才会高于其它普通环境，从而提高获得目的微生物的才会高于其它普通环境，从而提高获得目的微生物的才会高于其它普通环境，从而提高获得目的微生物的几率。几率。几率。几率。旁栏思考题旁栏思考题旁栏思考题旁栏思考题将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认
16、将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应该埋进土壤多深？为滤纸应该埋进土壤多深？为滤纸应该埋进土壤多深？为滤纸应该埋进土壤多深？答：答：答：答：人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。人工设置适宜环境，使纤维素分解菌相对聚集。将纸埋于深约将纸埋于深约将纸埋于深约将纸埋于深约10cm10cm10cm10cm的腐殖土壤中。的腐殖土壤中。的腐殖土壤中。的腐殖土壤中。2.2.选择培养选择培养.选择培养的目的：选择培养的目的：选择培养的目的：选择培养的目的
17、：增加增加增加增加纤维素分解菌的浓度纤维素分解菌的浓度纤维素分解菌的浓度纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中，以确保能够从样品中，以确保能够从样品中，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。分离到所需要的微生物。分离到所需要的微生物。分离到所需要的微生物。选择培养：选择培养：将土样加入装有将土样加入装有30ml30ml选择培养基的锥形瓶选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下震荡培养荡培养1 12 2天，直至培养液变浑浊。天，直至培养液变浑浊。也可重复也可重复选择培养。选择培养。课题成果评价课题成果评价（一）培养基的制作是否合格以及选择
18、培养基是（一）培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落：否筛选出菌落：对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，明培养基制作合格。如果观察到产生透明圈的菌落，则说明可能获得了分解纤维素的微生物则说明可能获得了分解纤维素的微生物（二）分离的结果是否一致：（二）分离的结果是否一致：由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量，因此最容易分离得到的是细菌。但由于所的数量，因此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同，学生也可能得到真菌和放线菌取土样的环境不
19、同，学生也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。等不同的分离结果。1.培养流感病毒时，应选用培养流感病毒时，应选用()A固体培养基固体培养基B含有多种无机盐的培养液含有多种无机盐的培养液C活的鸡胚活的鸡胚D无菌的牛肉汤无菌的牛肉汤2微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过微生物（除病毒外）需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说代谢来维持正常的生长和繁殖。下列有关微生物营养的说法正确的是法正确的是()A乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的B微生物生长中不可缺少的一些微量的无机物称为生长微生物生长中不可缺少的
20、一些微量的无机物称为生长因子因子C培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利培养基中的营养物质浓度越高对微生物的增殖越有利D生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合生长因子一般是酶或核酸的组成成分，微生物本身合成这些生长因子的能力往往不足成这些生长因子的能力往往不足CD3在接种操作的过程中，不正确的是在接种操作的过程中，不正确的是()A要将接种环灼烧灭菌要将接种环灼烧灭菌B取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌取下棉塞后要将试管口灼烧灭菌C将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位将接种环伸入试管内，先接触长菌多的部位D接种后还要将管口灭菌加塞接种后还要将管口灭菌加塞4高压蒸气灭菌的原理是高压蒸气
21、灭菌的原理是()A高压使细菌高压使细菌DNA变性变性B高压使细菌蛋白质凝固变性高压使细菌蛋白质凝固变性C高温烫死细菌高温烫死细菌D高温使细菌高温使细菌DNA变性变性CB5在在105稀释度下，平板上生长的平均菌落数为稀释度下，平板上生长的平均菌落数为50则每克则每克样品中的菌落数是样品中的菌落数是()A5107B50C5108D5036下列属于菌落特征的是下列属于菌落特征的是()菌落的形状菌落的形状菌落的大小菌落的大小菌落的多少菌落的多少隆起程度隆起程度颜色颜色有无荚膜有无荚膜ABCD7能排除培养基是否有杂菌污染的方法是能排除培养基是否有杂菌污染的方法是()A将未接种的培养基放在实验桌上培养将未
22、接种的培养基放在实验桌上培养B将未接种的培养基放在窗台上培养将未接种的培养基放在窗台上培养C将未接种的培养基放在恒温箱中培养将未接种的培养基放在恒温箱中培养D将已接种的培养基放在恒温箱中培养将已接种的培养基放在恒温箱中培养ABC8 8、(20(20分分分分)某化工厂的污水池中，某化工厂的污水池中，某化工厂的污水池中，某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的含有一种有害的、难于降解的含有一种有害的、难于降解的含有一种有害的、难于降解的有机化合物有机化合物有机化合物有机化合物A A。研究人员用化。研究人员用化。研究人员用化。研究人员用化合物合物合物合物A A、磷酸盐、镁盐以及微、磷酸盐、镁盐
23、以及微、磷酸盐、镁盐以及微、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地量元素配制的培养基，成功地量元素配制的培养基，成功地量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物筛选到能高效降解化合物筛选到能高效降解化合物筛选到能高效降解化合物A A的的的的细菌细菌细菌细菌(目的菌目的菌目的菌目的菌)。实验的主要步。实验的主要步。实验的主要步。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题：骤如图所示。请分析回答问题：骤如图所示。请分析回答问题：骤如图所示。请分析回答问题：(1)培养基中加入化合物培养基中加入化合物A的目的是筛选的目的是筛选，这种培养基属于，这种培养基属于培养基。培养基。目的菌目的菌目的菌目
24、的菌 选择性选择性选择性选择性 某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化合物合物合物合物A A。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物A A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物高效降解化合物高效降解化合物高效降解
25、化合物A A的细菌的细菌的细菌的细菌(目的目的目的目的菌菌菌菌)。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题：（北京示。请分析回答问题：（北京示。请分析回答问题：（北京示。请分析回答问题：（北京卷）卷）卷）卷）(2)“目的菌目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的养基中的，实验需要振荡培养，由此，实验需要振荡培养，由此推测推测“目的菌目的菌”的代谢类型是的代谢类型是。化合物化合物A异养需氧异养需氧某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一种
26、有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化合物合物合物合物A A。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物A A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物高效降解化合物高效降解化合物高效降解化合物A A的细菌的细菌的细菌的细菌(目的目的目的目的菌菌菌菌)。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的
27、主要步骤如图所示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：(3)培养若干天后，应选择培养瓶中化培养若干天后，应选择培养瓶中化合物合物A含量含量的培养液，接入新的培养液，接入新的培养液中连续培养，使的培养液中连续培养，使“目的菌目的菌”的的数量数量。减少减少 增加增加 某化工厂的污水池中，含有某化工厂的污水池中，含有某化工厂的污水池中，含有某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有一种有害的、难于降解的有一种有害的、难于降解的有一种有害的、难于降解的有机化合物机化合物机化合物机化合物A A。研究人员用化。研究人员用化。研究人员用化。研究人员用化合物合物合
28、物合物A A、磷酸盐、镁盐以及、磷酸盐、镁盐以及、磷酸盐、镁盐以及、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成微量元素配制的培养基，成微量元素配制的培养基，成微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合功地筛选到能高效降解化合功地筛选到能高效降解化合功地筛选到能高效降解化合物物物物A A的细菌的细菌的细菌的细菌(目的菌目的菌目的菌目的菌)。实验的。实验的。实验的。实验的主要步骤如图所示。请分析主要步骤如图所示。请分析主要步骤如图所示。请分析主要步骤如图所示。请分析回答问题：回答问题：回答问题：回答问题：(4)转为固体培养时，常采用转为固体培养时，常采用方方法接种，获得单菌落后继续筛选。法接种
29、，获得单菌落后继续筛选。划线划线某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化合物合物合物合物A A。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物A A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物高效降解化合物高效降解化合物高效降解
30、化合物A A的细菌的细菌的细菌的细菌(目的目的目的目的菌菌菌菌)。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：(5)若研究若研究“目的菌目的菌”的生长规律，将单个菌的生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用的方法进行计数，落进行液体培养，可采用的方法进行计数，以时间为横坐标，以以时间为横坐标，以为纵为纵坐标，绘制生长曲线。坐标，绘制生长曲线。细菌数目的对数细菌数目的对数某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一某化工厂的污水池中，含有一种
31、有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化种有害的、难于降解的有机化合物合物合物合物A A。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物。研究人员用化合物A A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物高效降解化合物高效降解化合物高效降解化合物A A的细菌的细菌的细菌的细菌(目的目的目的目的菌菌菌菌)。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的主要步骤如图所。实验的
32、主要步骤如图所示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：示。请分析回答问题：(6)实验结束后，使用过的培养基应该实验结束后，使用过的培养基应该进行进行处理后，才能倒掉。处理后，才能倒掉。灭菌灭菌v根据根据用途用途分分选择培养基选择培养基在培养基中加入某种化学物在培养基中加入某种化学物质质,以抑制不需要的微生物的生长以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要促进所需要的微生物的生长的微生物的生长鉴别培养基鉴别培养基在培养基中加入某种指示剂在培养基中加入某种指示剂或化学药品或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物。用以鉴别不同种类的微生物。例如：伊红和美蓝例如：伊红和美蓝,和大肠杆菌的代
33、谢产物结合和大肠杆菌的代谢产物结合,使菌落呈黑色（老教材说法：深紫色使菌落呈黑色（老教材说法：深紫色,带有金带有金属光泽）属光泽）,鉴别大肠杆菌鉴别大肠杆菌 85.每一年，我都更加相信生命的浪费是在于：我们没有献出爱，我们没有使用力量，我们表现出自私的谨慎，不去冒险，避开痛苦，也失去了快乐。约翰B塔布 86.微笑，昂首阔步，作深呼吸，嘴里哼着歌儿。倘使你不会唱歌，吹吹口哨或用鼻子哼一哼也可。如此一来，你想让自己烦恼都不可能。戴尔卡内基 87.当一切毫无希望时，我看着切石工人在他的石头上，敲击了上百次，而不见任何裂痕出现。但在第一百零一次时，石头被劈成两半。我体会到，并非那一击，而是前面的敲打使
34、它裂开。贾柯瑞斯 88.每个意念都是一场祈祷。詹姆士雷德非 89.虚荣心很难说是一种恶行，然而一切恶行都围绕虚荣心而生，都不过是满足虚荣心的手段。柏格森 90.习惯正一天天地把我们的生命变成某种定型的化石，我们的心灵正在失去自由，成为平静而没有激情的时间之流的奴隶。托尔斯泰 91.要及时把握梦想，因为梦想一死，生命就如一只羽翼受创的小鸟，无法飞翔。兰斯顿休斯 92.生活的艺术较像角力的艺术，而较不像跳舞的艺术；最重要的是：站稳脚步，为无法预见的攻击做准备。玛科斯奥雷利阿斯 93.在安详静谧的大自然里，确实还有些使人烦恼.怀疑.感到压迫的事。请你看看蔚蓝的天空和闪烁的星星吧!你的心将会平静下来。
35、约翰纳森爱德瓦兹 94.对一个适度工作的人而言，快乐来自于工作，有如花朵结果前拥有彩色的花瓣。约翰拉斯金 95.没有比时间更容易浪费的,同时没有比时间更珍贵的了，因为没有时间我们几乎无法做任何事。威廉班 96.人生真正的欢欣，就是在于你自认正在为一个伟大目标运用自己；而不是源于独自发光.自私渺小的忧烦躯壳，只知抱怨世界无法带给你快乐。萧伯纳 97.有三个人是我的朋友爱我的人.恨我的人.以及对我冷漠的人。爱我的人教我温柔；恨我的人教我谨慎；对我冷漠的人教我自立。JE丁格 98.过去的事已经一去不复返。聪明的人是考虑现在和未来，根本无暇去想过去的事。英国哲学家培根 99.真正的发现之旅不只是为了寻
36、找全新的景色，也为了拥有全新的眼光。马塞尔普劳斯特 100.这个世界总是充满美好的事物，然而能看到这些美好事物的人，事实上是少之又少。罗丹 101.称赞不但对人的感情，而且对人的理智也发生巨大的作用，在这种令人愉快的影响之下，我觉得更加聪明了，各种想法，以异常的速度接连涌入我的脑际。托尔斯泰 102.人生过程的景观一直在变化，向前跨进，就看到与初始不同的景观，再上前去，又是另一番新的气候。叔本华 103.为何我们如此汲汲于名利，如果一个人和他的同伴保持不一样的速度，或许他耳中听到的是不同的旋律，让他随他所听到的旋律走，无论快慢或远近。梭罗 104.我们最容易不吝惜的是时间，而我们应该最担心的也
37、是时间；因为没有时间的话，我们在世界上什么也不能做。威廉彭 105.人类的悲剧，就是想延长自己的寿命。我们往往只憧憬地平线那端的神奇【违禁词，被屏蔽】，而忘了去欣赏今天窗外正在盛开的玫瑰花。戴尔卡内基 106.休息并非无所事事，夏日炎炎时躺在树底下的草地，听着潺潺的水声，看着飘过的白云，亦非浪费时间。约翰罗伯克 107.没有人会只因年龄而衰老，我们是因放弃我们的理想而衰老。年龄会使皮肤老化，而放弃热情却会使灵魂老化。撒母耳厄尔曼 108.快乐和智能的区别在于：自认最快乐的人实际上就是最快乐的，但自认为最明智的人一般而言却是最愚蠢的。卡雷贝C科尔顿 109.每个人皆有连自己都不清楚的潜在能力。无
38、论是谁，在千钧一发之际，往往能轻易解决从前认为极不可能解决的事。戴尔卡内基 110.每天安静地坐十五分钟倾听你的气息，感觉它，感觉你自己，并且试着什么都不想。艾瑞克佛洛姆 111.你知道何谓沮丧-就是你用一辈子工夫，在公司或任何领域里往上攀爬，却在抵达最高处的同时，发现自己爬错了墙头。坎伯 112.伟大这个名词未必非出现在规模很大的事情不可；生活中微小之处，照样可以伟大。布鲁克斯 113.人生的目的有二：先是获得你想要的；然后是享受你所获得的。只有最明智的人类做到第二点。罗根皮沙尔史密斯 114.要经常听.时常想.时时学习，才是真正的生活方式。对任何事既不抱希望，也不肯学习的人，没有生存的资格
39、。阿萨赫尔帕斯爵士 115.旅行的精神在于其自由，完全能够随心所欲地去思考.去感觉.去行动的自由。威廉海兹利特 116.昨天是张退票的支票，明天是张信用卡，只有今天才是现金；要善加利用。凯里昂 117.所有的财富都是建立在健康之上。浪费金钱是愚蠢的事，浪费健康则是二级的谋杀罪。BC福比斯 118.明知不可而为之的干劲可能会加速走向油尽灯枯的境地，努力挑战自己的极限固然是令人激奋的经验，但适度的休息绝不可少，否则迟早会崩溃。迈可汉默 119.进步不是一条笔直的过程，而是螺旋形的路径，时而前进，时而折回，停滞后又前进，有失有得，有付出也有收获。奥古斯汀 120.无论那个时代，能量之所以能够带来奇迹
40、，主要源于一股活力，而活力的核心元素乃是意志。无论何处，活力皆是所谓“人格力量”的原动力，也是让一切伟大行动得以持续的力量。史迈尔斯 121.有两种人是没有什么价值可言的：一种人无法做被吩咐去做的事，另一种人只能做被吩咐去做的事。CHK寇蒂斯 122.对于不会利用机会的人而言，机会就像波浪般奔向茫茫的大海，或是成为不会孵化的蛋。乔治桑 123.未来不是固定在那里等你趋近的，而是要靠你创造。未来的路不会静待被发现，而是需要开拓，开路的过程，便同时改变了你和未来。约翰夏尔 124.一个人的年纪就像他的鞋子的大小那样不重要。如果他对生活的兴趣不受到伤害，如果他很慈悲，如果时间使他成熟而没有了偏见。道格拉斯米尔多 125.大凡宇宙万物，都存在着正、反两面，所以要养成由后面.里面，甚至是由相反的一面，来观看事物的态度。老子 126.在寒冷中颤抖过的人倍觉太阳的温暖，经历过各种人生烦恼的人，才懂得生命的珍贵。怀特曼 127.一般的伟人总是让身边的人感到渺小；但真正的伟人却能让身边的人认为自己很伟大。G.K.Chesteron 128.医生知道的事如此的少，他们的收费却是如此的高。马克吐温 129.问题不在于：一个人能够轻蔑、藐视或批评什么，而是在于：他能够喜爱、看重以及欣赏什么。约翰鲁斯金 结束结束