分解纤维素的微生物的分离ppt课件.ppt

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1、眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观一、基础知识一、基础知识 眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观 纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质,植物每年产生的纤维素超过植物每年产生的纤维素超过7070

2、亿吨亿吨,其中,其中40%-40%-60%60%能被土壤中能产生纤维素酶的微生物所利用,能被土壤中能产生纤维素酶的微生物所利用,不会大量积累。不会大量积累。 在草食性动物等的消化道内,也在草食性动物等的消化道内,也共生有共生有分解纤维素的微生物分解纤维素的微生物,其原理也是产生纤维,其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素,而人没有分解纤维素的素酶而分解纤维素,而人没有分解纤维素的能力。能力。眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观纤维二糖纤维二糖C C1 1酶、酶、CxCx酶酶葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶葡萄糖葡萄糖纤维素纤维素眼睛是心

3、灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观取二支取二支20mL20mL的试管的试管实验:纤维素酶分解纤维素的实验实验:纤维素酶分解纤维素的实验各加入一张滤纸条各加入一张滤纸条各加入各加入pH4.8pH4.8,物质量为,物质量为0.1mol/L0.1mol/L的醋酸醋酸钠缓冲液的醋酸醋酸钠缓冲液11ml11ml和和10ml10ml甲甲 乙乙在乙试管中加入在乙试管中加入1mL1mL纤维素酶纤维素酶两支试管固定在锥形瓶中,放在两支试管固定在锥形瓶中,放在140r/min140r/min的摇床上振荡的摇床上振荡1h1h结果:乙试管的滤纸条消失

4、结果:乙试管的滤纸条消失 讨论讨论:乙试管的滤纸条为什么会消失?甲试管的作用是:乙试管的滤纸条为什么会消失?甲试管的作用是什么?什么?眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观提示:提示: 本实验的本实验的自变量是纤维素酶的有无自变量是纤维素酶的有无,自变量的操纵方法是:在一支试管中添加自变量的操纵方法是:在一支试管中添加适量(适量(1mL1mL)的纤维素酶溶液,在另一支)的纤维素酶溶液,在另一支试管不添加纤维素酶,但需加入试管不添加纤维素酶,但需加入等量的缓等量的缓冲液冲液,不能加入蒸馏水,否则会影响溶液,不能加入蒸馏水,否

5、则会影响溶液的的pHpH。实验分析:实验分析:P P2727的小实验是如何构成对照的小实验是如何构成对照的?的?眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观(二)纤维素分解菌的筛选(二)纤维素分解菌的筛选1、筛选纤维素分解菌的方法是、筛选纤维素分解菌的方法是_。该方法可以通。该方法可以通过过_反应直接筛选。反应直接筛选。刚果红染色法刚果红染色法颜色颜色眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观2、其原理是:刚果红可以与纤维、其原理是:刚果红可以与纤维素形成素形成

6、_,当纤维素被,当纤维素被_分解后,红色复合物无分解后,红色复合物无法形成,出现以法形成,出现以_为为中心的中心的_,我们可以通过,我们可以通过_来筛选纤维素分解菌。来筛选纤维素分解菌。红色复合物红色复合物纤维素酶纤维素酶纤维素分解菌纤维素分解菌 透明圈透明圈是否产生透明圈是否产生透明圈眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观练一练:练一练:1.1.下列关于纤维素酶的说法,错误的是下列关于纤维素酶的说法,错误的是A.

7、 纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种纤维素酶是一种复合酶,至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌,下列说法错误的是菌,下列说法错误的是A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖形成红色复合物刚果

8、红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈,则说明已筛若培养基上产生了透明圈,则说明已筛选出了纤维素分解菌选出了纤维素分解菌眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观二、实二、实 验验 设设 计计 请你根据实验流程图和提供的三个资料以及请你根据实验流程图和提供的三个资料以及“操作操作提示提示”,在思考有关问题的基础上,设计出一个详细的,在思考有关问题的基础上,设计出一个详细的实验方案。实验方案。土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释

9、 将样品涂布在鉴别纤将样品涂布在鉴别纤 维素分解菌的培养基上维素分解菌的培养基上 筛选产生透筛选产生透 明圈的菌落明圈的菌落眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观 生物与环境的生物与环境的互相依存关系互相依存关系,在富含纤维素,在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从的环境中纤维素分解菌的含量相对提高,因此从这种土壤中这种土壤中获得获得目的微生物的目的微生物的几率要高几率要高于普通环于普通环境。境。眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观将

10、滤纸埋在土壤中将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对能使纤维素分解菌相对集中集中,实际上是,实际上是人工设置人工设置纤维素分解菌生存的纤维素分解菌生存的适宜环境适宜环境。一般应将滤纸埋于深约。一般应将滤纸埋于深约10cm10cm左右的左右的土壤中。土壤中。眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观 眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观培养基成分分析培养基成分分析培养基组成培养基组成提供主要的营养物质提供主要的营养物质纤维素粉纤维素粉 5g碳源(能源)碳源(

11、能源)NaNO3 1g氮源、无机盐氮源、无机盐KCl 0.5g Na2HPO47H2O 1.2gKH2PO4 0.9g MgSO4 7H2O 0.5g无机盐无机盐酵母膏酵母膏 0.5g生长因子、碳源、氮源生长因子、碳源、氮源水解酵素水解酵素 0.5g氮素、生长因子氮素、生长因子溶解后,蒸馏水定容至溶解后,蒸馏水定容至1000mL水水眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观提示:自变量为培养基的种类,即普通培养基和选择提示:自变量为培养基的种类,即普通培养基和选择培养基。可用牛肉膏蛋白胨培养基与之对照培养基。可用牛肉膏蛋白胨培

12、养基与之对照,或者将纤或者将纤维素改为葡萄糖。维素改为葡萄糖。有选择作用,本配方中纤维素作为主要碳源,有选择作用,本配方中纤维素作为主要碳源,只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。只有能分解纤维素的微生物可以大量繁殖。眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观思考:本实验的流程与课题思考:本实验的流程与课题2 2中的实验流程有哪些中的实验流程有哪些异同?异同? 本实验流程与课题本实验流程与课题2 2的流程的区别如下。课

13、的流程的区别如下。课题题2 2是将土样制成的菌悬液直接涂布在是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为以尿素为唯一氮源的选择性培养基上,直接分离唯一氮源的选择性培养基上,直接分离得到菌得到菌落。本课题通过落。本课题通过选择培养,使纤维素分解菌得选择培养,使纤维素分解菌得到增殖后,到增殖后,再将菌液涂布在鉴别培养基上。其再将菌液涂布在鉴别培养基上。其他步骤基本一致。他步骤基本一致。 眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观101102103104105106眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视

14、。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观培养基组成培养基组成提供的主要营养物质提供的主要营养物质CMC-Na 510g碳源碳源酵母膏酵母膏 1g碳源、氮源、生长因子碳源、氮源、生长因子KH2PO4 0.25g无机盐无机盐土豆汁土豆汁 100mL碳源、生长因子碳源、生长因子琼脂琼脂 15g凝固剂凝固剂上述物质溶解后,加蒸馏水定容至上述物质溶解后,加蒸馏水定容至1000mL氢元素、氧元素氢元素、氧元素鉴别纤维素分解菌的培养基鉴别纤维素分解菌的培养基(水溶性羧甲基纤维素钠水溶性羧甲基纤维素钠)眼

15、睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观方法一中方法一中NaCl溶液的作用?溶液的作用?思考:思考: 漂洗作用漂洗作用,洗去洗去与纤维素与纤维素结合不牢的刚果结合不牢的刚果红红,以免出现的透明圈不够清晰以免出现的透明圈不够清晰。用这方法。用这方法可以判断酶活力的大小可以判断酶活力的大小。实际上刚果红是结。实际上

16、刚果红是结合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细合到培养基的多糖底物,但分解纤维素的细菌可以产生纤维素酶,能分解这个多糖底物菌可以产生纤维素酶,能分解这个多糖底物成为单糖,这样刚果红就不能结合上去了,成为单糖,这样刚果红就不能结合上去了,氯化钠溶液就可以使结合不牢的刚果红洗去,氯化钠溶液就可以使结合不牢的刚果红洗去,这样就留下大大小小的透明圈,大的透明圈这样就留下大大小小的透明圈,大的透明圈当然分解纤维素的能就强!当然分解纤维素的能就强! 眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观比较项目比较项目分解尿素的细菌分解尿素的细菌纤

17、维素分解菌纤维素分解菌选选择择培培养养基基原理原理培养基类培养基类型型目的目的鉴鉴定定培培养养基基原理原理现象现象方法方法将细菌涂布在只有将细菌涂布在只有尿素做氮源的选择尿素做氮源的选择培养基上培养基上将细菌涂布在只有将细菌涂布在只有纤维素粉做碳源的纤维素粉做碳源的选择培养基上选择培养基上固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基筛选菌株筛选菌株选择培养选择培养眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观比较比较项目项目分解尿素的细菌分解尿素的细菌纤维素分解菌纤维素分解菌选选择择培培养养原理原理培养基类培养基类型型目的目的鉴鉴定定

18、培培养养基基原理原理现象现象方法方法在细菌分解尿素的化学反应在细菌分解尿素的化学反应中,细菌合成的中,细菌合成的脲酶脲酶将将尿素尿素分解成了分解成了氨氨,氨会使培养基,氨会使培养基的碱性增强,的碱性增强,pHpH升高升高。在培。在培养基中加入养基中加入酚红指示剂酚红指示剂,如,如果果pHpH升高指示剂会升高指示剂会变变红红刚果红可以与纤维素形成刚果红可以与纤维素形成红色复合物红色复合物,当,当纤维素被纤维素被纤维素酶催化分解纤维素酶催化分解后红色后红色复合物无法形成,培养基复合物无法形成,培养基上就会出现以纤维素分解上就会出现以纤维素分解菌为菌为中心的透明圈中心的透明圈观察菌落周围是否有着色的

19、观察菌落周围是否有着色的环带出现来鉴定尿素分解菌环带出现来鉴定尿素分解菌观察菌落周围是否出现观察菌落周围是否出现透明圈来筛选纤维素分解菌透明圈来筛选纤维素分解菌脲酶检测法脲酶检测法刚果红染色法刚果红染色法眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观四、结果分析与评价四、结果分析与评价 1.1.培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选培养基的制作是否合格以及选择培养基是否筛选出菌落出菌落 对照的培养基在培养过程中没有菌落

20、生长则说明对照的培养基在培养过程中没有菌落生长则说明培养基制作合格。培养基制作合格。 如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获得如果观察到产生透明圈的菌落,则说明可能获得了分解纤维素的微生物。了分解纤维素的微生物。 2.2.分离的结果是否一致分离的结果是否一致 由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌由于在土壤中细菌的数量远远高于真菌和放线菌的数量,因此最容易分离得到的是细菌。但由于所取的数量,因此最容易分离得到的是细菌。但由于所取土样的环境不同,不同同学也可能得到真菌和放线菌土样的环境不同,不同同学也可能得到真菌和放线菌等不同的分离结果。等不同的分离结果。眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的

21、感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观 为了确定分离得到的是纤维素分解菌,为了确定分离得到的是纤维素分解菌,还需要进行还需要进行_ 实验,纤维实验,纤维素酶的发酵方法有素酶的发酵方法有_ 发酵和发酵和_ 发酵。发酵。纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素酶测定方法是对纤维素酶分解滤纸等纤维素所产生的纤维素所产生的_ 含量进行定量测定。含量进行定量测定。发酵产纤维素酶发酵产纤维素酶 液体液体 固体固体 葡萄糖葡萄糖 眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观分解分解纤维纤维素的素的微生

22、微生物的物的分离分离纤维素酶纤维素酶种类、作用、催化活力种类、作用、催化活力刚果红染色刚果红染色筛选原理筛选原理实实验验设设计计土壤取样土壤取样选择培养选择培养涂布培养涂布培养纯化培养纯化培养前置染色法前置染色法后置染色法后置染色法富含纤维素土壤富含纤维素土壤增大分解菌含量增大分解菌含量染色鉴别染色鉴别分离出分解菌分离出分解菌课堂总结课堂总结眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观D1 1、下列材料中纤维素含量最高的是、下列材料中纤维素含量最高的是 ( )( ) A A杨树杨树 B B小麦小麦 C C玉米玉米 D D棉花棉花

23、眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观C2、纤维素酶能够分解、纤维素酶能够分解 ( ) A纤维素的微生物纤维素的微生物 B淀粉的微生物淀粉的微生物 C纤维素纤维素 D淀粉淀粉眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观B3、刚果红能与哪项物质形成红色复合物、刚果红能与哪项物质形成红色复合物 ( ) A纤维二糖纤维二糖 B纤维素纤维素 C葡萄糖葡萄糖 D麦芽糖麦芽糖眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中

24、情况都不容乐观B4、寻找纤维素分解菌应到、寻找纤维素分解菌应到( ) A湿润的环境中湿润的环境中 B富含纤维素的环境中富含纤维素的环境中 C富含无机盐的环境中富含无机盐的环境中 D池塘中池塘中眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观D5、纤维素分解菌的选择培养基有选择作、纤维素分解菌的选择培养基有选择作用,原因在于其含有用,原因在于其含有 ( ) ANaNO3 BKCl C酵母膏酵母膏 D纤维素粉纤维素粉眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观A6、下列哪

25、种生物能产生纤维素、下列哪种生物能产生纤维素酶酶 ( ) A纤维素分解菌纤维素分解菌 B牛牛 C羊羊 D兔兔眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观D7、选择培养时应将锥形瓶固定在、选择培养时应将锥形瓶固定在 ( ) A桌子上桌子上 B温箱里温箱里 C窗台上窗台上 D摇床上摇床上眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观B8、选择培养的结果:培养液变、选择培养的结果:培养液变 ( ) A清澈清澈 B浑浊浑浊 C红色红色 D产生透明圈产生透明圈眼睛是心灵的窗户

26、,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观C9、刚果红染色时,加入刚果红可在、刚果红染色时,加入刚果红可在 ( ) 制备培养基时制备培养基时 梯度稀释时梯度稀释时 倒平板时倒平板时 涂布时涂布时 培养基上长出菌落时培养基上长出菌落时 A B C D眼睛是心灵的窗户,是人体中最宝贵的感觉器官,可很多孩子对眼睛的重要性不重视。在每学期的视力测查中情况都不容乐观A10、两种刚果红染色法的结果是、两种刚果红染色法的结果是 ( ) A均会出现透明圈均会出现透明圈 B均不会出现透明圈均不会出现透明圈 C方法一出现,方法二不出现方法一出现,方法二不出现 D方法一不出现,方法二出现方法一不出现,方法二出现

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