有机物的鉴定精.ppt

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1、有机物的鉴定第1页,本讲稿共18页教学内容:教学内容:知识点淀粉、还原性糖 脂肪 蛋白质实验原理利用淀粉、还原性糖、脂肪、蛋白质等能与相应的试剂产生特定的颜色反应来鉴定它们的存在。实验步骤 讨论练习 作业 第2页,本讲稿共18页1 1、淀粉由葡萄糖缩合而成。淀粉由葡萄糖缩合而成。2 2、淀粉淀粉与与碘碘反应生成反应生成蓝色蓝色,这是鉴,这是鉴定淀粉的特征性颜色反应。定淀粉的特征性颜色反应。鉴定鉴定淀粉淀粉的特征性的特征性颜色反应颜色反应第3页,本讲稿共18页1.还还 原原 性性 糖糖 的的 鉴鉴 定定 实实 验验 原原 理理 实验中所用的实验中所用的斐林试剂斐林试剂(淡蓝色淡蓝色;含含Cu C

2、u 2+2+)。葡)。葡萄糖等还原性糖溶液在加入萄糖等还原性糖溶液在加入斐林试剂斐林试剂后,在加热条件后,在加热条件下其中的下其中的Cu Cu 2+2+被还原为被还原为砖红色砖红色的(的(CuCu2 2O O)沉淀。)沉淀。生物组织中的生物组织中的葡萄糖葡萄糖、果糖果糖、麦芽糖麦芽糖等等的分子都的分子都为为还原性糖还原性糖;而而蔗糖、淀粉、纤维素蔗糖、淀粉、纤维素等等为为非还原性糖非还原性糖。第4页,本讲稿共18页2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 苏丹苏丹苏丹苏丹(棕红色(棕红色,易溶解于酒精,不溶解于水)易溶解于酒精,不溶解于水)为一种为一种脂肪染色剂脂肪染色剂(易在脂肪滴中溶解、积累,并吸附在脂肪

3、颗粒易在脂肪滴中溶解、积累,并吸附在脂肪颗粒结构上结构上)。苏丹。苏丹染液遇脂肪的颜色反应为染液遇脂肪的颜色反应为橘红色橘红色第5页,本讲稿共18页3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定原理原理:在在碱性环境碱性环境中,中,双缩脲试剂双缩脲试剂(中的(中的Cu2+)能)能和和蛋白质蛋白质分子中含有的肽键结构分子中含有的肽键结构(-CO NH-)结合,结合,生成生成紫色紫色的络化物的络化物双缩脲反应。双缩脲反应。第6页,本讲稿共18页1.1还原性糖的鉴定:还原性糖的鉴定:现象:现象:斐林试剂斐林试剂呈砖红色沉淀呈砖红色沉淀1%葡萄糖葡萄糖液液(2mL)二、实验步骤与现象二、实验步骤与现象水浴加热水浴加热第

4、7页,本讲稿共18页选材选材:含糖量较高的:含糖量较高的白色或近于白色白色或近于白色,苹果、梨最好,苹果、梨最好。1.2可溶性还原糖的可溶性还原糖的 组织样液制备与鉴定组织样液制备与鉴定制备组织样液制备组织样液制备组织样液制备组织样液:制浆:去皮、切块、研磨制浆:去皮、切块、研磨过滤:(用单层纱布)过滤:(用单层纱布)取液:取液:(mL)显色反应显色反应显色反应显色反应现象现象现象现象:斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀(白色甘蓝叶、白萝卜稍逊白色甘蓝叶、白萝卜稍逊)水浴加热第8页,本讲稿共18页2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定(材料:材料:富含脂肪的种子,如花生富含脂肪的种子,如花生)取材:花生仁

5、取材:花生仁(浸泡浸泡h),去皮,将子叶削成,去皮,将子叶削成薄片薄片制片:制片:选取最薄的薄片移至载玻片中央选取最薄的薄片移至载玻片中央滴加滴加苏丹苏丹染液染液23滴,滴,染色染色min盖上盖玻片盖上盖玻片观察:观察:先在先在低低倍镜下找到已倍镜下找到已着色着色的薄片,的薄片,(后用高倍镜观察后用高倍镜观察)。结果结果:有被染成有被染成橘红色橘红色的脂肪微粒的脂肪微粒第9页,本讲稿共18页3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:黄豆组织样液(或黄豆组织样液(或鸡蛋清鸡蛋清鸡蛋清鸡蛋清稀释液)稀释液)黄豆浸泡黄豆浸泡去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显显色色

6、反反应应现象:现象:无色无色紫色紫色双缩脲试剂双缩脲试剂第10页,本讲稿共18页四、小结:材料已知成分试剂操作要点预见现象实际现象可溶性淀粉淀粉略葡萄糖 还原性糖略鸡蛋清蛋白质略植物油脂肪略碘液碘液双缩脲试剂双缩脲试剂苏丹苏丹III染液染液蓝色蓝色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色橘红色橘红色斐林试剂斐林试剂第11页,本讲稿共18页1.鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品鉴定脱脂奶粉是否为伪劣产品,不需要用不需要用 的化学试剂是的化学试剂是()A 斐林试剂斐林试剂 B苏丹苏丹IV染液染液 C 双缩脲试剂双缩脲试剂 D红墨水红墨水2.在在过氧化氢酶过氧化氢酶溶液中加入溶液中加入双缩脲试剂双缩脲试剂,其结果应该是

7、其结果应该是 ()A 产生气泡产生气泡 B 溶液呈蓝色溶液呈蓝色 C 溶液呈紫色溶液呈紫色 D 产生砖红色沉淀产生砖红色沉淀3.某同学在显微镜下观察被某同学在显微镜下观察被苏丹苏丹III染色染色后的花生子叶切片后的花生子叶切片,当转当转动细准焦螺旋调整焦距时动细准焦螺旋调整焦距时,有一部分细胞看得清楚有一部分细胞看得清楚,另一部分另一部分较模糊较模糊,这是因为这是因为 ()A 反光镜没有调好反光镜没有调好 B 标本切得厚薄不均匀标本切得厚薄不均匀 C 显微镜物镜损坏显微镜物镜损坏 D 细准焦螺旋未调好细准焦螺旋未调好五五.习题习题DC B 第12页,本讲稿共18页橘红色橘红色紫红色紫红色班氏试

8、剂班氏试剂红红 黄黄 色色第13页,本讲稿共18页1、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:原因是:这些叶子的颜色较深,对还原性这些叶子的颜色较深,对还原性糖与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用糖与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用、下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:A.斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中B.苏丹苏丹染液在鉴定动物组织中的脂肪时染液在鉴定动物组织中的脂肪时C.

9、双缩脲试剂鉴定蛋白质时双缩脲试剂鉴定蛋白质时D.碘化钾溶液鉴定淀粉时碘化钾溶液鉴定淀粉时()()课堂课堂练习练习:第14页,本讲稿共18页、某学生在鉴定脂肪的实验中,在显微镜下观察花生子叶某学生在鉴定脂肪的实验中,在显微镜下观察花生子叶切片,当转动细调节器时,有一部分细胞看的清楚,另一部分切片,当转动细调节器时,有一部分细胞看的清楚,另一部分较模糊,这是由于较模糊,这是由于()A.反光镜未调节好反光镜未调节好B.标本切的厚薄不均标本切的厚薄不均C.细调节器未调节好细调节器未调节好D.显微镜物镜损坏显微镜物镜损坏、苏丹苏丹溶液的配制的方法是:溶液的配制的方法是:称取称取0.1g苏丹苏丹干粉,干粉

10、,溶于溶于100mL酒精的体积分数为酒精的体积分数为95溶液中,待全部溶解后再溶液中,待全部溶解后再使用,为什么用酒精而不用蒸馏水?使用,为什么用酒精而不用蒸馏水?苏丹苏丹染液易溶解于酒精中染液易溶解于酒精中,不易溶解于水。,不易溶解于水。第15页,本讲稿共18页、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是A先加先加A液,混合后再加液,混合后再加B液摇匀观察()液摇匀观察()B先加先加B液,混合后再加液,混合后再加A液摇匀观察液摇匀观察CA、B混合后加入,摇匀观察混合后加入,摇匀观察DA、B液同时加入样液,摇匀后观察液同时加入样液,摇匀后观察、在生物组织中

11、可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择中,错误的是()定实验中,对实验材料的选择中,错误的是()A、甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可用于进行可溶性还原糖的鉴定且近于白色,因此可用于进行可溶性还原糖的鉴定B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚,适用于脂肪鉴定、花生种子含脂肪多且子叶肥厚,适用于脂肪鉴定C、大豆种子蛋白质含量高,可用于蛋白质的鉴定大豆种子蛋白质含量高,可用于蛋白质的鉴定D、鸡蛋清含蛋白质多,是蛋白质鉴定的理想材料鸡蛋清含蛋白质多,是蛋白质鉴定的理想材料第16页,本讲稿共18页注意:注意:斐林试剂的使用斐林试剂的使用 先将甲液和乙液混合再滴加到待测先将甲液和乙液混合再滴加到待测液中液中思考:为什么久配的斐林试剂不能鉴思考:为什么久配的斐林试剂不能鉴定还原糖?定还原糖?第17页,本讲稿共18页3医院确认糖尿病的常用方法及结果是()A.加入新制的Cu(OH)2,出现红色B.加入碘碘化钾溶液,出现蓝色C.加入苏丹溶液,出现橘黄色D.加入碘碘化钾溶液,出现淡黄色第18页,本讲稿共18页

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