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1、扎鲁特第一中学 高一备课组实验一实验一生物组中淀粉、还原性生物组中淀粉、还原性糖、脂肪、蛋白质的鉴定糖、脂肪、蛋白质的鉴定教学内容:教学内容:知识点知识点淀粉、还原性糖淀粉、还原性糖 脂肪脂肪蛋白质蛋白质实验原理实验原理利用利用淀粉淀粉、还原性糖还原性糖、脂肪脂肪、蛋白质蛋白质等能与等能与相应的试剂产生特定的颜色反应来鉴定它们相应的试剂产生特定的颜色反应来鉴定它们的存在。的存在。实验步骤实验步骤 讨论练习讨论练习 作业作业1 1、淀粉淀粉与与碘碘反应生成反应生成蓝色蓝色鉴定鉴定淀粉淀粉的特征性的特征性颜色反应颜色反应1.还还 原原 性性 糖糖 的的 鉴鉴 定定 实实 验验 原原 理理 实验中所
2、用的实验中所用的斐林试剂斐林试剂(淡蓝色淡蓝色;含含Cu Cu 2+2+)。)。葡萄糖等还原性糖溶液在加入葡萄糖等还原性糖溶液在加入斐林试剂斐林试剂后,在水后,在水浴加热条件下其中的浴加热条件下其中的Cu Cu 2+2+被还原为被还原为砖红色砖红色的的(CuCu2 2O O)沉淀。沉淀。生物组织中的生物组织中的葡萄糖葡萄糖、果糖果糖、麦芽糖麦芽糖等等的分的分子都为子都为还原性糖还原性糖(具有还原特性具有还原特性);而而蔗糖、淀粉、纤维素蔗糖、淀粉、纤维素等等为为非还原性糖非还原性糖。2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定 苏丹苏丹苏丹苏丹(棕红色(棕红色,易溶解于酒精,不溶解于水)易溶解于酒精,不溶解于水)
3、为一种脂肪染色剂为一种脂肪染色剂(易在脂肪滴中溶解、积累,并吸易在脂肪滴中溶解、积累,并吸附在脂肪颗粒结构上附在脂肪颗粒结构上)。苏丹。苏丹()染液遇脂肪的颜染液遇脂肪的颜色反应为色反应为橘黄色橘黄色(红色红色)3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定原理原理:在在碱性环境碱性环境中,中,双缩脲试剂双缩脲试剂(中的(中的Cu2+)能和)能和蛋白质蛋白质分子中含有的肽键结构分子中含有的肽键结构(-CO NH-)结合,生成结合,生成紫色紫色的化合物。的化合物。1.1还原性糖的鉴定:还原性糖的鉴定:现象:现象:斐林试剂斐林试剂呈砖红色沉淀呈砖红色沉淀1%葡萄糖葡萄糖葡萄糖葡萄糖液液(2mL)二、实验步骤与现象二
4、、实验步骤与现象水浴加热水浴加热选材选材选材选材:含糖量较高的:含糖量较高的白色或近于白色白色或近于白色,苹果、梨最好,苹果、梨最好。1.2可溶性还原糖的可溶性还原糖的 组织样液制备与鉴定组织样液制备与鉴定制备组织样液制备组织样液制备组织样液制备组织样液:显色反应显色反应显色反应显色反应现象现象现象现象:斐林试剂斐林试剂砖红色沉淀砖红色沉淀(白色甘蓝叶、白萝卜稍逊白色甘蓝叶、白萝卜稍逊)水浴加热2.脂肪的鉴定脂肪的鉴定(材料:材料:富含脂肪的种子,如花生富含脂肪的种子,如花生)取材:花生仁取材:花生仁(浸泡浸泡h),去皮,将子叶削成去皮,将子叶削成薄片薄片制片:制片:选取最薄的薄片移至载玻片中
5、央选取最薄的薄片移至载玻片中央滴加滴加苏丹苏丹染液染液23滴,滴,染色染色min.用酒清洗用酒清洗去浮色去浮色盖上盖玻片盖上盖玻片观察:观察:先在先在低低倍镜下找到已倍镜下找到已着色着色的薄片,的薄片,(后用高倍镜观察后用高倍镜观察)。结果结果:有被染成有被染成橘黄色橘黄色的脂肪微粒的脂肪微粒3.蛋白质的鉴定蛋白质的鉴定选材与制备选材与制备组织样液:组织样液:黄豆组织样液(或黄豆组织样液(或鸡蛋清鸡蛋清鸡蛋清鸡蛋清稀释液)稀释液)黄豆浸泡黄豆浸泡去皮去皮切片切片研磨研磨过滤过滤滤液滤液 显显色色反反应应现象:现象:无色无色紫色紫色双缩脲试剂双缩脲试剂区别双缩脲与斐林试剂使用区别双缩脲与斐林试剂
6、使用四、小结:材料材料已知成分已知成分试剂试剂操作操作要点要点预见现象预见现象实际实际现象现象可溶性可溶性淀粉淀粉淀粉淀粉略略葡萄糖葡萄糖 还原性糖还原性糖略略鸡蛋清鸡蛋清蛋白质蛋白质略略植物油植物油脂肪脂肪略略碘液碘液双缩脲试剂双缩脲试剂苏丹苏丹III染液染液蓝色蓝色砖红色沉淀砖红色沉淀紫色紫色橘黄色橘黄色斐林试剂斐林试剂1、某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量某些单子叶植物,如韭菜、鸢尾的叶子内含有大量的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验的可溶性还原糖,但这些单子叶植物的叶子不宜作实验材料,原因是:材料,原因是:这些叶子的颜色较深,对还原性这些叶子的颜色较深,对还原性糖
7、与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用糖与斐林试剂的颜色反应起遮蔽作用、下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:下列哪组试剂在使用过程中,必须加热:A.斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中B.苏丹苏丹染液在鉴定动物组织中的脂肪时染液在鉴定动物组织中的脂肪时C.双缩脲试剂鉴定蛋白质时双缩脲试剂鉴定蛋白质时D.碘化钾溶液鉴定淀粉时碘化钾溶液鉴定淀粉时()()课堂课堂练习练习:3医院确认糖尿病的常用方法及结医院确认糖尿病的常用方法及结果是果是()A.加入新制的加入新制的Cu(OH)2,出现红色出现红色B.加入碘加入碘碘化钾溶液碘化钾溶液,出现蓝色出现蓝色C.加入苏丹加入苏丹溶液溶液,
8、出现橘黄色出现橘黄色D.加入碘加入碘碘化钾溶液碘化钾溶液,出现淡黄色出现淡黄色4、鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是鉴定蛋白质样品时加双缩脲试剂的正确做法是A先加先加A液,混合后再加液,混合后再加B液摇匀观察()液摇匀观察()B先加先加B液,混合后再加液,混合后再加A液摇匀观察液摇匀观察CA、B混合后加入,摇匀观察混合后加入,摇匀观察DA、B液同时加入样液,摇匀后观察液同时加入样液,摇匀后观察 5、在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中,对实验材料的选择中,错误的是()定实验中,对实验材料的选择中,错误的是()A、甘蔗茎的薄壁组织、甜
9、菜的块根等,都含有较多甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等,都含有较多的糖且近于白色,因此可用于进行可溶性还原糖的鉴定的糖且近于白色,因此可用于进行可溶性还原糖的鉴定B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚,适用于脂肪鉴定花生种子含脂肪多且子叶肥厚,适用于脂肪鉴定C、大豆种子蛋白质含量高,可用于蛋白质的鉴定大豆种子蛋白质含量高,可用于蛋白质的鉴定D、鸡蛋清含蛋白质多,是蛋白质鉴定的理想材料鸡蛋清含蛋白质多,是蛋白质鉴定的理想材料对下列还原糖鉴定选材进行纠错:A.选材时可选用葡萄糖含量较高的苹果,紫葡萄等B.选材时食用的白糖含糖量高且无色是良好的实验材料选材要领选材要领:材料应为白色或无色还原糖材料应为白色或无
10、色还原糖含量较高的材料含量较高的材料总结选材要领总结选材要领注意:注意:斐林试剂的使用斐林试剂的使用1.先将甲液和乙液混合再滴加到先将甲液和乙液混合再滴加到待测液中待测液中(现用现配现用现配)2.实验必需水浴加热实验必需水浴加热思考:为什么久配的斐林试剂不能思考:为什么久配的斐林试剂不能鉴定还原糖?鉴定还原糖?区别还原糖与蛋白质的鉴定过程纠错:1.将双缩脲试剂混合使用也可用于鉴定还原糖2.还原糖鉴定时先加斐林试剂A液再加B液3.蛋白质鉴定过程中水浴加热后可观察到颜色由蓝变紫区别区别:1.两者虽然成分相似但两者浓度不同两者虽然成分相似但两者浓度不同2.斐林试剂先混合再使用斐林试剂先混合再使用,双缩脲试剂先双缩脲试剂先加加A液再加液再加B液液3.斐林试剂需要加热双缩脲试剂不需要斐林试剂需要加热双缩脲试剂不需要