实验一果蝇实验技术.ppt

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1、课前问题:课前问题:1.在正式开始遗传学实验之前,你对本门实验了解多少?在正式开始遗传学实验之前,你对本门实验了解多少?你期望的遗传学实验是什么样的?你期望的遗传学实验是什么样的?2.本实验室现有以下五个黑腹果蝇品种,如果要求你用这本实验室现有以下五个黑腹果蝇品种,如果要求你用这些品种设计实验来验证遗传学三大定律以及伴性遗些品种设计实验来验证遗传学三大定律以及伴性遗传规律,你如何设计实验?传规律,你如何设计实验?野生型野生型(+)黑体黑体(b,2号染色体号染色体)白眼白眼(w,X染色体染色体)残翅残翅(vg,2号染色体号染色体)三隐(白眼三隐(白眼(w),小翅,小翅(m),焦刚毛,焦刚毛(sn

2、),X染色体)染色体)实验一实验一 果蝇实验技术果蝇实验技术一、实验目的一、实验目的1.掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇掌握果蝇的基本特征及鉴别雌、雄果蝇的方法,熟悉常见突变型。的方法,熟悉常见突变型。2.了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态了解果蝇生活周期特征及各阶段的形态变化。变化。二、实验内容和步骤二、实验内容和步骤 果果 蝇蝇(fruit fly)是是 双双 翅翅 目目(Diptera)昆昆虫虫,属属果果蝇蝇属属(genus Drosophila),约约有有3000多多种种。通通常常用用作作 遗遗 传传 学学 实实 验验 材材 料料 的的 是是 黑黑 腹腹 果果 蝇蝇(Drosophi

3、la melanogaster)。)。用果蝇作为实验材料有许多优点用果蝇作为实验材料有许多优点:1.饲饲养养容容易易。在在常常温温下下,以以玉玉米米粉粉等等作作饲饲料料就就可可以生长,繁殖。以生长,繁殖。2.生生长长迅迅速速。十十二二天天左左右右就就可可完完成成一一个个世世代代,每每个个受受精精的的雌雌蝇蝇可可产产卵卵400500个个,因因此此在在短短时时间内就可获得大量的子代,便于遗传学分析。间内就可获得大量的子代,便于遗传学分析。3.染色体数少。只有染色体数少。只有4对。对。4.唾唾腺腺染染色色体体制制作作容容易易。横横纹纹清清晰晰,是是细细胞胞学学观观察的好材料。察的好材料。5.突变性状

4、多,而且多数是形态突变,便于观察。突变性状多,而且多数是形态突变,便于观察。生活周期长短与饲养温度的关系生活周期长短与饲养温度的关系(一)生活周期的观察(一)生活周期的观察10152025卵卵幼虫幼虫幼虫幼虫成虫成虫57天天18天天8天天6天天5天天4天天图图1 果蝇的生活史果蝇的生活史1.卵卵 2.一龄幼虫一龄幼虫 3.二龄幼虫二龄幼虫 4.三龄幼虫三龄幼虫 5.蛹蛹 6.成虫成虫 生活史周期(二)果蝇的形态特征和常见的突变类型(二)果蝇的形态特征和常见的突变类型1.果蝇雌雄性别的鉴别果蝇雌雄性别的鉴别n雌果蝇雌果蝇个体较大个体较大腹部末端较尖腹部末端较尖腹部背面有五条黑条腹部背面有五条黑条

5、纹纹外生殖器较简单,有外生殖器较简单,有阴道板和肛上板等结阴道板和肛上板等结构构腹部腹面有腹部腹面有6个腹片个腹片无性梳无性梳n雄果蝇雄果蝇个体较小个体较小腹部末端较钝腹部末端较钝腹部背面有三条黑条腹部背面有三条黑条纹,最后一条极宽,纹,最后一条极宽,并延伸到腹面并延伸到腹面外生殖器较复杂,有外生殖器较复杂,有生殖弧、肛上板、阴生殖弧、肛上板、阴茎等结构茎等结构腹部腹面有腹部腹面有4个腹片个腹片前腿跗节上有性梳前腿跗节上有性梳果蝇雌雄外形判别果蝇雌雄外形判别:(体形大小)(体形大小)雌雌 雄雄腹部体节数目:腹部体节数目:雌果蝇雌果蝇6节,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出。节,腹部底部为产卵管,

6、呈现圆锥状凸出。腹部体节数目:腹部体节数目:雄果蝇雄果蝇4节,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。节,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。雄果蝇在前肢先端第二节具有性梳雄果蝇在前肢先端第二节具有性梳2.一些常见的突变性状一些常见的突变性状突变性状突变性状基因符号基因符号染色体号染色体号性状特征性状特征棒眼棒眼B1复眼呈狭窄垂直棒形,小眼数少复眼呈狭窄垂直棒形,小眼数少焦刚毛焦刚毛sn1刚毛弯曲,似烧焦的头发刚毛弯曲,似烧焦的头发卷曲翅卷曲翅Cy2翅膀向上卷曲,纯合致死翅膀向上卷曲,纯合致死小翅小翅m1翅膀小,长度不超过身体翅膀小,长度不超过身体白眼白眼w1复眼白色复眼白色黑檀体黑檀体e3身体呈

7、乌木色,黑亮身体呈乌木色,黑亮黑体黑体b2体黑色,比黑檀体深体黑色,比黑檀体深黄体黄体y1全身呈浅橙黄色全身呈浅橙黄色残翅残翅vg2翅明显退化,部分残留,不能飞翅明显退化,部分残留,不能飞叉毛叉毛f1毛和刚毛分叉且弯曲毛和刚毛分叉且弯曲猩红眼猩红眼st3复眼呈明亮猩红色复眼呈明亮猩红色墨色眼墨色眼se3羽化时眼呈褐色并深化成墨色羽化时眼呈褐色并深化成墨色野生型:野生型:体色灰,体色灰,翅膀呈圆卵型,静止时平放交叉重叠,长度约翅膀呈圆卵型,静止时平放交叉重叠,长度约为腹部长度的两倍为腹部长度的两倍 双翅目:一对翅膀双翅目:一对翅膀+一对平衡棒一对平衡棒野生型:翅膀有横隔脉野生型:翅膀有横隔脉野生

8、型:野生型:眼睛颜色为砖红色,饱满圆形眼睛颜色为砖红色,饱满圆形 野生型:刚毛野生型:刚毛头胸部以及复眼的周围具有平直,先头胸部以及复眼的周围具有平直,先端略弯的长型粗黑硬毛端略弯的长型粗黑硬毛 棒眼棒眼(B)白眼白眼(w)朱红眼(朱红眼(v)墨黑眼(墨黑眼(se)短刚毛(短刚毛(Sb)叉毛(叉毛(f)卷翅(卷翅(Cy)残翅残翅(vg)短翅(短翅(dp)小翅小翅(m)无横隔脉(无横隔脉(cv)黄体(黄体(y)黑檀体黑檀体(e)(三)(三)果蝇麻醉方法果蝇麻醉方法1.1.麻醉剂麻醉剂2.方法方法3.死亡果蝇的标志死亡果蝇的标志(四)果蝇的饲养(四)果蝇的饲养1.果蝇培养基成份(果蝇培养基成份(1

9、00ml)水水80ml80ml玉米粉玉米粉8.25g8.25g糖糖6.2g6.2g琼脂琼脂0.6g0.6g丙酸丙酸0.5ml0.5ml酵母酵母0.7g0.7g2.配制方法配制方法玉米粉糖琼脂3.灭菌、灌装灭菌、灌装灭菌温度灭菌温度121灭菌时间灭菌时间25-30分钟分钟4.果蝇继代培养果蝇继代培养n观察果蝇生活史四个时期观察果蝇生活史四个时期n观察果蝇成虫外形和鉴别雌雄性观察果蝇成虫外形和鉴别雌雄性n观察突变体观察突变体n各挑取各挑取10对三隐果蝇和对三隐果蝇和10对黑体果蝇到新培养对黑体果蝇到新培养瓶中饲养,贴上标签,写明品系、性状、日期、瓶中饲养,贴上标签,写明品系、性状、日期、实验者姓名,饲养两周后供下次实验使用。实验者姓名,饲养两周后供下次实验使用。n清洗果蝇培养瓶清洗果蝇培养瓶今日实验任务:今日实验任务:品系(性状)品系(性状)姓名姓名 日期日期下一周实验内容下一周实验内容n实验三实验三 微核检测技术微核检测技术

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