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1、实验一实验一 果蝇的生活史及遗传性状的观察果蝇的生活史及遗传性状的观察一、实验目的一、实验目的1.掌握果蝇常见突变类型和性别的鉴定方法；2.了解果蝇的生活史和饲养。精1二、实验原理：二、实验原理：果蝇果蝇(Drosophila)属于昆虫纲，双翅目。属于昆虫纲，双翅目。特点：生活史短，易饲养，繁殖快，染色体少，特点：生活史短，易饲养，繁殖快，染色体少，突变型多，个体小。突变型多，个体小。精2生活史：（最适温度2025）精3大小大小大大小小腹端腹端腹部末端稍尖腹部末端稍尖腹部末端呈钝圆形腹部末端呈钝圆形腹腹片片6个腹片个腹片4个腹片个腹片背纹背纹腹部末端腹部末端色浅色浅，腹部背，腹部背面呈面呈5条
2、黑色条纹条黑色条纹腹部末端腹部末端黑色黑色，腹背，腹背3条条条条纹，纹，最后一条极宽最后一条极宽，并延，并延伸到腹面，呈一明显黑斑伸到腹面，呈一明显黑斑性梳性梳无无第一对足跗节基部有性梳第一对足跗节基部有性梳生殖器生殖器外生殖器较简单，有阴道板和外生殖器较简单，有阴道板和肛上板等结构肛上板等结构外生殖器较复杂，有生殖弧、肛外生殖器较复杂，有生殖弧、肛上板、阴茎等结构上板、阴茎等结构雌雄果蝇的辨别要点：雌雄果蝇的辨别要点：精4精5性梳精6精7雌果蝇雌果蝇6节节腹片腹片，腹部，腹部底部为产卵管，呈现圆底部为产卵管，呈现圆锥状凸出锥状凸出雄果蝇雄果蝇4节节腹片腹片，腹部，腹部底部为交尾器，呈现黑底部
3、为交尾器，呈现黑色圆形外观。色圆形外观。精8果蝇的野生型性状：果蝇的野生型性状：红眼红眼：眼睛颜色为砖红色，饱满圆形眼睛颜色为砖红色，饱满圆形 灰体灰体：体色灰黄体色灰黄长翅长翅：翅膀圆卵，静止时交叉重叠，约为腹部翅膀圆卵，静止时交叉重叠，约为腹部长度的两倍长度的两倍 直刚毛直刚毛：头胸部以及复眼的周围具有平直、先头胸部以及复眼的周围具有平直、先端略弯的长型粗黑硬毛端略弯的长型粗黑硬毛 精9常见突变性状：常见突变性状：精10突变型：黑檀体（e）精11精12精13突变型：卷刚毛（sn3）精14实验二实验二实验五实验五果蝇的系列杂交实验果蝇的系列杂交实验1.掌握果蝇的基本实验操作2.掌握果蝇杂交实
4、验的原理精15果蝇的麻醉果蝇的麻醉转入麻醉瓶转入麻醉瓶：轻拍培养瓶，震落果蝇，将麻醉瓶和：轻拍培养瓶，震落果蝇，将麻醉瓶和培养瓶两口相对，将果蝇引入麻醉瓶。培养瓶两口相对，将果蝇引入麻醉瓶。麻醉麻醉：在麻醉瓶的棉花塞里侧加：在麻醉瓶的棉花塞里侧加12滴乙醚，麻醉几滴乙醚，麻醉几分钟，直至果蝇不动为止。分钟，直至果蝇不动为止。观察观察：将果蝇倒在白瓷板上，用：将果蝇倒在白瓷板上，用毛笔毛笔小心拨动观察。小心拨动观察。补救麻醉补救麻醉：如果蝇在观察中苏醒过来，可用一平皿，：如果蝇在观察中苏醒过来，可用一平皿，内贴一带乙醚的滤纸条，罩住果蝇进行麻醉补救；内贴一带乙醚的滤纸条，罩住果蝇进行麻醉补救；精
5、16适度麻醉过度麻醉精17处女蝇的收集处女蝇的收集处女蝇：果蝇羽化后处女蝇：果蝇羽化后12h开始交配，之前不具开始交配，之前不具生殖能力的雌果蝇，称为处女蝇。因雌果蝇能生殖能力的雌果蝇，称为处女蝇。因雌果蝇能贮存精子，品系间杂交必须用处女蝇。贮存精子，品系间杂交必须用处女蝇。选择收集：将培养瓶内羽化的果蝇全部处死，选择收集：将培养瓶内羽化的果蝇全部处死，此后此后8-12h内收集内收集的羽化雌蝇，即是处女蝇。的羽化雌蝇，即是处女蝇。精18果蝇计数果蝇计数取一白纸，沿对角线对折然后展平，平置取一白纸，沿对角线对折然后展平，平置于桌面，将麻醉之果蝇倒于对角线折痕于桌面，将麻醉之果蝇倒于对角线折痕上，
6、以上，以毛笔毛笔拨弄果蝇使其均匀分散于对拨弄果蝇使其均匀分散于对角线折痕上，然后沿对角线将雌雄果蝇角线折痕上，然后沿对角线将雌雄果蝇分类拨入各侧计数。分类拨入各侧计数。精19杂交试验基本步骤：杂交试验基本步骤：1、收集处女蝇收集处女蝇：每组做：每组做正、反交各正、反交各1瓶瓶，将母本旧瓶中的果蝇，将母本旧瓶中的果蝇全全部部麻醉处死，在麻醉处死，在8-12h内内收集处女蝇收集处女蝇5只，和只，和5只父本雄蝇转移只父本雄蝇转移到新的培养瓶中，贴好标签，于到新的培养瓶中，贴好标签，于25培养。培养。2、7d后，后，F1幼虫出现，幼虫出现，处死杂交亲本处死杂交亲本。3、再过、再过4-5天，天，F1成蝇
7、出现。在处死亲本成蝇出现。在处死亲本7天天后，集中观察记录后，集中观察记录F1表型和性状；选取表型和性状；选取5对对F1代果蝇，代果蝇，转入一新培养瓶转入一新培养瓶，于，于25培培养，贴好标签；养，贴好标签；4、7d后，后，处死处死F1亲本亲本；5、再过再过5-7d，F2成蝇出现，开始成蝇出现，开始观察记录观察记录，连续统计，连续统计7d。精201 1、果蝇的单因子实验杂交组合、果蝇的单因子实验杂交组合 1818 x 2 x 2 (正交）正交）2 2 x 18x 18 (反交反交)2 2、果蝇的伴性遗传杂交组合、果蝇的伴性遗传杂交组合 1818 x 22x 22 (正交正交)22 22 x 1
8、8x 18 (反交反交)3 3、果蝇二对因子自由组合实验的杂交组合、果蝇二对因子自由组合实验的杂交组合 e e x 2x 2 (正交正交)2 2 x ex e (反交反交)果蝇的系列杂交实验果蝇的系列杂交实验精21 果蝇的三点测交果蝇的三点测交野生型果蝇（野生型果蝇（+）为父本）为父本（红眼、长翅、直刚（红眼、长翅、直刚毛）毛）三隐性果蝇（三隐性果蝇（wmsn3）母本）母本（白眼、小翅、焦刚（白眼、小翅、焦刚毛毛）（不要求作正、反交对照）（不要求作正、反交对照）要求每组至少统计要求每组至少统计250250只只果蝇。故在果蝇。故在“F1F1代果蝇，转入一代果蝇，转入一新培养瓶新培养瓶”时，时，每
9、组做每组做4 4瓶瓶或以上。或以上。精22注意事项：注意事项：1 1、每次实验必须、每次实验必须严防污染严防污染，棉塞不能混用，毛笔、瓷板和麻醉瓶，棉塞不能混用，毛笔、瓷板和麻醉瓶使用后必须洗净、消毒、凉干。使用后必须洗净、消毒、凉干。2 2、挑处女蝇时，每次必须把成虫、挑处女蝇时，每次必须把成虫一只不留一只不留地取出，并每次间隔地取出，并每次间隔不不能超过能超过1212小时小时。3 3、移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇移入新培养瓶时，须将瓶横卧，然后将果蝇挑入，待果蝇清醒清醒过来后，再把培养瓶竖起过来后，再把培养瓶竖起，以防果蝇粘在培养基上。，以防果蝇粘在培养基上。4 4、刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨、刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨，务必小心区别。，务必小心区别。5 5、注意使用乙醚麻醉剂，用完后应立即盖好。、注意使用乙醚麻醉剂，用完后应立即盖好。实验室不能有明火。实验室不能有明火。6 6、本实验期间，实验室全开放，各组成员必须保持实验室的安全、本实验期间，实验室全开放，各组成员必须保持实验室的安全、安静、整洁、有序。安静、整洁、有序。精23