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1、实验五果蝇杂交实验第1页，本讲稿共29页目的设计与创新性实验掌握果蝇的杂交技术和统计处理方法加深理解遗传的分离规律、自由组合规律及伴性遗传。培养运用所掌握的理论知识独立设计实验和完成实验的能力。第2页，本讲稿共29页实验原理第3页，本讲稿共29页突变性状基因符号染色体号性状特征棒眼B1复眼呈狭窄垂直棒形，小眼数少褐眼bw2眼呈褐色卷曲翅Cy2翅膀向上卷曲，纯合致死小翅m1翅膀小，长度不超过身体白眼白眼w1复眼白色复眼白色黑檀体e3身体呈乌木色，黑亮黑体b2体黑色，比黑檀体深黄体y1全身呈浅橙黄色残翅残翅vg2翅明显退化，部分残留，不翅明显退化，部分残留，不能飞能飞叉毛f1毛和刚毛分叉且弯曲猩红
2、眼st3复眼呈明亮猩红色墨色眼se3羽化时眼呈褐色并深化成墨色第4页，本讲稿共29页实验原理第5页，本讲稿共29页（1）果蝇的单因子杂交（2）果蝇的双因子杂交（3）果蝇的伴性遗传第6页，本讲稿共29页第7页，本讲稿共29页第8页，本讲稿共29页第9页，本讲稿共29页第10页，本讲稿共29页第11页，本讲稿共29页实验步骤（一）果蝇培养基实验室内凡能发酵的基（一）果蝇培养基实验室内凡能发酵的基质，均可作为果蝇的饲料。实验室常用的培质，均可作为果蝇的饲料。实验室常用的培养基配制方法是：养基配制方法是：玉米粉为主料：玉米粉为主料：300ml+3g agar+26g sucrose+20g maize
3、 powder+2.8g yeast extract+2ml acetic acid 防止培养基长霉，加防止培养基长霉，加2ml丙酸作为防腐剂。丙酸作为防腐剂。第12页，本讲稿共29页（二）果蝇培养仔细检查果蝇有没有混（二）果蝇培养仔细检查果蝇有没有混杂，有没有突变个体的产生。一般一瓶放杂，有没有突变个体的产生。一般一瓶放两到三对亲本为宜。果蝇移入新瓶时，需两到三对亲本为宜。果蝇移入新瓶时，需将瓶子横放，待果蝇清醒过来后再把培养将瓶子横放，待果蝇清醒过来后再把培养瓶竖起。标签上标明品种名称和日期，温瓶竖起。标签上标明品种名称和日期，温度控制在度控制在18左右。左右。第13页，本讲稿共29页（三
4、）处女蝇的收集及交配组合（三）处女蝇的收集及交配组合果蝇雌体生殖器官有受精囊，可保留交配所得果蝇雌体生殖器官有受精囊，可保留交配所得的大量精子，能使日后产下的卵受精。的大量精子，能使日后产下的卵受精。因此在做杂交时，雌体必须选用处女蝇。因此在做杂交时，雌体必须选用处女蝇。雌蝇羽化出来雌蝇羽化出来12小时内一般不会交配。小时内一般不会交配。我们选择在这个时间段内所收集的雌体，均属我们选择在这个时间段内所收集的雌体，均属处女蝇，可放心做为杂交亲本用。处女蝇，可放心做为杂交亲本用。雄体可事先收集好，放在一个新的培养瓶中，雄体可事先收集好，放在一个新的培养瓶中，也可等收集到处女蝇后再收集雄蝇。也可等收
5、集到处女蝇后再收集雄蝇。第14页，本讲稿共29页当两亲本在新的培养瓶中生活当两亲本在新的培养瓶中生活78天后，天后，可见培养基面上有许多幼虫在爬动，这是可见培养基面上有许多幼虫在爬动，这是子代的幼虫，这时可将两亲本倒出，以免子代的幼虫，这时可将两亲本倒出，以免和子代混淆。和子代混淆。当子一代果蝇羽化出来后，要观察性状和当子一代果蝇羽化出来后，要观察性状和计数。同时，根据要求可进行计数。同时，根据要求可进行F1代自交或代自交或测交项目。测交项目。第15页，本讲稿共29页（四）配置组合（各配置正反交）（四）配置组合（各配置正反交）1 单因子 残翅 X 正常翅 正常翅 X 残翅每组合两瓶，每瓶2-3
6、对第16页，本讲稿共29页2.二因子 红眼残翅 X 白眼正常翅每组合两瓶，每瓶2-3对第17页，本讲稿共29页3 伴性遗传 白眼 X 红眼 红眼 X 白眼每组合两瓶，每瓶2-3对第18页，本讲稿共29页收集处女蝇收集处女蝇 配制组合（配制组合（2-3对）对）7-8天天F1幼虫出现幼虫出现倒出成蝇倒出成蝇3-4天天F1成蝇成蝇出现出现观察记载统计数目观察记载统计数目 测交测交 自交自交隐性亲本隐性亲本X F1 F1 2-3对对（新培养瓶中）（新培养瓶中）6-7天天 测交后代测交后代 F2 幼虫出现幼虫出现 倒掉亲本蝇倒掉亲本蝇3-4天天 成蝇成蝇 成蝇成蝇 出现出现麻醉观察麻醉观察数数量量X2检
7、验检验第19页，本讲稿共29页1.果蝇要适度麻醉，挑蝇果蝇要适度麻醉，挑蝇用毛笔，忌用镊子和其他工用毛笔，忌用镊子和其他工具，以免影响果蝇生长繁育具，以免影响果蝇生长繁育注意事项注意事项第20页，本讲稿共29页2.挑处女蝇时，挑处女蝇时，每次只挑每次只挑12小时内羽化成小时内羽化成虫，超过虫，超过12小时的成虫已逐渐小时的成虫已逐渐有交配能力有交配能力,必须一只不留地倒必须一只不留地倒出处死出处死,才能进行第才能进行第二次挑选二次挑选第21页，本讲稿共29页3.刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，刚羽化的果蝇色淡白，体软绵，难辨难辨，务必小心区别，务必小心区别 4.使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球使用毛笔
8、和瓷板，要用酒精棉球消毒，同时必须凉干才能使用。消毒，同时必须凉干才能使用。第22页，本讲稿共29页5.每个杂交组合放果蝇每个杂交组合放果蝇23对，用毛笔把果蝇扫进对，用毛笔把果蝇扫进试管，试管要平放，待蝇醒后，试管，试管要平放，待蝇醒后，方能竖起，避免果蝇粘在培养方能竖起，避免果蝇粘在培养基上被闷死，杂交组合配基上被闷死，杂交组合配好后，放回培养箱。好后，放回培养箱。第23页，本讲稿共29页6.培养箱温度保持在培养箱温度保持在18，不要随意更改或调整其他旋不要随意更改或调整其他旋钮，以免影响整个实验。钮，以免影响整个实验。第24页，本讲稿共29页 观察结果统计日期 正 交 反 交红眼果蝇（雌
9、：雄）白眼果蝇（雌：雄）红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）合 计单因子杂交F1代的结果统计亲本1：亲本2：杂交日期：第25页，本讲稿共29页 观察结果统计日期 正 交 反 交红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）合 计单因子杂交自交F2代的结果统计第26页，本讲稿共29页 观察结果统计日期 正 交 反 交红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）红眼果蝇（雌：雄）白眼果蝇（雌：雄）合 计单因子杂交测交的结果统计第27页，本讲稿共29页长翅殘翅合计实验观察数（O）理论数3:1（C）偏差（OC）(o-c)2/c实验结果卡方测验表第28页，本讲稿共29页作业作业根据实验经过和结果写根据实验经过和结果写1份实验份实验报告，要求结合遗传学有关的内报告，要求结合遗传学有关的内容进行分析和讨论。容进行分析和讨论。第29页，本讲稿共29页