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1、一、相关术语1蜂胶:在即将实施的GB/T 24283-2018里将蜂胶定义为:工蜂采集胶源植物树脂等分 泌物与其上颗腺、蜡腺等分泌物混合形成的胶黏性物质。2蜂胶乙醇提取物:用乙醇萃取(浸取)蜂胶得到的物质。3总黄酮:黄酮类物质含量的总和。二、蜂胶感官要求的检验1色泽、状态在自然光线良好的条件下,观察被检样品外表色泽。取少许被检样品混匀后,加热至 35左右,用手揉搓成条,再慢慢向两端拉伸。含胶量越大,黏性越大,拉伸长度越长。2气味、滋味取少许样品,嗅其气味是否有蜂胶特有的明显芳香气味,再点燃,嗅其气味是否异常;口 尝其滋味。蜂胶的色泽应该是棕黄色、棕红色、褐色、黄褐色、灰褐色、青绿色、灰黑色等。
2、状态是团块或碎渣状,不透明,约30C以上随温度升高逐渐变软,且有黏性。气味有蜂胶所特有的芳香气味,燃烧时有树脂乳香气,无异味。滋味微苦、略涩,有微麻感和辛辣感。三、蜂胶乙醇提取物感官要求的检验1结构将蜂胶的乙醇提取物样品放在15以下2 h-3 h,用锤砸开,观察其断面。2色泽、状态在自然光线良好的条件下,观察被检样品外表色泽。取少许被检样品混匀后,加热至 35c左右,用手揉搓成条,再慢慢向两端拉伸。含胶量越大,黏性越大,拉伸长度越长。3气味、滋味取少许样品,嗅其气味是否有蜂胶特有的明显芳香气味,再点燃,嗅其气味是否异常;口 尝其滋味。蜂胶乙醇提取物的结构应该是断面结构紧密。色泽是棕褐色、深褐色
3、有光泽。状态是固体状,约30C以上随温度升高逐渐变软,且有黏性。气味有蜂胶所特有的芳香气味,燃烧时有树脂乳香气,无异味。滋味微苦、略涩,有微麻感和辛辣感。四、乙醇提取物含量测定试剂:a)乙醇:分析纯(295%)、b)定量滤纸:“12.5 cm仪器:天平(感量0. 001g)、250 mL烧杯、真空干燥箱、超声波清洗器、玻璃漏斗1)60mm、 玻璃棒、250血,锥形瓶。原理:蜂胶溶于乙醇,用称量乙醇不溶物的重量以减量法获得乙醇提取物重量,计算其 占样品重量的百分比。五、总黄酮含量测定试剂:聚酰胺粉:2150nin(100目);芦丁标准溶液:取5.0 mg芦丁(299%),加甲醇溶解并定容至100
4、 mL,即得。芦丁标准 溶液浓度为50 u g/mL;乙醇:分析纯(295%);甲醇:分析纯(299%);甲苯:分析纯(299%)。仪器:紫外可见光分光光度计;层析柱:350 mm(长)X15 mm(内径)、具活塞、砂芯、抽气嘴、圆底烧瓶;容量瓶:10 mL;移液器:100 uL-1000 uL;移液管:1mL - 5mL;玻璃蒸发皿:90mmo步骤:试样处理:称取经过粉碎处理的蜂胶样品1g (精确到0. 001g),或蜂胶乙醇提取物0. 5g 于容量瓶中,用乙醇定容至100mL,摇匀后,超声提取20min,放置,用移液管吸取上清液 1mL于玻璃蒸发皿中,加入5mL乙醇及1g聚酰胺粉,用玻璃棒
5、混匀吸附,于60水浴上挥 去乙醇,然后转入关闭活塞的层析柱中。量取201nL甲苯液,清洗玻璃蒸发皿再将甲苯液转 入层析柱中,分3次完成。15min后开启层析柱活塞,弃去甲苯液并关闭层析柱活塞,取下 圆底烧瓶,将25mL容量瓶装于层析柱下方。量取20 mL甲醇,分3次清洗玻璃蒸发皿,再将 甲醇转入层析柱中,15 min后开启层析柱活塞将黄酮洗脱于25 mL容量瓶中,用甲醇定容 至25 mL。此液置1 cm比色皿中于波长360 nm测定吸收值。同时以芦丁为标准品,用标准 曲线法定量。芦丁标准曲线:分别吸取芦丁标准溶液0 mL、1.0 niL、2.0 mL、3.0 mL、4.0 mL 5.0 inL于10 mL容量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,置1 cm比色皿中于波长360 nm测定吸收值, 绘制标准工作曲线,计算回归方程。计算:按照公式进行计算