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1、105442_33_g_1目录1湖南南师范大大学生命命科学学学院本科科学生220022年以来发表表论文和和获奖情情况2湖南南师范大大学生命命科学学学院本科科学生研研究创新新性实验验优秀论论文（报报告）选选编1湖南南师范大大学生命命科学学学院本科科学生220022年以来发发表论文文和获奖奖情况（1）发表的的论文作者姓名名专业年级级论文（作作品）名名称刊名称和和发表年年份，卷卷（期）杨筱慧20000级生物物科学湖南西部部丘陵山山区洪水水成因的的调查分分析湖南教育育学院学学报 220022，200（5）何志恒19999级生物物科学睡眠研究究的科学学前沿生命科学学研究 20002，（21）罗小琳200
2、00级生物物科学心脏原基基的起源源和发育育生命科学学研究 20002，（21）鲍峰20000级生物物科学心脏壁肌肌的发育育生命科学学研究 20002，（21）颜峰20000级生物物技术时序调控控小分子子RNAA的研究究进展生命科学学研究 20002，（21）吴红霞20000级生物物科学脊椎动物物心脏形形态发育育的转录录调控生命科学学研究 20002，（21）孙亚兰20000级生物物科学miRNNA一类新新的调控控微小RRNA生命科学学研究 20002，（21）李莉19999级生物物科学羰基毒化化与阿尔尔茨海默默病的相相关性老年痴痴呆发病病机理与与药物研研究 盛树力力主编. 科学学技术文文献出版
3、版社出版版 20003秦旺华19999级生物物科学中西医结结合研究究血瘀证证本质的的现状及及进展现代中西西医结合合杂志 20004, 13 (200)向丹19988级生物物科学冬眠乌龟龟体液与与组织中中可溶性性蛋白质质的SDDS电泳泳及荧光光分析中国科学学学报 20004, 1 (11)秦旺华19999级生物物科学Biocchennicaal rreleevannce bettweeen ooxiddatiive/carrbonnyI strreess annd eelevvateed vvisccosiity of eryythrrocyyte susspennsioonsCLINNICAA
4、L HHEMOORHEEOLOOGY ANDD MIICROOCIRRCULLATIION 20004, （2）秦旺华19999级生物物科学血瘀证本本质与血血液流变变学和羰羰基应激激的相关关性中华中西西医杂志志 20004, 5 (211)陈雄19999级生物物科学西方长寿寿与衰老老研究史史精要生命科学学研究 20004, 8 (4)李小聪、易易斌19999级生物物技术The preeparratiion andd Caatallytiicallly acttivee chharaacteerizzatiion of pappainn immmobbiliizedd onn maagneeti
5、cc Coompoositte mmicrrosppherresENZYYME andd MIICROOBIAAL TTECHHNOLLOGYY 20004, 355: 115-221邬勇20000级生物物技术维生素DD受体雌雌激素受受体-aa基因多多态性与与骨质疏疏松的研研究进展展中华老年年医学杂杂志 220055, 224 (6)李莉19999级生物物科学Subsstanntiaal rreacctioon bbetwweenn hiistaaminne aand mallonddialldehhydee: AA neew oobseervaatioon oof CCarbbonyyl s
6、streessNeurro-enddocrrinoologgy llettterss 20005, 266 (66)王鑫慧20000级生物物技术冬眠状态态乌龟尿尿液的生生物学特特性及生生化分析析湖南师范范大学自自然科学学学报 20005, 3李莉19999级生物物科学老年痴呆呆的发病病机理与与羰基应应激中华现代代医学与与临床 20005, （7）向丹19988级生物物科学从细胞复复制衰老老看动物物整体衰衰老中国科学学学报220055, 22 (22)秦旺华19999级生物物科学细胞内蛋蛋白质水水解阻抑抑与脂褐褐素形成成和衰老老的相关关性中国老年年学杂志志社 220055, 225 (2)陈威华
7、、邓邓梅春、黎黎冠、康康园20000级生物物科学虎纹蜘蛛蛛毒素I对大大鼠急性性内脏疼疼痛的抑抑制性效效应w-芋螺毒毒素的比比较研究究（英文文稿）中国生物物化学与与分子生生物学报报20005，221（11）陈威华、邓邓梅春、黎黎冠、康康园20000级生物物科学一种新型型N-型型电压敏敏感性钙钙通道拮拮抗剂虎虎纹蜘蛛蛛毒素-I对大大鼠内脏脏痛模型型镇痛作作用的研研究第一军医医大学学学报20005，225（11）杨娜、周周杰、邬邬勇20000级生物物技术No mmajoor eeffeect of thee innsullin-likke ggrowwth facctorr I genne oon
8、bbonee miinerral dennsitty iin ppremmenoopauusall Chhineese wommenBONEE20005, 36: 6994-6699佘巧玲20022级生物物科学高中生物物探究式式实验教教学设计计研究及及案例分分析生命科学学研究 20006, 10（33）：1149-1533刘连20022级生物物基地人类高度度进化保保守基因因hnuulp11中转录录抑制区区段的定定位生命科学学研究 20006, 10（33）：1194-1999刘连20022级生物物基地hnullpI, a bassic hellix-looop-hheliix pprottei
9、nn wiith a nnoveel ttrannscrripttionnal reppresssivve ddomaain, innhibbitss trransscriiptiionaal aactiivitty oof sseruum rrespponsse ffacttorBiocchemmicaal aand Bioophyysiccal Ressearrch Commmunnicaatioons 20006, 3433: 9973-9811戴悦20066级生物科科学人类心脏脏特异表表达基因因pyggo1的的克隆与与功能研研究湖南师范范大学自自然科学学学报220088（已接接收）（2
10、）获获奖情况况姓名专业年级级获奖项目目获奖等级级获奖年份份刘欣文20011级生物物科学校“未来来教育家家奖”竞赛三等奖20033陈琳20000级生物物科学校“未来来教育家家奖”竞赛三等奖20033付国花20011级生物物科学校“未来来教育家家奖”竞赛三等奖20033潘艺20000级生物物科学“英特尔尔杯”全国信信息化教教学设计计大奖赛赛创意二等等奖20044李东勇20000级生物物科学“英特尔尔杯”全国信信息化教教学设计计大奖赛赛创意二等等奖20044童英20000级生物物科学“英特尔尔杯”全国信信息化教教学设计计大奖赛赛优秀奖20044莫敏俐20044级生物物基地校“艾滋滋病科普普知识竞竞赛
11、”一等奖20044宫钰20044级生物物基地校“艾滋滋病科普普知识竞竞赛”二等奖20044朱文敏20044级生物物基地校“艾滋滋病科普普知识竞竞赛”三等奖20044刘连20022级生物物基地校“未来来教育家家奖”竞赛优秀奖20044谢冰花20022级生物物科学校“未来来教育家家奖”竞赛优秀奖20044彭月玲20033级生物物基地校第四届届多媒体体课件制制作大赛赛三等奖20055孙丽娜20033级生物物基地校“未来来教育家家奖”竞赛优秀奖20055郭曼20044级生物物基地校首届“心理健健康教育育知识竞竞赛”三等奖20055熊振宇20044级生物物科学校“我的的职业生生涯规划划”方案设设计竞赛赛
12、一等奖20055郭曼20044级生物物科学校“我的的职业生生涯规划划”方案设设计竞赛赛优秀奖20055唐薇20044级生物物基地校“我的的职业生生涯规划划”方案设设计竞赛赛优秀奖20055王玉刚20044级生物物基地湖南省第第七届“挑战杯杯”动感地地带大学学生课外外学术科科技作品品竞赛特等奖20066于峰20044级生物物基地湖南省第第七届“挑战杯杯”动感地地带大学学生课外外学术科科技作品品竞赛二等奖20066莫敏俐20044级生物物基地校“未来来教育家家奖”竞赛优秀奖20066李昀20044级生物技技术湖南师范范大学实实验技能能竞赛一等奖20066夏浪20055级生物科科学一等奖吴莎莎200
13、55级生物技技术一等奖陈丹20044级生物技技术一等奖朱玉梅20033级基地班班二等奖周洁20044级生物科科学二等奖吴渊20055级生物技技术二等奖何海钢20044级生物科科学二等奖龚琳20044级生物科科学二等奖张阳20044级生物科科学二等奖刘凯20055级基地班班二等奖陈倩20044级生物科科学二等奖黄琼20044级生物技技术二等奖姜含芳20055级基地班班二等奖唐贵华20033级生物科科学二等奖覃梅芳20044级生物科科学三等奖莫敏俐20044级基地班班三等奖廖小兵20044级生物技技术三等奖刘宇20044级生物科科学三等奖陈显胜20055级生物科科学三等奖钟欢20033级生物科科学
14、三等奖杨清20044级生物科科学三等奖刘女英20044级生物技技术三等奖罗贵朋20055级生物科科学三等奖伍平20055级生物科科学三等奖刘坤20055级生物科科学三等奖周丽娅20033级基地班班三等奖黄静20044级生物科科学三等奖马仲辉20044级生物科科学三等奖易小慧20055级生物科科学三等奖梁小平20055级生物科科学三等奖蒋东征20055级生物科科学三等奖唐贝妮20055级生物科科学三等奖王玉刚20044级基地地班第十届“挑战杯杯”全国大大学生课课外学术术科技作作品竞赛赛三等奖20077刘华友20044级生物物科学国家奖学学金20077欧阳书珍珍20055级生物物科学国家奖学学金2
15、0077黄静20044级生物物科学校教育实实习优秀秀教案20077王星20044级生物物科学校教育实实习优秀秀教案20077刘华友20044级生物物科学校教育实实习优秀秀教案20077王星20044级生物物科学校教育实实习优秀秀调查报报告三等奖20077邓亚飞20044级生物物科学校教育实实习优秀秀多媒体体课件一等奖20077常彬20044级生物物科学校教育实实习优秀秀多媒体体课件二等奖20077唐盈盈20044级生物物科学校教育实实习优秀秀多媒体体课件三等奖20077刘女英20044级生物物技术湖南省优优秀毕业业生20088刘标20044级生物物科学湖南省优优秀毕业业生20088莫敏俐200
16、44级基地班班湖南省优优秀毕业业生20088陈超龙20044级基地班班湖南省优优秀毕业业生2008819人20044级校级优秀秀毕业生生20088王驰20055级基地地班防近视笔笔国家实用用新型专专利20088集体20055级基地地班湖南省普普通高等等学校先先进班集集体20088莫敏俐20055级基地地班湖南省普普通高等等学校三三好学生生200882湖南南师范大大学生命命科学学学院本科科学生研研究创新新性实验验优秀论论文（报报告）选选编副溶血弧弧菌中一一具 MMg2+转运功功能的MMgtEE基因的的分子克克隆与功功能鉴定定学院：湖湖南师范范大学生生命科学学学院学生姓名名：于峰峰 学号号：N44
17、103302004 专业业：生物物技术 班班级 220033-2 学生姓名名：姚力力群 学号：N41103002066 专业：生物技技术 班级级 20003-2 学生姓名名：李晴晴波 学号：N41103001366 专业：生物技技术 班级级 20003-1 指导老师师：李东东屏副教教授摘要：MMgtEE基因家家族是最最初在细细菌中发发现的一一类具有有 Mgg2+转运运能力的的基因家家族。基基因组数数据库搜搜索显示示副溶血血弧菌（VVibrrio parrahaaaemmolyyticcus RIMMD 2221006333，VPP）中存存在一MMgtEE基因家家族成员员。我们们克隆了了该基因因
18、并将之之命名为为VP- MggtE。并并利用沙沙门氏杆杆菌突变变株MMM2811作为宿宿主菌进进行了功功能互补补实验。此此外,该该基因的的表达也也提高了了该菌株株对铝毒毒害的抗抗性。同同时我们们运用定定点突变变的方法法研究了了VP- MggtE中中的保守守氨基酸酸残基对其其功能的的影响。关键词: VVP- MgttE ; Mg22+转运运体 ; 副副溶血弧弧菌; 定点突突变 ；铝毒害害Moleecullar Clooninng aand Chaaraccterrizaatioon oof tthe VP-MgttE, a PPutaativve MMg2+ Trranssporrterr fr
19、rom Vibbrioo paarahhaaeemollytiicussYu FFengg LLiquun YYao Qinngboo Lii（Colllegge oof LLifee Scciennce,Hunnan Norrmall Unniveersiity,Chaangssha 41000811,Huunann,Chhinaa）Absttracct: MgttE ggenee faamilly, whiich wass fiirstt fooundd inn baacteeriaa, hhas thee abbiliity to takke uup MMg2+. Geenommic s
20、eqquennce datta iindiicatted thee prreseencee off MggtE hommoloog iin tthe graam-nnegaativve bbactteriial Vibrrio parrahaaaemmolyyticcus. Wee clloneed aand nammed it as VP-MgttE. Thee sttudyy shhoweed tthatt VPP-MggtE couuld funnctiionaallyy coompllemeenteeda sallmonnellla mmutaant MM2281 whiich lac
21、cks in Mg22+upptakke ccapaabillityy. MMM2881 mmutaant traansfformmed witth VVP-MMgtEE shhoweed rresiistaancee too allumiinumm ioon. Sitte-ddireecteed mmutaagennesiis bby ooverrlapp exxtennsioon bby PPCR wass ussed to stuudy thee rooless off thhe kkey amiino aciid rresiiduees oof tthe prooteiin. Key
22、worrd: VP-MgttE, Maggnessiumm Trranssporrterr, VVibrrio parrahaaaemmolyyticcus, Siite-dirrectted muttageenessis, Allumiinumm ioon ttoxiicitty1. 引引言Mg2+是生活活细胞中中含量最最丰富的的二价金金属离子子,其在在一系列列酶促反反应中作作为辅因因子起作作用。缺缺失足够够的 MMg2+,核糖糖体亚单单位将会会分离,同时细细胞膜也也会变成成松弛渗渗漏的状状态。离离子状态态的镁调调节许多多重要的的酶促代代谢,还还可通过过特定的的金属结结合位点点在膜蛋蛋白通道
23、道中起作作用11。Mg2+具有独独特的化化学特性性, MMg2+具有最最大的水水合半径径,最小小的离子子半径和和最高的的电荷密密度。其其水合半半径是其其离子半半径的4400倍倍。而同同为丰富富金属离离子的CCa2+ 和NNa+的相应应半径比比却只有有25倍倍,K+ 的相相应半径径比最小小,仅44倍。由于细胞胞膜给离离子的进进出细胞胞形成了了一道屏屏障。故故离子进进出细胞胞必须通通过膜上上特定的的转运蛋蛋白来实实现。一一般认为为转运蛋蛋白可分分为离子子通道和和载体蛋蛋白两大大类。载载体蛋白白转运底底物时是是与其它它物质偶偶联进行行的，具具有和酶酶一样的的底物饱饱和性，编编码载体体蛋白的的基因的的
24、表达也也常常受受到外界界底物浓浓度的影影响，一一般是在在低底物物浓度时时，其基基因的表表达水平平会提高高。由于 MMg2+独特的的几何特特性和化化学特性性,有人人猜测其其转运系系统也具具独特性性，细菌菌中的研研究支持持该假说说2。目前前,整个个生物界界中已发发现有五五大 MMg2+转运家家族:CCorAA家族,Mg22+ /H+ 交换换体,离离子通道道,P型型磷酸酶酶和MggtE基基因家族族3。 主主要的 Mg22+转运运家族是是细菌中中的CoorA家家族,蛋蛋白拓扑扑分析显显示其具具有独特特结构：N端有有一个大大的，酸酸性的周周质区，CC端有22个疏水水的跨膜膜区，有有很强的的螺旋性性。Co
25、orA序序列上存存在保守守基序GGMN，是是其转运运Mg22+所必必需的，若若GMNN基序中中有一个个氨基酸酸突变，其其转运能能力就会会丧失14。最近近,Lii等人利利用功能能克隆策策略在拟拟南芥中中发现了了一与CCorAA基因结结构类似似的基因因家族4。表表明CoorA基基因广泛泛分布于于自然界界中。AALR11和ALLR2是是在酵母母中发现现的一类类CorrA基因因，在酵酵母中过过量表达达ALRR蛋白可可提高其其对铝毒毒害的抗抗性115。MgtAA/B是是S.ttyphhimuuriuum中发发现的另另外两个个具Mgg2+转运运能力的的基因，两两个都是是大的复复合跨膜膜蛋白，属属于P型型磷
26、酸酶酶家族。它它们的表表达受到到低浓度度Mg22+的诱诱导55。MgtEE基因家家族首先先在Baacillluss fiirmuus OOF4中中被Roonalld等人人在寻找找新的CCorAA基因时时发现。 目前一一般认为为其具有有五个跨跨膜区。其其跨膜区区的分布布和CoorA具具相似性性，都主主要分布布于C端端，其NN端位于于胞质区区。MggtE和和CorrA两基基因家族族在转运运离子的的类别上上也具有有部分相相似性。MMgtEE的突变变株和CCorAA一样可可增强对对Co22+的抗抗性。MMgtEE可功能能互补缺缺失CoorA,MgttA,MMgtBB Mgg2+转运运系统的的沙门氏氏杆
27、菌突突变株MMM288155,使使其可在在低浓度度 Mgg2+浓度度(1000 mMM)下达达到最佳佳生长速速度。结结合功能能互补的的方法，它它可作为为一个研研究Mgg2+转运运的很好好的系统统。表达达了VPP-MggtE的的MM2281重重组菌株株可在低低浓度 Mg22+情况况下生长长, 甚甚至在不不加 MMg2+的LBB培养基基上生长长。而其其阴性对对照MMM2811,pTTrc999A-MM2281则则只能在在大于110mMM的N-minnimaal培养养基上生生长。（见见图2）。结结果可以以说明VVP-MMgtEE的表达达互补了了MM2281在在Mg22+转运运上的功功能缺失失，使之之
28、重新具具有了MMg2+转运能能力。从从而使其其可在含含低浓度度（110mMM）Mgg2+的培培养基中中生长。生生长曲线线结果也也再次证证明了目目的基因因的转运运能力。由由图3(A)和和 图33(B)可知,表达了了目的基基因的MMM2881转化化子可在在 1000 M的NN-miinimmal培培养基中中生长。而而阴性对对照只能能在100 mMM的培养养基中生生长。图2MMM2811。MMM2811-pTTrc,MM2281-VP-MgttE在添添加了不不同Mgg2+浓浓度的NN-miinimmal互互补平板板上的生生长结果果.33. VPP-MggtE的的表达改改变了MMM2881的离离子敏感
29、感性已有研究究显示,当细菌菌中积累累一定量量的重金金属离子子(如CCo2+,Cd2+,Mn2+,Zn2+ )时时，就会对对细菌本本身产生生毒害作作用并使使之死亡亡。由图图4可知知,表达达了VPP-MggtE基基因的转转化子增增加了对对Ni22+ ，CCo2+ , Mnn2+ , CCu2+ 的敏敏感性,当Nii2+ ，Coo2+ , MMn2+ , Cuu2+离子子浓度达达到5000M, 5000M, 5000M, 1 mmM 时时,表达达了目的的基因的的菌株就就会死亡亡，我们们可以认认为VPP-MggtE有有 Coo2+ , Cdd2+, Mn22+ , ZZn2+ , Nii2+, Fe2
30、2+ , Cuu2+离子子的转运运能力。我我们也做做了Caa2+的实实验,但但没有发发现差别别。图3-AA MMM2881,MMM2881-ppTrcc,MMM2811-VPP-MggtE 在100 mMM Mgg2+ 的N-minnimaal培养养基中的的生长结结果。实实验结果果为三次次不同时时间下结结果的平平均值。MMM2881（实实心圆），ppTrcc（空心心圆），VP-MMgtEE（实心心三角）图3-BBMM2281,MM2281-pTrrc,MMM2881-VVP-MMgtEE 在1100M MMg2+。 的的N-mminiimall培养基基中的生生长结果果。实验验结果为为3次不同同时间下下结果的的平均值值。MMM2811（实心心圆），ppTrcc（空心心圆），VP-MgttE（实实心三角角）3. 44. VVP-MMgtEE的表达达提高了了MM2281对对铝毒害害的抗性性。 研研究表明明当pHH6时时铝离子子就可从从结合态态释放出出来产生生毒害作作用116。我我们在ppH=55时研究究了VPP-MggtE的的铝抗性性，我们们发现VVP-MMgtEE的表达达可提高高MM2281对对铝毒害害的抗性性。结果果见图55。同时时，为了了证实确确实是AAl3+而不是是Cl-在起毒毒害作用用，我们们也做了了KCll的实验验,与对对照相比比，我们们没有发发