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1、第一节 微生物细胞的化学组成元素细菌酵母菌霉菌C5049.847.9H86.76.7O2031.140.2N1512.45.2一、水（一、水（water）二、干物质（二、干物质（dry material）微生物蛋白质糖类脂类核酸灰分物质细菌508012185201020230酵母菌32752763215683.87霉菌14157404401612第三章第三章 微生物的营养与培养 1、碳原：碳原：构成微生物细胞及其代谢产物中碳素来源的构成微生物细胞及其代谢产物中碳素来源的物质，是化能异养微生物的能量来源。物质，是化能异养微生物的能量来源。种类：种类：二氧化碳等无机含碳化合物二氧化碳等无机含碳化合
2、物 小分子有机物，如葡萄糖、蔗糖等小分子有机物，如葡萄糖、蔗糖等 大分子有机物，如淀粉、酯类等大分子有机物，如淀粉、酯类等 第二节 微生物的营养物质 2、氮原：氮原：N2 固氮微生物固氮微生物有机含氮化合物无机含氮化合物第二节 微生物的营养物质 蛋白质（鱼粉，豆饼粉等）蛋白胨牛肉膏生理酸式盐：(NH4)2SO4生理碱式盐：NaNO3生理中性盐：NH4 NO3 3、水水细胞的重要组分细胞的重要组分细胞生化反应的介质及反应物细胞生化反应的介质及反应物物质运输的载体物质运输的载体调控细胞温度调控细胞温度 第二节 微生物的营养物质 4、矿物元素（无机盐）矿物元素（无机盐）主要元素（大量元素）主要元素（
3、大量元素）P,S,K,Mg等元素通常以无机盐的形等元素通常以无机盐的形式添加式添加微量元素微量元素 通常不需单独添加通常不需单独添加 第二节 微生物的营养物质 5、生长素生长素有些微生物生长必需的微量有有些微生物生长必需的微量有机物质机物质 常见的生长素有：常见的生长素有：氨基酸，维生素，核苷酸等氨基酸，维生素，核苷酸等 第二节 微生物的营养物质 自养型微生物自养型微生物 可以在纯无机环境下生长的一类微生物光能自养型光能自养型化能自养型化能自养型异养型微生物异养型微生物 必须依赖一种或一种以上可以吸收、利用有机物的存在才能生长的一类微生物光能异养型光能异养型化能异养型化能异养型第三节 微生物的
4、营养类型第四节 营养物质的吸收一、被动运输一、被动运输（passive transport）不耗能，运输的方向取决于被运输物的浓度差 (一一)被动扩散（被动扩散（passive diffusion）n无渗透酶参与无渗透酶参与n特异性差特异性差n运输速度慢运输速度慢一、被动运输一、被动运输（passive transport）(一一)被动扩散（被动扩散（passive diffusion）(二二)促进扩散（促进扩散（facilitated diffusion）n有渗透酶参与有渗透酶参与n特异性高特异性高n运输速度快运输速度快第四节 营养物质的吸收第四节 营养物质的吸收二、主动运输（二、主动运输（
5、active transport）耗能，可逆浓度梯度运输耗能，可逆浓度梯度运输有渗透酶参与，运输特异性高有渗透酶参与，运输特异性高运输速度快运输速度快 (一一)主动运输主动运输不改变被运输物的结构不改变被运输物的结构(二二)基团转位（基团转位（group translocation）改变被运输物的结构改变被运输物的结构 第五节 微生物的培养一、一、培养基培养基 （一）培养基的类型（一）培养基的类型1 1、根据营养物的来源、根据营养物的来源l天然培养基天然培养基l合成培养基合成培养基2 2、根据培养基的物理性状、根据培养基的物理性状l固体培养基固体培养基l液体培养基液体培养基l半固体培养基半固体
6、培养基3 3、根据培养基的用途、根据培养基的用途l普通培养基普通培养基l鉴别培养基鉴别培养基l选择培养基选择培养基 一、培养基 （二）（二）配制培养基的一般原则配制培养基的一般原则 1.选用合适的营养物质选用合适的营养物质 2.确定各营养物的适当配比确定各营养物的适当配比 3.基质环境的调节基质环境的调节 4.营养原料的经济性营养原料的经济性 一、培养基 （三）常用培养基的配制（三）常用培养基的配制 普通细菌培养基：普通细菌培养基：配方：配方：牛肉膏5g蛋白胨10g NaCl5g水1000ml或用营养琼脂配制或用营养琼脂配制 一、培养基 （三）常用培养基的配制（三）常用培养基的配制 放线菌培养
7、基：放线菌培养基：配方：配方：可溶性淀粉20g硝酸钾1g硫酸镁0.5g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸亚铁0.01g水1000ml（三）常用培养基的配制（三）常用培养基的配制 酵母菌培养基：酵母菌培养基：n麦芽汁培养基n豆芽汁培养基n马铃薯培养基 n麦芽汁培养基配制方法：干麦芽粉加4倍重量的水，5560C保温糖化34hr，碘液检验无变色后煮沸过滤，适当稀释调节pH至，分装灭菌。一、培养基 一、培养基n马铃薯培养基 n察氏培养基 配方：配方：（三）常用培养基的配制（三）常用培养基的配制 霉菌培养基：霉菌培养基：硝酸钠3g氯化钾0.5g磷酸氢二钾1g硫酸亚铁0.01g硫酸镁0.5g蔗糖30g水
8、1000ml 一、培养基（三）常用培养基的配制（三）常用培养基的配制 一、培养基（四）培养基的灭菌（四）培养基的灭菌 高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌 间歇灭菌间歇灭菌 过滤除菌过滤除菌 二、实验室用具和材料的灭菌技术 （一）干热灭菌（一）干热灭菌1 1、焚烧法、焚烧法适用范围：接种针适用范围：接种针 污染废弃物污染废弃物 二、实验室用具和材料的灭菌技术 （一）干热灭菌（一）干热灭菌1 1、焚烧法、焚烧法2 2、电热干燥箱灭菌、电热干燥箱灭菌l适用对象：不含水的器皿适用对象：不含水的器皿l应用条件：应用条件：160160，1 12h2hl操作方法：包装器皿操作方法：包装器皿 二、实验室用具和材料的灭菌
9、技术 二、实验室用具和材料的灭菌技术二、实验室用具和材料的灭菌技术 （二）湿热灭菌（二）湿热灭菌l适用对象：适用对象：含水基质或易燃物品，含水基质或易燃物品，如培养基、无菌水，工作服等如培养基、无菌水，工作服等l灭菌方法灭菌方法l高压蒸汽灭菌：高压蒸汽灭菌：121121，151530 min30 minl间间歇歇灭灭菌菌：100100，每每天天处处理理一一次（约次（约30min30min），一般需三次），一般需三次安全阀二、实验室用具和材料的灭菌技术（三）无菌室的灭菌（三）无菌室的灭菌三、培养微生物的一般方法 （一）好氧培养（一）好氧培养l实验室实验室l固体培养：固体培养：平皿、试管斜面平皿、
10、试管斜面三、培养微生物的一般方法 （一）好氧培养（一）好氧培养l实验室实验室l液体培养：液体培养：摇瓶摇瓶 小型发酵罐小型发酵罐三、培养微生物的一般方法（一）好氧培养（一）好氧培养l实验室实验室l液体培养：液体培养：摇瓶摇瓶 小型发酵罐小型发酵罐三、培养微生物的一般方法（一）好氧培养（一）好氧培养l工业生产工业生产l液态：大型发酵罐液态：大型发酵罐l固态：浅盘，深层通风固态：浅盘，深层通风 三、培养微生物的一般方法（二）厌氧培养（二）厌氧培养l去除氧气去除氧气l通入其他气体（如二氧化碳、氮气等）通入其他气体（如二氧化碳、氮气等）微生物纯种分离（一）划线分离法（一）划线分离法 微生物纯种分离（二）涂布分离法（二）涂布分离法 微生物纯种分离（三）定量稀释分离法（三）定量稀释分离法 微生物纯种分离（四）富集分离法（四）富集分离法l 利用选择培养基利用选择培养基（五）单孢挑选分离法（五）单孢挑选分离法l 利用特殊的显微操作仪利用特殊的显微操作仪