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遗传病的分析3培养细胞的染色体制备,定 义,在细胞的生长周期中，中期染色体的长短、大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研究。因此利用人工的方法，使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化，并获得之，经处理，制片后观察分析。,器 材,细胞株普通光学显微镜冰载玻片酒精灯,试 剂,0.25%胰旦白酶液0.075M KCL秋水仙素固定液（冰醋酸/甲醇 1:3）Giemsa染液,操 作,1. 收集细胞前6h，培养细胞中加5ug/ml秋水仙素2滴，混匀后继续培养2. 0.25%胰旦白酶液消化细胞，并收集细胞于离心管中3. 离心1800转/min10min，弃上清，取沉淀4. 加0.075M KCL低渗液4ml，充分打匀细胞，室温静置20min5. 再加入固定液1ml，并与原有的低渗液充分混匀，室温静置5min6. 离心，弃上清，取沉淀,操 作,7. 加固定液5ml，轻轻打匀，室温静置30min8. 离心，弃上清，取沉淀9. 加少量固定液，制成染色体悬液10. 取1-2滴染色体悬液，滴加在冰玻片上，迅速吹片，酒精灯下烤干玻片11. Giemsa染色5min，自来水冲洗，待干 后，显微镜下观察,光镜100倍下人染色体G带照片,注 意,浓度与时间 秋水仙素、低渗临用时新鲜配制 固定液、染液固定液的比例制片和染色,