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遗传病的分析遗传病的分析3培养细胞的染色体制备定定 义义n在细胞的生长周期中，中期染色体的长短、大小、恒定性正适合我们对其进行分析、研究。n因此利用人工的方法，使大部分分裂细胞处于中期而不向后期转化，并获得之，经处理，制片后观察分析。器器 材材n细胞株n普通光学显微镜n冰载玻片n酒精灯试试 剂剂n0.25%胰旦白酶液n0.075M KCLn秋水仙素n固定液（冰醋酸/甲醇 1:3）nGiemsa染液操操 作作1.收集细胞前6h，培养细胞中加5ug/ml秋水仙素2滴，混匀后继续培养2.0.25%胰旦白酶液消化细胞，并收集细胞于离心管中3.离心1800转/min10min，弃上清，取沉淀4.加0.075M KCL低渗液4ml，充分打匀细胞，室温静置20min5.再加入固定液1ml，并与原有的低渗液充分混匀，室温静置5min6.离心，弃上清，取沉淀操操 作作7.加固定液5ml，轻轻打匀，室温静置30min8.离心，弃上清，取沉淀9.加少量固定液，制成染色体悬液10.取1-2滴染色体悬液，滴加在冰玻片上，迅速吹片，酒精灯下烤干玻片11.Giemsa染色5min，自来水冲洗，待干 后，显微镜下观察光镜100倍下人染色体G带照片注注 意意n浓度与时间 秋水仙素、低渗n临用时新鲜配制 固定液、染液n固定液的比例n制片和染色