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1、【同济医科大学】优质课全国特级教师 江新欢 博士教授医学微生物学医学微生物学第四章第四章 真菌学总论真菌学总论第四章第四章 真菌学总论真菌学总论1.真菌及其分类真菌及其分类2.真菌的形态与结构真菌的形态与结构3.真菌的培养特点真菌的培养特点4.真菌的致病性真菌的致病性重点与难点重点与难点真菌真菌(fungus)：真核细胞型真核细胞型微生物微生物组成：组成：核膜和核仁核膜和核仁(细胞核细胞核)完整的细胞完整的细胞器器(胞浆胞浆)单细胞单细胞（少数少数）或）或多细胞多细胞（多（多数数）生存方式生存方式：腐生腐生或或寄生寄生繁殖方式繁殖方式：有性有性或或无性无性 概概 述述分布广泛、种类繁多分布广泛
2、、种类繁多多数有益多数有益少数有害：医学（病原）真菌少数有害：医学（病原）真菌400400种种 常见的有常见的有5050100100种种目前真菌病呈明显上升趋势：目前真菌病呈明显上升趋势：抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的滥用器官移植、介入性治疗等新型技术的开展器官移植、介入性治疗等新型技术的开展艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病造成宿主免疫艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等疾病造成宿主免疫功能低下功能低下传统分类传统分类最新分类最新分类第一节第一节 真菌的生物学性状真菌的生物学性状形态形态：多种多样多种多样 有有典型的典型的核结构和细胞器核结构和细胞器按形态、结构分
3、为按形态、结构分为两类两类：单细胞真菌单细胞真菌多细胞真菌多细胞真菌形态与结构形态与结构圆形或椭圆形圆形或椭圆形包括：包括：-酵酵母母型型真真菌菌：无无菌菌丝丝，母母细细胞胞以以芽芽生生方方式式繁繁殖殖，菌菌落落与与细菌的菌落相似。细菌的菌落相似。-类类酵酵母母型型真真菌菌：母母细细胞胞以以芽芽生生方方式式繁繁殖殖，出出芽芽产产生生的的芽芽生生孢孢子子持持续续延延长长，但但不不断断裂裂、不不与与母母细细胞胞脱脱离离，产产生生相相互互连连接接成成藕藕节节状状较较长长的的细细胞胞链链，可可伸伸入入培培养养基基内内，称称假假菌菌丝丝 （pseudohypha）。单细胞真菌单细胞真菌基本结构：基本结构
4、：菌丝菌丝和和孢子孢子-菌菌丝丝（hypha）：孢孢子子生生出出嫩嫩芽芽，称称为为芽芽管管管逐渐延长呈丝状，称为菌丝。管逐渐延长呈丝状，称为菌丝。-孢孢子子（spore）：真真菌菌的的生生殖殖结结构构，由由生生殖殖菌丝产生。菌丝产生。多细胞真菌多细胞真菌菌丝体（菌丝体（mycelium）：菌丝交织成团）：菌丝交织成团根据功能不同分为：根据功能不同分为：营养菌丝（营养菌丝（vegetative mycelium）气生菌丝（气生菌丝（aerial mycelium）生殖菌丝（生殖菌丝（reproductive mycelium）菌菌 丝丝 真菌的有隔、无隔菌丝（真菌的有隔、无隔菌丝（400）根据隔
5、膜的消长分为：根据隔膜的消长分为：有隔菌丝（大部分病原性丝状菌）有隔菌丝（大部分病原性丝状菌）无隔菌丝无隔菌丝根据形态不同分为：根据形态不同分为：单纯菌丝单纯菌丝 球拍状菌丝球拍状菌丝 破梳状菌丝破梳状菌丝 螺旋状菌丝螺旋状菌丝 结节状菌丝结节状菌丝 鹿角状菌丝等鹿角状菌丝等鉴别和分类鉴别和分类的依据的依据 真菌的各种菌丝真菌的各种菌丝 生生殖殖结结构构，由由生生殖殖菌菌丝丝产产生生，是是鉴鉴定定和分类的主要依据。和分类的主要依据。无性孢子无性孢子 不不经经两两性性细细胞胞配配合合而而产产生生的的孢孢子子。病病原性真菌大多数产生无性孢子。原性真菌大多数产生无性孢子。有性孢子有性孢子 细细胞胞间
6、间配配合合（质质配配和和核核配配）后后产产生生，绝大多数为非致病性真菌所具有。绝大多数为非致病性真菌所具有。孢孢 子子接合孢子接合孢子 子囊孢子子囊孢子 担担（子）（子）孢子孢子有性孢子有性孢子叶状孢子（叶状孢子（thallospore）芽生孢子（芽生孢子（blastospore）关节孢子（关节孢子（arthrospore）厚膜孢子（厚膜孢子（chlamydospore）分生孢子分生孢子（conidia）大分生孢子（大分生孢子（macroconidia）小分生孢子（小分生孢子（microconidia）孢子囊孢子（孢子囊孢子（sporangiospore）无性孢子无性孢子 真菌的叶状孢子真菌的
7、叶状孢子 真菌的大分生孢子真菌的大分生孢子真菌的小分生孢子真菌的小分生孢子 真菌的子囊及子囊孢子真菌的子囊及子囊孢子依靠孢子及菌丝进行繁殖依靠孢子及菌丝进行繁殖繁殖方式繁殖方式：无性繁殖无性繁殖真菌的主要繁殖方式真菌的主要繁殖方式 有性繁殖有性繁殖真菌的繁殖与培养真菌的繁殖与培养无性繁殖主要包括：无性繁殖主要包括：芽生芽生 母细胞发芽产生。常见于酵母型和类酵母母细胞发芽产生。常见于酵母型和类酵母型真菌。型真菌。裂殖裂殖 母细胞二分裂产生。如裂殖酵母。母细胞二分裂产生。如裂殖酵母。芽管芽管 萌发芽管，伸延形成菌丝。萌发芽管，伸延形成菌丝。隔殖隔殖 分生孢子梗形成一隔膜，原生质浓缩形成分生孢子梗形
8、成一隔膜，原生质浓缩形成新孢子。新孢子。培养特性培养特性培养基：营养要求不高，常用沙氏葡萄糖琼脂培培养基：营养要求不高，常用沙氏葡萄糖琼脂培养基（养基（SDA）、马铃薯葡萄糖琼脂培养基）、马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）、察氏培养基（）、察氏培养基（Czapek-Dox Agar）、）、脑心浸膏琼脂培养基（脑心浸膏琼脂培养基（BHI）温度：温度：3737（酵母型和类酵母型真菌）（酵母型和类酵母型真菌）25 252828（丝状真菌）（丝状真菌）最适最适pH：4.04.06.06.0 生长速度：多数病原性真菌生长缓慢生长速度：多数病原性真菌生长缓慢SDA培养基上，可形成培养基上，可形成3 3种类型
9、菌落：种类型菌落：1.1.酵母型菌落（酵母型菌落（yeast type colony）芽生孢子，无菌丝。如新生隐球菌芽生孢子，无菌丝。如新生隐球菌2.2.类类酵酵母母型型菌菌落落（酵酵母母样样菌菌落落）（yeast-like type colony）呈藕节状细胞链的假菌丝。如白假丝酵母呈藕节状细胞链的假菌丝。如白假丝酵母3 3.丝状型菌落丝状型菌落（filamentous type colony）菌落形态和颜色可作为鉴定、分类的参考菌落形态和颜色可作为鉴定、分类的参考依据。见于大多数依据。见于大多数丝状真菌丝状真菌变异性变异性 形态、结构、及生理性状（毒力）等。形态、结构、及生理性状（毒力）等
10、。抵抗力抵抗力对热抵抗性对热抵抗性不强不强（孢子（孢子6060经经1 1 h即杀灭）即杀灭）耐受耐受：干燥、紫外线及多种化学药物干燥、紫外线及多种化学药物等等敏感：敏感：1 1 3 3石炭酸、石炭酸、2.52.5碘酊及碘酊及1010甲醛液甲醛液变异性与抵抗力变异性与抵抗力第二节第二节 真菌的致病性与免疫性真菌的致病性与免疫性真菌感染真菌感染 真菌性超敏反应真菌性超敏反应 真菌毒素中毒真菌毒素中毒 致病性致病性真菌病（真菌病（mycoses）：）：由真菌引起的感染，并表现临床症状由真菌引起的感染，并表现临床症状原发性感染：致病性真菌原发性感染：致病性真菌 球孢子菌（球孢子菌（coccidiode
11、s）皮炎芽生菌（皮炎芽生菌（blastomyoes dermatitidis）组织胞浆菌（组织胞浆菌（histoplasma）马尔尼菲青霉（马尔尼菲青霉（penicillium marneffei）等）等继发性感染：机会致病性真菌继发性感染：机会致病性真菌 机体免疫功能显著下降时发生机体免疫功能显著下降时发生真菌感染真菌感染 按性质分类：按性质分类：感染性超敏反应：感染性超敏反应：感染，感染，型型 接触性超敏反应：接触性超敏反应：吸入或食入，吸入或食入，型型按部位分类按部位分类:皮肤超敏反应皮肤超敏反应 呼吸道超敏反应呼吸道超敏反应 消化道超敏反应消化道超敏反应 真菌性超敏反应真菌性超敏反应来
12、源：真菌代谢产生毒素，存在于农作物、来源：真菌代谢产生毒素，存在于农作物、食物或饲料中食物或饲料中表现：表现：1.1.肝、肾、神经、造血系统等损伤肝、肾、神经、造血系统等损伤2.2.致癌（黄曲霉毒素等）致癌（黄曲霉毒素等）真菌真菌毒素中毒毒素中毒非特异性免疫非特异性免疫 皮肤粘膜屏障作用皮肤粘膜屏障作用正常菌群拮抗作用（白假丝酵母菌）正常菌群拮抗作用（白假丝酵母菌）吞噬作用吞噬作用特异性免疫特异性免疫 细胞免疫细胞免疫体液免疫体液免疫 免疫性免疫性第三节第三节 真菌的微生物学检查法真菌的微生物学检查法浅部：鳞屑、病发或甲屑浅部：鳞屑、病发或甲屑深部：痰、脓、血、尿、便、脑脊液、深部：痰、脓、血
13、、尿、便、脑脊液、胸水及分泌物等胸水及分泌物等注意：标本应足量、新鲜注意：标本应足量、新鲜严格无菌操作严格无菌操作资料应齐全资料应齐全标本的采集标本的采集直接镜检：直接镜检：标本处理（标本处理（10%KOH）涂片染色（革兰染色、墨汁染色）涂片染色（革兰染色、墨汁染色）分离培养：分离培养：含抗生素和放线菌酮的含抗生素和放线菌酮的SDA、PDA酵母型和类酵母型真菌酵母型和类酵母型真菌：37 37，革兰染色，革兰染色丝状真菌：丝状真菌：2525，乳酸酚棉兰染色，乳酸酚棉兰染色形态学检查形态学检查血清学检查血清学检查检测：检测：真菌抗原、代谢产物及机体产生的抗体真菌抗原、代谢产物及机体产生的抗体抗原：
14、抗原：1,3-D-葡聚糖（葡聚糖（G试验）试验）甘露聚糖（甘露聚糖（EIA法或法或FACE）半乳甘露聚糖（半乳甘露聚糖（GM试验）试验）隐球菌荚膜多糖（乳胶凝聚试验）隐球菌荚膜多糖（乳胶凝聚试验）血清学检查血清学检查抗体：抗体：甘露聚糖抗体（凝胶对流电泳）甘露聚糖抗体（凝胶对流电泳）烯醇化酶抗体（凝集试验）烯醇化酶抗体（凝集试验）马尔尼菲青霉抗体（马尔尼菲青霉抗体（ELISA法）法）代谢产物：代谢产物：D-阿拉伯糖醇（酶荧光法）阿拉伯糖醇（酶荧光法）烯醇化酶（斑点印迹法或烯醇化酶（斑点印迹法或DFA）核酸核酸G+C mol%测定测定PCR相关技术：巢氏相关技术：巢氏PCR、复合、复合PCR、荧
15、光、荧光PCR等等DNA指纹技术：指纹技术：RFLP、DGGE、SSCP等等核酸杂交：原位杂交、核酸杂交：原位杂交、RDB、基因芯片技术等、基因芯片技术等DNA特殊序列分析：特殊序列分析：ITS、LSU、TEF、线粒体、线粒体 cyt b、CO和和CO、-微管蛋白等基因微管蛋白等基因核酸检测核酸检测第四节第四节 真菌感染的防治原则真菌感染的防治原则皮肤癣菌：皮肤癣菌：注意清洁卫生，避免接触注意清洁卫生，避免接触 局部使用特比萘芬、酮康唑、局部使用特比萘芬、酮康唑、咪康唑或克霉唑咪康唑或克霉唑深部真菌病：深部真菌病：去除各种诱因，提高抵抗力去除各种诱因，提高抵抗力 常用氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑
16、、常用氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素两性霉素B、5-氟胞嘧啶、卡泊芬净、氟胞嘧啶、卡泊芬净、米卡芬净等米卡芬净等真菌性食物中毒：真菌性食物中毒：严禁食用发霉食品严禁食用发霉食品思考题思考题1.1.近年来真菌感染增多的原因有哪些？近年来真菌感染增多的原因有哪些？2.2.简述真菌的基本形态与结构。简述真菌的基本形态与结构。3.3.简述真菌的繁殖与培养特性。简述真菌的繁殖与培养特性。4.4.试述真菌的致病性。试述真菌的致病性。5.5.简述真菌感染的实验室检查方法。简述真菌感染的实验室检查方法。中英文关键词中英文关键词真菌真菌 fungus菌丝菌丝 hypha 孢子孢子 spore假菌丝假菌丝
17、pseudohypha双相型真菌双相型真菌 dimorphic fungi真菌病真菌病 mycoses课外阅读资料课外阅读资料专著专著王端礼王端礼.医学真菌学医学真菌学实验室检验指南实验室检验指南.北京北京:人民卫生出版社人民卫生出版社,2005,2005张宏张宏,廖万清廖万清,郭宁如郭宁如.实用临床真菌病学实用临床真菌病学.北京北京:人民军医出版社人民军医出版社,2009,2009邢来君邢来君,李明春李明春.普通真菌学普通真菌学.北京北京:高等高等教育出版社教育出版社,2010,2010温海温海,李若瑜李若瑜.医学真菌学医学真菌学.北京北京:人民卫人民卫生出版社生出版社,2012,20121
18、Casadevall A.Amoeba provide insight into the origin of virulence in pathogenic fungi.Adv Exp Med Biol.2012,710:1-10.2David SH,Anders O,Dylan G,et al.Progress in molecular and morphological taxon discovery in Fungi and options for formal classification of environmental sequences.Fungal Biology Review
19、s,2011,25(1),38-47.3Balajee SA,Sigler L,Brandt ME.DNA and the classical way:identification of medically important mold in the 21st century.Med Mycol.2007,45(6):475-4904Galluzzi L,Maqnani M,Saunders N,et al.Current molecular techniques for the detection of microbial pathogens.Sci Proq.2007,90(Pt 1):29-505Enoch DA,Ludlam HA,Brown NM.Invasive fungal infections:a review of epidemiology and management options.J Med Microbiol,2006,55(7):809-818.综述和论文综述和论文