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1、传代细胞的冻存与复苏SOP编号：SOP-ZL016-00页 码:12起草人起草日期颁发部门质量管理部审核人审核日期批准人批准日期生效日期分发清单研发部质量管理部 综合管理部生产管理部 市场销售部财务部版本号：01修订号：00机密等级：秘密1. 目的规范细胞的保存与复苏方法。2. 范围各种细胞的保存与复苏3. 职责3.1. 质量管理部：负责本程序的起草。3. 2.质量管理部QC人员：负责本程序的操作。4. 3.总经理：负责本程序的审批。5. 定义无6. 引用标准无。7. 材料8. 1.材料准备：9. 1. 1.DMEM 培养基10. 1.2.细胞消化液11. 1.3.二甲基亚飒6. 2.仪器设备
2、低速离心机、液氮罐7. 3. 器械、用具细胞冻存管、小试管8. 流程图无9. 内容10. 1.细胞保存8.1.1.将细胞按常规进行消化。8. 1. 2.将消化好的细胞加入小试管中。8. 1. 3.500-lOOOrpm 离心 10 分钟8. 1.4. 倒掉上清，加入已配制好的细胞保存液中（含10%二甲基亚碉的细胞生长 液）8. 1.5.轻轻吹打将细胞悬起，倒入细胞冻存管中。8.1.6.做好标记（包括细胞名称、细胞代数、冻存日期）。将冻存管放入带绳的纱布袋中。8. 1. 7.将纱布袋放入4c冰箱中预冷2小时。8. 1. 8.再放入-20冷冻柜中预冻2小时。8. 1.9.然后放入液氮中。做好记录。
3、在绳上做好标记。8. 2.细胞的复苏8. 2. 1.配制细胞生长液8. 2. 2.准备一杯40左右的温水8. 2.3.将准备复苏的细胞管从液氮中取出快速放入40左右的温水，使其以最短的时间融化。9. 2. 4.500-1000rpm 低速离心 10 分钟。10. 2. 5, 倒掉上清，用已配制好的细胞生长液将细胞悬起。10.6.6. 转入细胞培养瓶中。37c培养。10.6.7. 于次日细胞贴壁后，换掉液体。11. 注意事项11.6. 随时注意观察液氮罐中液氮液面，少于三分之一时及时添加。11.7. 从液氮中取出细胞时，注意不要冻伤。9. 3.把握细胞慢冻快融的原则，细胞复苏后的存活率比较高。10. 附录及派生记录11. 1.无12. 相关文件无13. 修订记录修订号修改内容生效日期