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1、离体模拟消化实验的测定离体模拟消化程序采用胃蛋白酶-胰酶两步消化法。样品干物质和粗蛋白分别参照GB/T 6435-2014和GB/T 6432-2018胃消化阶段:准确称取试样(40目),置于三角瓶中,准确加入 0.2mol/LpH=6.0磷酸缓冲溶液15mL, 0.2mol/L盐酸溶液10mL,新鲜胃蛋白酶溶 液(40mg/mL)lmL ,0.5%氯霉素溶液0.5mL,用lmol/L盐酸调节溶液调节pH=2.0, 封口,在40恒温摇床120r/min震荡4h。小肠消化阶段:待胃消化阶段结束以后,向食糜中加入0.2moL/LpH=6.8磷 酸缓冲溶液10mL, 0.6mol/L氢氧化钠溶液5m
2、L,新鲜胰酶溶液(80mg/mL)1mL, 用lmol/L氢氧化钠溶液调节溶液调节pH=6.8,封口,在40c恒温摇床120r/min 震荡4ho小肠消化阶段结束以后,向食糜中加入5mL20%磺基水杨酸溶液,静止30min , 然后将所有食糜转移至滤纸过滤,温水冲洗残渣,105c烘干残渣至恒重,测定 干物质和粗蛋白的含量。根据样品及其消化残渣中的干物质和粗蛋白含量,分别 计算干物质体外消化率和粗蛋白体外消化率。公式:干物质体外消化率炉(样品 干物质-消化残渣干物质)/样品干物质xl00%粗蛋白体外消化率%=(样品粗蛋白含量x称样量-残渣粗蛋白含量x残渣量)/ (样品粗蛋白含量x称样量)xlOO%