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1、综合康复疗法对胫腓骨骨折术后患者骨折愈合速度的影响3244态明显不同12,建立了两段法培养模式:第1阶段为黑素细胞纯化阶段,注意了3个关键点:真表皮别离.采用Displtte酶使真表皮在基底膜带处别离,用镊子小心撕取表皮,防止表皮沾染真皮成纤维细胞.差速贴壁法接种原代表皮细胞.角质形成细胞比黑素细胞贴壁慢,而且不宜在含血清普通培养基中生长,因此接种1h后大部分角质形成细胞尚未贴壁,黑素细胞大局部贴壁,此时更换为黑素细胞培养液,可以除去大局部尚未贴壁的角质形成细胞.在细胞传代时,利用胰蛋白酶差速消化法(黑素细胞贴壁没有角质形成细胞牢)去除角质形成细胞.经实验反复验证,经以上方法培养的细胞很纯,经
2、电镜观察该细胞含有黑素颗粒;L-Dopa染色阳性,获得黑素细胞纯度100%.第2阶段为优化扩增阶段.待黑素细胞纯化后,用不含TPA的培养基继续扩增传代,细胞形态由细的多分支状逐渐增宽变为梭形,生长速度减慢,细胞周期显示增殖减缓.该培养条件中所用添加剂ET.1是许多细胞的促分裂剂,可由角质形成细胞合成分泌,能促进黑素细胞分裂;bFGF体内多处存在,主要由成纤维细胞分泌,能明显促进含黑素细胞在内的多种细胞分裂增殖,其产品已在临床广泛应用.因此此时培养出的黑素细胞作为移植物更加平安.结论:先用含有TPA培养液纯化培养黑素细胞,然中国临床康复8卷第,72004.06-15出版后用不含TPA的培养液传代
3、培养,细胞形态逐渐变化,反映TPA对黑素细胞的致瘤影响逐渐消失,此时获得的黑素细胞更加平安.生长曲线,细胞周期,核型分析结果也印证了这个结论.因此本文建立的两段法培养出的黑素细胞更加适合临床移植应用,将促进白癜风等色素性皮肤病的治疗开展.(图14见插图171页)4参考文献1LemerAB,HalabanR,KlausSN,etalTransplantationofhumanmelanocytes.JInvestDermatol1987;89(3):219242OlssonMJ,JuhlinL.Long-termfollow-upofleucedermapatientstreatedwithtr
4、ansplantsofautologousculturedmelanocytes,ultrathinepidermalsheetsandbasalcelllayersuspension.BrJDermatol2002;147(5):8939043ChenYF,YangPY,HungCM,eta1.Transplantationofautologousculturedmelanocytesfortreatmentoflargesegmentalvitiligo.JAmAcadDermatol2001;44(3):5435NjooMD,WesterhofW,BosJD,eta1.Asystemat
5、icreviewofautologoustrans-plantationMethodsinvitiligo.ArchDermatol1998;134:15439刘源,金岩,王新文,等.高纯度黑色素细胞培养方法的改良【J】.牙体牙髓牙周病杂志,2003,13(1):213丁国斌,陈璧,汤朝武.不同培养条件及时相对黑素细胞生物学特性的影响【J】.中国临床康复,2002,6(24):36656司徒镇强,吴军正.细胞培养【M】.西安:世界图书出版公司,1996:6272EisenbergM,LlewellynDM,MoranK,eta1.Successfulengraftmentofculturedh
6、umanepidermalallograftinachildwithrecessivedystrophicepidermolysisbullosa.MedJAunt1987:147(10):5201HalabanR,GhoshS,DurayP,eta1.Humanmelanocytesculturedfromneviandmelanomas.JInvestDermatol1986;87f1):95101卢涛,高天文,刘玉峰,等.白癜风同种异体黑素细胞移植初步研究【J】.中国皮肤性病学杂志,2001,15(4):2405王军琳,刘源,金岩.等.构建组织工程皮肤种子细胞的人血管内皮细胞的培养【J】
7、.中国临床康复,2003,7(8):12434FreshneyRCultureofanimalcells:amaunualofbasiatechiques4thed.Newyork:Wiley-Liss2000:37880综合康复疗法对胫腓骨骨折术后患者骨折愈合速度的影响张俊红,赵树青(滨州市第二人民医院外科,山东省滨州市256651)摘要:观察50例胫腓骨骨折术后患者,综合康复疗法对促进术后愈合速度的影响.结果说明:康复组患者治疗后愈合速度明显高于对照组,评分差异有非常显着性意义(P<0.01).主题词:综合疗法;康复;骨折;愈合1对象和方法1.1对象本院于1995.02/200301
8、共收治50例胫腓骨骨折患者,手术治疗后,分为康复组和对照组.康复组25例,男14例.女11例;年龄2657岁,平均40岁;胫腓骨中上1/3骨折8例,中段骨折10例,中下1/3骨折7例;稳定性骨折20例,非稳定性骨折5例,术后均行综合康复疗法.对照组25例,男14例,女11例;年龄2555岁,平均48岁;胫腓骨中上1/3骨折7例,中段骨折12例,中下1/3骨折6例;稳定性骨折18例,非稳定性骨折7例,术后行骨科常规治疗.1.2方法康复组:术后35d,患者卧位,患肢股四头肌,拇长与趾长伸肌及小腿三头肌行静力性收缩训练,3次/d,510rain/次.710d,患侧踝趾关节行无痛性主动活动.3次/d,
9、1530rain/次.在保护患侧小腿的同时,髋,膝关节行被动活动训练,对侧肢体做主动活动切I练,Oil练2周后,在足底置放自制弹簧足垫,使髋,膝关节微屈5.10.,进行伸膝抗阻训练,3OZ/d,10min/次.稳定性骨折可采用床边坐位屈髋,屈膝90.,向下压膝训练,力量适度,每日一两次.第48周,家属搀扶站立或在保护下扶双拐站立.单纯横断性骨折可渐行步行活动,逐渐进行髋,膝关节的主动活动训练,加强髋,膝及踝部的肌力训练,以恢复行走能力和加强下肢的稳定性.每次训练完成后,患肢抬高行热敷,按摩:非稳定性骨折仍采用床上伸膝抗阻训练及床边坐位压膝训练.24个月后扶拐行走,Oilg强度逐渐提高,不稳定性
10、骨折可扶拐站立或适度步行.46个月后,加强患肢膝,距小腿关节各组肌群的主动与抗阻训练,患侧上肢持手杖步行,提高低肢负重能力,耐力和行走能力.切口愈合拆线后,在无红肿的情况下给予中药外用.透骨伸筋汤(透骨草,伸筋草各30g,炮山甲20g,赤芍25g,当归15g,乳香,没药各12g)煎汤薰蒸患部,待水温降至适宜时,洗敷,按摩患部,1次/d.对照组:术后行骨科常规治疗,为患者自愿放弃康复训练.评估方法:按Tohnerwmh评分标准I.2结果2.1Tohnerwmh评分结果50例患者均获随访,随访时间一两年.康复组,优20例,良4例,一般1例,优良率96%(24/25);对照组,优15例,良5例,一般
11、5例,优良率80%(20/25).2.2两组骨折愈合时间比拟见表1.表1两组患者治疗后骨折愈合时间比拟(;rt=25,n)3讨论胫腓骨骨折术后的早期康复训练,不仅能维持一定的肌肉收缩活动及关节活动,也能使骨的微循环备用系统开放,增加营养物的输入及代谢产物的排泄;使骨质代谢增强,骨折组织修复能力提高;使骨折端产生生理性压应力,加速骨组织的愈合.透骨伸筋汤通过降低血液黏度,改善微循环和局部血液供给,能有效动员邻近部位的钙沉积在骨折部位,从而促进骨折愈合.4参考文献1JohnerR,WruhsO.Classificationoftibialshaftfracturesandcorrelatewithresultsdterddinternalfntation.ClinOrtp1983;(17s):725收稿日期:2004一O128(03/GX)456789012