《第四章-抗体-局部解剖课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第四章-抗体-局部解剖课件.ppt（49页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、第四章 抗体 Antibody 抗体（Ab）免疫系统在抗原刺激下，由B细胞或记忆B细胞增殖分化所为浆细胞产生的，能与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig），主要分布在血清中、组织液及分泌液中。免疫球蛋白（Ig）具有抗体活性或化学结构上与抗体相似的球蛋白。一、抗体的结构和功能 重链，轻链 可变区和恒定区 铰链区 J链 分泌片Ab基本结构：2条相同重链和2条相同轻链由二硫键连接的Y型对称四肽链结构Heavy Chain,H450-550个氨基酸残基,50-75kD。Ig H链恒定区的氨基酸组成和排列顺序不同（免疫原性不同），分五类。H链 Ig类 Ig亚类 IgG Ig
2、G1,2,3,4 IgA IgA1,IgA2 IgM IgD IgECL CL1、可变区重链和轻链在靠近N端约110个氨基酸的序列变化很大，为可变区(Variable region,V区）重链和轻链的可变区分别称VH（1/4),VL（1/2)可变区和恒定区VH VL CL CL可变区中的高变区(Hypervariable region,HVR)可变区中氨基酸变化较 大的区域，为抗原结合部位,又称互补决定区（complementary-determining region,CDR1、2、3)。决定抗体的特异性的部位。骨架区（framework region,FR1、2、3、4)结构域结构域AAA
3、A二级结构由两二级结构由两个反向折叠的个反向折叠的片层，片层，中心的两个半胱氨酸由中心的两个半胱氨酸由一个链内二硫键垂直连一个链内二硫键垂直连接，形成接，形成 桶状桶状 结构，结构，称为称为免疫球蛋白折叠免疫球蛋白折叠（immunoglobulin immunoglobulin fold,Ig foldfold,Ig fold）。）。V区 中的高变区是与抗原结合部位抗体以结构互补方式结合抗原3、绞链区(Hinge region)：位于IgG、IgA和IgD的CH1和CH2之间1.富含脯氨酸,易于伸展,利于Fab结合抗原。2.易被酶水解 IgM,IgE 无铰链区胃蛋白酶(Pepsin)酶切:铰链
4、区二硫键近C端-1个F(ab)2片段:二价结合抗原-若干pFc小片段:无生物学活性意义:去除Ig分子同种型免疫原性提纯免疫生物制品(免疫马获得的抗毒素)44、JJ链和分泌片链和分泌片 连接链（joining chain,J 链)由浆细胞合成,富含半胱氨酸的一条多肽链.连接IgM形成5聚体、IgA形成2聚体分泌片（secretory piece,SP)由粘膜上皮细胞合成、分泌.保护IgA绞链区.介导IgA二聚体从粘膜下转运 至呼吸腔道表面.J 链分泌片 二、抗体多样性和免疫原性l 多样性（胚系基因重排，抗原选择表现出来）-多种外源性抗原 带有多种表位的同一抗原 同一表位刺激产生不同类型的抗体。-
5、Ig类：Ig G、M、A、E、D Ig亚类：Ig G1、2、3、4 Ig A1、2 Ig型：、。Ig亚型：1、2、3、4。l Ab的免疫原性和三种抗原表位（血清型）-抗体本身又具有免疫原性-三种表位：同种型（isotype)、同种异型(allotype)和独特型(idiotype)。同种型同一种属所有个体的Ig分子共有的抗原性标志（抗原表位），在Ig恒定区。诱导异种动物产生抗同种型抗体。同种型Human Ig GRabbit anti-human Ig G antibodyReact with human IgG antibody同种异型-同一种属不同个体的Ig所具有的不同的抗原性标志，散在分
6、布在Ig恒定区。诱导同一种属不同个体动物产生抗同种异型抗体。-差异有时只有几个AA的差别，稳定遗传。同种异型独特型 同种属、同一个人来源的Ab分子,其免疫原性也会不相同，为独特型，是每个Ab分子所特有的抗原特异性标志,在V区。独特型的表位（idiotope）在异种、同种异体和同一个体内均可刺激产生相应抗体(即抗独特型抗体AId/Ab2)。独特型Ag结合部位（CDR)非Ag结合部位（骨架区)三、抗体的生物功能1、识别、结合抗原-V区CDR，特异性识别结合抗原，中和毒素、阻挡病原体入侵的防御功能。小分子抗原（半抗原）或短肽，一般嵌在 凹槽内，大的抗原分子只有表位与抗体CDR 结合。-IgM、IgD
7、存在在B细胞表面构成BCR识别 结合抗原-不能清除抗原-单体Ab为双价-免疫检测的基础 2、结合补体-C区吸引效应细胞和分子，清除病原体。IgG CH2:结合补体(IgG1、IgG3作用强)CH3:结合表达FcR的效应细胞 IgM CH3:结合补体(最强)-聚合的IgA、E、G4通过旁路途径激活补体.-结合补体的效应：直接裂解病原体细胞 调理吞噬 2）抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(Antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity,ADCC)：指表达Fc受体的杀伤细胞，与包被于靶细胞上抗体的Fc段结合，直接杀伤被抗体包被的靶细胞。NK细胞为主,中性粒，
8、巨噬细胞等。3）介导I型超敏反应 IgE Fc 段(CH2,CH3)与肥大细胞,嗜碱性粒细胞表面高亲和力FcRI受体结合,促使合成、释放炎性介质,致I型超敏反应.3、穿过胎盘或粘膜-母体的IgG可与母体侧滋养层细胞的Fc受体（neonatal FcR,FcRn)结合,转运至胎儿血 液循环.-分泌型IgA与上皮细胞的 pIgR 结合,转运 至泪水、乳汁或呼吸道、消化道腔道表面.Von Behring（inactivated)IgIgG（主力军）人体含量最高的免疫球蛋白：占血清Ig总量的75%80%,IgG1为主 出生后3个月开始合成 唯一能通过胎盘的抗体 再次免疫应答的主要抗体 参与调理吞噬、A
9、DCC 等 四、各类Ab的特性与功能IgM（先头部队）五聚体，分子量最大的Ig,不易通过血管壁 个体发育过程出现最早合成脐带血IgM异常提示宫内感染 初次免疫应答最早产生的抗体感染早期诊断 激活补体能力最强,天然血型抗体多为IgM B细胞抗原受体(BCR)的主要成分 IgA（边防军）lIgA分为血清型和分泌型两种 血清型:单体为主 分泌型:二聚体+J链+分泌片l分泌型IgA:初乳、唾液、泪液 呼吸道,消化道,泌尿生殖道的腔道分泌液。l出生后4-6月开始合成IgAl分泌型IgA 是粘膜局部免疫的重要抗体 IgD 见于个体发育的任何时段 正常血清浓度低 易被蛋白酶水解,半衰期短 mIgD:B细胞分
10、化成熟的重要表面标志 未成熟B细胞:表达mIgM 成熟B细胞:表达mIgM和mIgD IgE 正常血清中含量最低 亲细胞抗体 Fc受体：FcRI和FcRIgE Fc 段(CH2,CH3)与肥大细胞,嗜碱性粒细胞表面高亲和力FcRI受体结合，引起超敏反应。与机体抗寄生虫感染有关 五、人工制备抗体 多克隆抗体（Polyclonal antibody）单克隆抗体（Monoclonal antibody）基因工程抗体（Engineering-based antibody）Polyclonal antibody 大多数抗原具有多个抗原表位,每一表位均能刺激机体的一个特定B细胞克隆产生一种特异性抗体(CD
11、R各不相同).所获抗血清为含有多种抗体的混合物.Monoclonal antibody,mAb由一个识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体。Ig分子结构一致,纯度高,特异性强.由杂交瘤技术制备.l l Engineering-based antibody-改造已有鼠源McAb，减少抗体鼠源成分。如：单链抗体（无Fc段）、嵌合抗体-用人Ig基因组取代小鼠的Ig基因组，建立能产生人源抗体的小鼠-模拟体内系统，在体外构建相应于体内的B细胞库的抗体库，用表达抗体片段的噬菌体克隆来取代B细胞克隆 掌握抗体与免疫球蛋白的概念 掌握免Ab基本结构、功能区及其功能。掌握Ab功能和各类Ab特性与功能。熟悉多克隆抗体、单克隆抗体、基因工程抗体的概念。了解免疫球蛋白的多样性