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1、第四章 真菌病真 真菌 菌：是通过寄生和腐生从其他生物有机体获取营养来源的一类真核生物，具有真正的细胞核和细胞器，细胞壁中含有较多的几丁质和类脂物，缺少叶绿素。桑蚕真菌病亦称硬化病或僵病，在我国各蚕区均有发生，以多湿地区或多湿季节发生较多。因死后尸体上长出不同颜色的分生孢子，可分为白僵、绿僵、黄僵、赤僵等。第一节 白僵病第二节 绿僵病第三节 曲霉病 第四节 真菌病的发生规律 第五节 真菌病的防治 白僵病 白僵病是我国古代最早记载的蚕病。公元前二世纪的神农本草经中药中就有白僵蚕一味：“白僵蚕，味咸，主小儿惊阐夜啼”。公元五世纪左右，陶宏景撰本草经注上记载：“人家养蚕时，有合箔皆僵者”。公元十二世
2、纪，南宋陈甫农书载有：“黑、白、红僵”三种僵蚕。1834年，意大利的微生物学家Bassi A.的两大发现：一、白僵菌是家蚕白僵病的致病因素；二、该菌可以从一个蚕体传染另一个健康蚕体。历史 历史第一节 白僵病一、病原 半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、从梗孢科、白僵菌属、白僵菌。其生长发育分为三个阶段：分生孢子、营养菌丝、气生菌丝。（一）生长发育周期分生孢子附着蚕体壁分泌Pr酶、几丁质酶体壁溶解血液伸长、生长营养菌丝分枝生长，顶端、两侧芽生孢子全身各处 新营养菌丝气生菌丝血液循环蚕死，穿出体壁分生孢子梗 分生孢子着生（二）白僵菌各发育阶段的形态1.分生孢子：球形或卵圆形，2.54.52.34.0m，单
3、细胞，表面光滑，单个存在无色，多个聚集一起呈白色粉末状。2.营养菌丝：长菌丝，无色，有隔膜，在顶端或两侧分化成圆筒形或长卵圆形芽生孢子（短菌丝）。3.气生菌丝：营养菌丝穿出体壁，形成气生菌丝，有隔，能分枝生长。在膨大的柄细胞处常簇生出分生孢子梗，分生孢子梗单或簇生，瓶形，端部呈“之”字形弯曲，在每一弯曲的端部着生一分生孢子小梗，每个小梗上着生一个分生孢子，分生孢子聚集成葡萄状，成熟后脱落，飞散。白僵病蚕血液镜检图（相差镜检，600倍）（三）白僵菌代谢产物1.分泌Pr酶、几丁质酶、脂肪分解酶、纤维素酶和淀粉酶等。作用：溶解体壁。2.白僵菌素：环状多肽类化合物（1）白僵菌素：对蚕毒性小，经口添食1
4、000mg/g以上不显现毒性。（2）白僵菌素：毒性大，人工饲料中4-8mg/l即可使4令蚕致死。作用：与阳离子结合，Pr变性，组织和血液理化性质改变。3.2种黄色素（球孢白僵菌素和卵孢白僵菌素）和1种红色素（卵孢素）4.病蚕血液或尸体中有棱形结晶：第一种看法：菌丝生长代谢过程中产生的有机酸的盐结晶，如草酸钙。第二种看法：白僵菌毒素与Ca+、Mg+等二价阳离子络合形成的结晶。续 处理 浓度 温度 失活时间(min)日光 3238 35h 干热 90 1h 100 30 湿热 100 5 55 30 甲醛 1%20 7 漂白粉 0.2%20 5 盐酸 比重1.075 30s(四)稳定性 常温下5-
5、12个月，虫体上6-12个月，培养基上1-2年，10以下3年，50死亡.白僵菌分生孢子的稳定性较弱！二、病征 初期行动呆滞，食欲减退，后期有时出现针尖状淡褐色不规则小病斑，有时在胸部或尾部气门周围出现1-2个油渍状大病斑。初死蚕头胸伸出，体型特柔软，可在手上任意绕折而不破。死后1-2小时，尸体硬化，经1-2天，从节间膜、口器、气门等处先长出白色的气生菌丝，最后布满全身，并长满分生孢子（白色）。眠中发病蜕皮困难，有些蚕尾部粉红。1.蚕期病征：病蛹弹性降低，环节失去蠕动能力，蛹皮暗淡无光，变黄，死后腹部干瘪，进而全身干瘪，最后在皱褶处及节间膜处逐渐长出气生菌丝及分生孢子（白色）。2.蛹期病征：3.
6、蛾期病征：病蛾腹部干瘪，硬化，翅足易断，最后长出气生菌丝及分生孢子，不能交配产卵，。续三、病变 病蚕死亡前菌丝仅在血液中生长发育，并产生大量芽生孢子，同时分泌各种酶类、毒素并形成结晶，使血液呈浑浊的淡褐色。1.菌体大量繁殖，与蚕争夺营养。2.影响体液生理功能，妨碍血液循环，从而影响其他组织器官正常生理功能。3.分泌毒素，使蚕儿中毒。4.感染末期使消化液抗菌力下降。5.尸体硬化：A 白僵菌吸收散发大量水分，使蚕儿失水。B 分泌毒素，形成结晶，使蛋白质变性（除中肠外所有组织）。四、致病机理1.亚急性传染病：感染死亡，一般3-6天。1-2龄2-3天，3令3-4天，4令4-5天，5令5-6天。2.本病
7、主要发生在大蚕期和上蔟以后。3.高温多湿，发病快。五、发病特点六、诊断1.肉眼诊断 病斑：小斑点、油渍状病斑、尾部粉红。尸体：软化、头胸伸出、硬化、白毛。2.显微镜检查取濒死蚕血液，检有无芽生孢子。第二节 绿僵病一、病原 半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、绿僵菌属、绿僵菌。其生长发育分为三个阶段：分生孢子、营养菌丝、气生菌丝。（一）生长发育周期（同白僵菌）分生孢子附着蚕体壁分泌Pr酶、几丁质酶体壁溶解血液伸长、生长营养菌丝分枝生长，顶端、两侧芽生孢子全身各处 新营养菌丝气生菌丝血液循环蚕死，穿出体壁分生孢子梗 分生孢子着生（二）与白僵菌的区别1.分生孢子绿色，明显卵圆形，一端稍尖，一端略钝，带小梗。
8、2.芽生孢子豆荚状（数个隔膜）。3.分生孢子小梗短而不分枝，顶端串生分生孢子。4.不产生毒素。（三）稳定性 病蚕尸体上的分生孢子在室温下可生存10个月，低温下更长。游离的分生孢子在20时生存95d以上，在5时达150d以上。处理 浓度 温度 失活时间（min）日光 38 180 干热 100 30 湿热 100 35 福尔马林 1%20 20漂白粉 0.2%常温 5绿僵菌分生孢子对理化因素的抵抗性 初期无明显病征，后期食欲减退，行动呆滞，部分病蚕腹侧或背部出现轮纹状黑褐色大病斑（较少出现病斑），初死蚕尸体乳白，洁净，头胸伸出，渐硬化，死后2-3天长出气生菌丝（白绒状）及鲜绿色分生孢子，体表覆盖
9、一层绿色粉末。二、病征注意：3-4令将眠发病，表现为体躯紧张发亮，体色乳白，环节肿胀，节间膜高突，似NPV不眠蚕，但不狂躁爬行，体壁不易破裂，体液中只有芽生孢子而无多角体。血液呈乳白色浑浊，致病机理同白僵.。三、病变及致病机理与NPV蚕血液的区别：1.不如NPV白；2.有散光结晶。1.本病属慢性病，从感染至死亡约7-14天。2.低温多湿环境较易感染。四、发病特点绿僵菌发芽、生长及分生孢子形成最适温度为23晚秋季节，北方蚕区易发生此病！2.显微镜检查：取濒死蚕，剪尾角，检血液，有无豆荚状芽生孢子。五、诊断1.肉眼诊断：病征病斑、尸体等。若眠中发病，需注意与NPV蚕的区别？第三节 曲霉病一、病原
10、半知菌亚门、丝孢纲、丝孢目、曲霉属。已知能寄生蚕体的菌种主要有：黄曲霉群的黄曲霉、寄生曲霉、溜曲霉、米曲霉、棕曲霉群的赭曲霉等1.分生孢子：球形，褐或黄色，3-7m，较白、绿僵菌大，发芽侵入蚕体，主要在真皮细胞层或皮下组织寄生，不侵入血液。（一）曲霉菌的发育及其形态特征2.营养菌丝：具隔膜，分支多，无色或微黄色，但不产生芽生孢子。病尸长出白色绒状气生菌丝，在壁厚而膨大的气生菌丝（足细胞）上长出直立的分生孢子梗，其顶端为膨大呈球形或卵圆形的顶囊，顶囊上发射状生出1-2列棍棒状小梗，小梗顶部生串状的分生孢子。3.气生菌丝：曲霉菌能分泌多种毒素，如黄曲霉素（有多种异构体），其中毒性最强的是黄曲霉素B
11、1，对人和高等动物有致癌作用，对蚕有毒性。（二）曲霉菌的代谢产物在人工饲料中混入1.5mg/kg黄曲霉素B1喂养4龄蚕，经3d后发育停滞，5d后死去一半，6d后全部死亡。英国“火鸡X病”使10万只鸡死亡，其原因是饲料受到了黄曲霉菌的污染。1.影响DNA合成：1）与DNA结合，形成复合物，失去模板作用。2）作用于DNA聚合酶，影响DNA合成。2.影响RNA合成：影响RNA聚合酶活性。3.破坏细胞膜的通透性。4.抑制蛋白质合成酶活性。黄曲霉素对生物的毒害作用：处理 浓度 温度 失活时间 日光 24h 干热 110 20min湿热（蒸煮）100 5min 福尔马林 2%24 30min5h 漂白粉
12、0.3%常温 2030min消特灵 主剂0.3，25 4min 辅剂0.04曲霉菌分生孢子对理化因素的抵抗性（三）稳定性 曲霉菌是家蚕真菌病原中稳定性最强的一种，由于本菌有较强的腐生性，菌丝可侵入竹木蚕具内部生长，有些菌株对甲醛有较强的抵抗性，消毒应注意。续 蚁蚕感染渐停食，体色变黑，体壁紧张，伏于蚕座下不动，2-3天死亡，死后有缢束状凹陷，经1-2天布满气生菌丝及分生孢子，呈绒球状，尸体不腐烂。大蚕发病时，在体壁感染部位出现一褐色大病斑，多在节间膜或肛门处，濒死时头胸伸出，吐液，死后病斑局部硬化，其他部分腐烂变黑。经12天，病斑处长出白色气生菌丝及黄绿色、棕色分生孢子。二、病征 1.蚕期病征
13、：蛹体暗褐，腹部松弛，死后尸体硬化，气门及节间膜处首先长出白色气生菌丝和黄绿色棕色分生孢子。2.蛹期病征：3.卵期病征：蚕卵表面发霉，胚子窒息死亡，卵面凹陷，很快干瘪。血液无病变，蚕儿出现中毒症状，小蚕死亡快，吐液多，尸体局限于病斑处硬化；三、病变及致病机理蛋白酶和黄曲霉素 曲霉菌分生孢子侵入能力差，小蚕期接触发病率高，大蚕期则在节间膜及肛门等表皮薄处侵入，故出现便秘症状。1.本病小蚕期属急性病，2-3天死亡；大蚕期为亚急性，4-6天死亡。2.本病最易感染蚁蚕及1令蚕，大蚕期发病较少。3.高温多湿易发此病。（最适30-35，100%，80%发芽好）。四、发病特点 1.肉眼诊断：病症缢束、病斑等
14、、分生孢子。若观察困难，可将病蚕尸体置于高温多湿环境下培养24-30h，如果有绒球状分生孢子梗和分生孢子长出，即可确诊。2.显微镜检查：取病蚕体壁病斑病蚕体壁病斑下组织，检菌丝体（白色絮状菌丝和褐色分生孢子）。五、诊断生产上常见黑尾病第四节 真菌病的发病规律一、传染源1、病死蚕尸体（长出分生孢子），被污染的蚕室、蚕具、簇室、簇具及离蚕室较近的桑园。2、由于真菌不仅可营寄生生活，还可营腐生生活，故分布广泛。3、分生孢子长在尸体外，暴露于空气中，较轻，可随风传播。4、Bm可与野生昆虫交叉感染此病。5、白僵菌在林业上被做为生物农药应用，成为传染源。6、白僵蚕、僵蛹作为药用生产。续传染源主要是接触传染
15、，其次为创伤传染。二、传染途径1.病原侵染能力：分生孢子表面粗糙，分泌酶、毒素能力2.蚕品种：体壁中抗菌物质及体液中PrE抑制剂活性。3.蚕的发育阶段：蚁蚕、12龄小蚕、各龄起蚕、熟蚕危害较重。4.环境条件：RH70(90以上时，发芽、发育均良好)适宜的温度下才能发芽。三、影响因素（传染条件）白僵菌最适发芽温度为24 28，绿僵22 24，曲霉30 35，一 彻底消毒，最大限度的减少病原数量养蚕前后的消毒，应注意以下几点：熏烟消毒时，门窗密封。液体消毒以浸渍方式为好；喷雾消毒要喷周到；消毒后，蚕室要开窗换气排湿，蚕具充分暴晒。统一行动，统一时间消毒第五节 真菌病的防治二 蚕体蚕座消毒，防僵病发
16、生与蔓延 收蚁后第一次给桑前、各龄饷食，蚕期（上簇后）熏烟一次；多雨季节，多发地区龄中增加一次（用大、小防）；若已发病，坚持每天消毒12次，连续12龄期，至控制。大防：有效成分2.5%；小防：有效成分1.25%。应用防病一号、漂白粉防僵粉、福尔马林草木灰（130）等进行蚕体蚕座消毒，（易感期）。将漂白粉与石灰相混合：大蚕有效氯3%，小蚕有效氯2%。三 控制蚕室蚕具湿度 熏烟、勤除沙、少使用水剂，撒干燥材料、蚕室通风排湿。四 合理处理病蚕、蚕沙发病蚕放入消毒缸内处理后深埋、蚕沙不能施桑园，应制成堆肥发酵后使用 五 防治桑园害虫，防感病害虫污染桑叶及周围环境六 蚕桑产区禁止生产、使用白僵菌农药。七 蛹体防僵：蚕种场除抓好熟蚕及簇具消毒外，可进行蛹体消毒。八 选育饲养抗病性强的蚕品种 推荐材料中国优秀博硕士学位论文全文数据库返回目录.