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1、实验细胞膜的通透性第1 页,本讲稿共1 1 页一、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的难易程度和速度。第2 页,本讲稿共1 1 页溶质通过简单扩散的跨膜运输将红细胞放置在各种等渗溶液中,根据红细胞质膜对各种溶质的渗透性不同,有的溶质可渗入,有的溶质不能渗入。即使能渗入,速度也有差异。可通过观察红细胞溶血现象时间的不同来记录渗入速度。血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压,使水进入红细胞,引起溶血及细胞膜破裂。此时光线较容易通过溶液,使溶液呈现透明即为溶血。由于溶质透入速度不同,溶血时间也不同。因此,可 通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。二
2、、实验原理第3 页,本讲稿共1 1 页 等渗溶液:又称等张溶液。渗透量相当于血浆渗透量的溶液。等张溶液是张力相等,等渗溶液是渗透压相等。等渗:与血浆渗透压相等的溶液,属于物理化学概念。等张:渗透压与红细胞膜张力相等的溶液,属生物学概念。如果分子不能透过细胞膜时,等渗和等张相等。低渗还是高渗还是等渗是根据溶液与血浆的浓度比较而方的,与血浆渗透压相等的溶液称等渗溶液。如5%的葡萄糖溶液或 0.9%的氯化钠溶液。比血浆渗透压低的溶液称低渗溶液。如蒸 馏水等,血浆在低渗溶液中可发生水肿,甚至破裂。比血浆渗透 压高的溶液称高渗溶液,如10%的葡萄糖液或50%葡萄糖液等,细胞在高渗溶液可发生脱水而皱缩。第
3、4 页,本讲稿共1 1 页三、实验用品 1、器材 50 mL 小烧杯,10 mL 移液管,试管(110 cm),试管架。2、试剂 0.17 mol/L氯化钠;0.17 mol/L氯化铵;0.17 mol/L醋酸铵;0.17 mol/L硝酸钠;0.12 mol/L草酸铵;0.12 mol/L硫酸钠;0.32 mol/L葡萄糖;0.32 mol/L甘油;0.32 mol/L乙醇;0.32 mol/L丙酮。3、材料:羊血。第5 页,本讲稿共1 1 页四、实验方法(一)羊血细胞悬液 取50 mL 小烧杯一只,加一份羊血和10份0.17 mol/L氯化钠溶液,形成一种不透明的红色液体,此即稀释的羊血。(
4、二)等渗溶液 取试管一支,加入5mL蒸馏水,再加入3滴稀释的羊血,注意观察溶液颜色的变化,由不透明的红色逐渐澄清,说明红细胞发生破裂造成100红细胞溶血,使光线比较容易透过溶液。第6 页,本讲稿共1 1 页(三)羊红细胞的渗透性 1.取试管一支,加入0.17 mol/L氯化钠溶液5 mL,再加入3滴稀释的羊血,轻轻摇动,注意颜色有无变化?有无溶血现象?2.取试管一支,加入0.17 mol/L氯化铵溶液5 mL,再加入3滴稀释的羊血,轻轻摇动,注意颜色有无变化?有无溶血现象?若发生溶血,记下时间(自加入稀释羊血到溶液变成红色透明澄清所需时间)。3.分别在另外8种等渗溶液中进行同样实验。步骤同2。
5、第7 页,本讲稿共1 1 页第8 页,本讲稿共1 1 页试管编号 是否溶血 时间 结果分析1.5ml氯化钠+1ml稀释鸡血2.5ml氯化铵+1ml稀释鸡血3.5ml醋酸铵+1ml稀释鸡血4.5ml硝酸钠+1ml稀释鸡血5.5ml草酸铵+1ml稀释鸡血6.5ml硫酸钠+1ml稀释鸡血7.5ml葡萄糖+1ml稀释鸡血8.5ml甘油+1ml稀释鸡血9.5ml乙醇+1ml稀释鸡血10.5ml丙酮+1ml稀释鸡血五、实验结果将观察到的现象列入下表,对实验结果进行比较和分析第9 页,本讲稿共1 1 页六、注意事项 1、各管中加入的试剂量要一致,加入的血量也 要一致。2、加入的血量可以少些,但不能多,否则影响 观察。3、试管按编号的顺序加入血,应有一定的时间 间隔,加好一管,计时,混匀后,观察完,再加下一管,再计时,再混匀后观察。第10 页,本讲稿共1 1 页七、作 业 1、将“阴离子相同,而阳离子不同”的试剂一一比对,看看它们有何差别,想想为什么?2、将“阳离子相同,而阴离子不同”的试剂一一比对,看看它们有何差别,想想为什么?3、将炭原子数由少到多、羟基数由少到多的有机溶剂做一比较,看看它们有何差别,想想为什么?多重比较后,请你谈谈细胞膜通透性的基本规律。第1 1 页,本讲稿共1 1 页