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1、实验二实验二 细胞膜的通透性观察细胞膜的通透性观察生命科学学院细胞生物学实验细胞生物学实验一、实验目的:一、实验目的:1、了解溶血现象及其发生机制2、了解各类物质进入细胞的速度 3、了解并掌握细胞渗透实验的原理二、实验原理:二、实验原理:将红细胞放入各种溶液中,由于细胞膜具有选择透过性,有的溶质可以进入细胞,有的不能进入。进入红细胞的溶质可以提高红细胞的渗透压,促使水分进入细胞,导致细胞膨胀,进而破裂,细胞悬液变成红色透明的血红蛋白溶液,这就是溶血现象溶血现象。由于溶质进入细胞的速度不同,因此,溶血时间也不同。u测量指标:测量指标:溶血时间 三、实验用品:三、实验用品:1、试剂:蒸馏水;2种低
2、渗溶液:0.017mol/L 氯化钠和 0.032mol/L 葡萄糖;5种等渗溶液:0.17mol/L氯化钠、0.32mol/L 葡萄糖、0.17mol/L 氯化铵、0.32mol/L 甘油、0.32mol/L 乙醇。2、材料:鸡红细胞悬液(课前制备)3、器材:50ml 烧杯/离心管、1ml移液枪、1ml枪头、试管、试管架、标签纸。1.溶血现象的观察:取试管 1支,加入10 ml 蒸馏水,再加入1 ml 制备好的鸡红细胞悬液轻摇使其混匀,注意观察溶液颜色的变化,由不透明不透明的红色悬液变成红色红色透明透明的血红蛋白溶液。2.红细胞的渗透性观察 取试管一支,加入0.17 mol/L 氯化钠溶液1
3、0 ml,再加入1 ml 制备好的鸡红细胞悬液,轻轻摇动,混匀后静置于温室中,观察试管中发生溶血的时间及其变化发生溶血的时间及其变化。3、显微镜下观察溶血与未溶血溶液中的红细胞形态红细胞形态。四、实验方法与步骤:四、实验方法与步骤:注意事项注意事项:1.溶血现象可用一张有字的纸来辅助识别,透过溶液能够清晰看到溶液后方纸上的字迹时,为完全溶血。2.因相对分子质量大小对膜通透性有影响,所以将溶血时间适当地延长至15min,15min时仍然不溶即判断为不溶血。3.实验过程中肉眼观察溶液颜色变化,记录溶血时间易受主观因素影响,造成偏差,因此应始终由一位同学来观察判断溶血情况,尽量减小这种主观因素导致的偏差。4.测试时,不应强力摇晃,以免造成人为的红细胞破裂。五、作业:五、作业:1、根据观察到的现象完成下面表格。2、如何理解细胞膜是选择性半透膜?试管序号实验内容是否溶血时间结果分析110ml 蒸馏水1ml 稀释血 210ml 0.017mol/L氯化钠1ml 稀释血 310ml 0.032mol/L葡萄糖1ml 稀释血 410ml 0.017mol/L氯化钠1ml稀释血 510ml 0.32mol/L葡萄糖1ml稀释血 610ml 0.17mol/L氯化铵1ml稀释血 710ml 0.32mol/L乙醇1ml稀释血 810ml 0.32mol/L丙三醇1ml稀释血