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1、第33讲微生物的利用第九单元生物技术实践1.大肠杆菌的培养和分离(加试)。2.分离以尿素为氮源的微生物(加试)。考纲要求内容索引考点一微生物的培养和分离考点二分离以尿素为氮源的微生物做模拟练预测课时训练考点一微生物的培养和分离知识梳理答案1.大肠杆菌大肠杆菌(1)特性：大肠杆菌是革兰氏 性、(代谢类型)的肠道杆菌，在肠道中一般对人无害，但若进入人的 系统，就会对人体产生危害。(2)用途：是 技术中被广泛采用的工具。阴兼性厌氧泌尿基因工程2.细菌的培养和分离细菌的培养和分离(1)细菌的繁殖：以 的方式繁殖，分裂速度很快，约20 min分裂一次。(2)培养的方法：需要将已有细菌的培养物转移到新的培
2、养基中，一般用 (工具)转移带菌的培养物。(3)细菌分离的方法与特点答案分裂接种环分离方法特点 法操作简单 法操作复杂，单菌落更易分开划线分离涂布分离3.消毒和灭菌的区别消毒和灭菌的区别项目条件结果常用的方法消毒较为温和的物理或 方法仅杀死 或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、灭菌化学物体表面煮沸高压蒸汽答案4.大肠杆菌的培养和分离实验大肠杆菌的培养和分离实验(1)实验内容：将大肠杆菌扩大培养和划线分离，即用 培养基扩大培养大肠杆菌，培养后再在培养基上划线进行分
3、离，随后培养基上就会形成一个个单独的菌落。答案LB液体LB固体平面(2)实验步骤答案培养基灭菌 划线分离培养观察50 mL LB液体培养基和50 mL LB固体培养基及培养皿 灭菌将培养基分别倒至4个灭菌后的培养皿中，水平放置，使之形成平面在装有液体培养基的 中接种大肠杆菌，培养12 h用接种环在接种有大肠杆菌的三角瓶中蘸菌液一次，在固体培养基的平板上 ，盖好培养皿培养皿倒置(盖在下面)，放在37 恒温培养箱中培养1224 h后，可看到划线的末端出现不连续的 倒平板接种高压蒸汽三角瓶连续划线单个菌落(3)大肠杆菌分离的用途：单菌落的分离是的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。答
4、案消除污染杂菌答案5.微生物接种的两种常用方法比较微生物接种的两种常用方法比较接种环比较划线分离法涂布分离法工具接种环玻璃刮刀原理通过 在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。在数次划线后培养，可以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群体，即菌落将菌液进行 的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落特点方法简单，但不适宜计数单菌落更易分开，但操作复杂些目的使培养基上形成单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体菌落一系列思考诊断答案
5、 1.连线无菌技术的方法、类型及对象2.观察甲、乙、丙、丁四幅图，熟悉倒平板的操作流程，请填空：答案(1)请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程：。(2)甲、乙、丙中的灭菌方法是 。(3)丁中的操作需要等待 才能进行。丙乙甲丁灼烧灭菌平板冷却凝固3.下图中甲为划线分离法中最重要的环节，乙为操作的结果：答案(1)每一次划线后都要将接种环灼烧()(2)除第一次划线外，每一次划线的起点都是第一次划线的末端()提提示示平板划线时除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的末端，而不是第一次。4.如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图，请思考：答案(1)获得图A效果和B效果的接种方
6、法分别是什么？提提示示获得效果A的接种方法为涂布分离法，获得效果B的接种方法为划线分离法。答案(2)某同学在纯化土壤中的细菌时，发现培养基上的菌落连成了一片，最可能的原因是什么？应当怎样操作才可避免此种现象？提提示示最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌；采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌。1.下图为“大肠杆菌的培养和分离”实验的基本流程，请回答下列问题：解解析析LB液体培养基是通用的细菌培养基，LB固体平面培养基则用于划线分离形成单菌落。氯化钠的作用是维持培养基的渗透压。调节好酸碱度后才能进行灭菌，若灭菌后再进行酸碱度调节，又会产生新的污染
7、。解题探究(1)A过程配制的是通用细菌培养基，称为_培养基。配制时除了加入特定的营养物质以外，还要加入一定量的氯化钠，以维持_。对培养基酸碱度的调节，应该在B过程的_(填“前面”或“后面”)。LB液体渗透压前面解析答案123(3)D过程后，一个菌体便会形成一个_，这种分离方法是_ 的通用方法，也是筛选特定菌株的最简便方法之一。消除污染杂菌(或纯化菌种)(2)D过程与C过程相比，培养基中增加的物质是_，E过程所需的温度是_。琼脂4(单)菌落解解析析在液体培养基的基础上加入一定量的琼脂可形成固体培养基。菌种应置于4 C冰箱中保存。解析解析通过划线分离后，一个菌体就会繁殖出一个菌落。解析答案123(
8、4)植物组织培养时，先配制MS培养基，再加入一定比例的植物激素，当生长素相对较多时，可促进_。生根解析答案解解析析植物组织培养中生长素相对较多时，有利于生根，而细胞分裂素相对较多时，则有利于生芽。123(5)植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作，下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是()A.接种环和镊子B.三角瓶和广口瓶C.发芽培养基和生根培养基D.用于培养的幼茎和幼芽解析解解析析高压蒸汽灭菌常用于培养基、培养器材等的灭菌，而用于培养的幼茎和幼芽则不能进行任何灭菌操作，否则会导致细胞死亡。1232.检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水有关的问题：(1)要测定饮用水中
9、大肠杆菌的数量，常采用_法，通常将水样进行一 系 列 的 梯 度 _，然 后 将 上 述 的 水 样 用 玻 璃 刮 刀 分 别 涂 布 到_的表面进行培养，记录菌落数量。用该方法统计样本菌落数时_(填“是”或“否”)需要对照组。原因是_。涂布分离稀释LB固体培养基是 需要判断培养基使用之前是否被杂菌污染(培养基灭菌是否合格)答案123(2)下面所示的四种菌落分布图中，不可能由上述方法得到的是_。(3)大肠杆菌的培养条件是无菌，培养基配制时需加入氯化钠，以维持_。配制培养基时先_后_。A.调节pH B.灭菌C.消毒 D.调节温度渗透压AB答案1233.请回答微生物培养和分离的有关问题：(1)欲
10、从土壤中分离出能利用尿素的细菌：以_为唯一氮源且加入了_指示剂的培养基，用_法分离细菌。若培养基平板上有菌落存活且颜色变_，则说明分离成功。解解析析分离能利用尿素的细菌，只需以尿素为唯一氮源，加酚红指示剂，采用涂布分离法分离细菌，只要培养基中的指示剂变红，标志着存在脲酶水解尿素的反应，证明菌株可以以尿素为氮源。尿素酚红涂布分离(或涂布)红解析答案123(2)分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了LB培养基，其成分_。A.前者含琼脂，后者不含琼脂和琼脂糖B.两者都含有琼脂C.前者含有琼脂糖，后者不含琼脂糖但含琼脂D.两者都不含琼脂和琼脂糖解析解析分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖
11、，而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂。解析返回123考点二分离以尿素为氮源的微生物知识梳理答案1.菌种特点菌种特点含有 酶，可以通过降解尿素作为其生长的氮源。2.培养基培养基用以 为唯一氮源的培养基培养，以 培养基为对照。3.实验原理实验原理(1)筛选以尿素为氮源的微生物，可使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养选择。(2)细菌合成的脲酶能将尿素分解成 ，致使pH升高，使酚红指示剂 。脲尿素LB全营养NH3变红4.实验步骤实验步骤制备培养基：将已灭菌的LB固体培养基和尿素固体培养基分别倒入两个培养皿中，摇匀，平放至凝固制备细菌悬液：用1 g土样配制不同浓度的细菌悬液用 分离细菌：将
12、不同浓度的土壤稀释液分别加到有LB培养基和尿素培养基的培养皿中，并用玻璃刮刀涂布到整个平面上答案涂布分离法培养：将培养皿倒置，在37 恒温箱中培养2448 h观察：培养基中菌落数量答案5.反应的鉴定反应的鉴定在配制培养基时，加入指示剂酚红，培养时细菌将尿素分解并产生碱性的氨，使培养基上菌落周围出现 。红色的环带 只有能分解尿素的微生物才能生长思考诊断答案1.分析下表所示培养基的配方，回答下列问题。成分含量成分含量KH2PO41.4 g葡萄糖10.0 gNa2HPO42.1 g尿素1.0 gMgSO47H2O0.2 g琼脂糖15.0 g将上述物质溶解后，用自来水定容到1 000 mL(1)在该培
13、养基的配方中，为微生物提供碳源的物质是 ，提供氮源的物质是 。(2)该培养基 (填“是”或“否”)具有选择作用，因为 。葡萄糖尿素是2.如图为分离以尿素为氮源的微生物的实验，思考回答问题。答案(1)实验目的是使用含有 的培养基分离能产生 酶的细菌；使用 作为指示剂，由颜色变化检测知酶所催化的反应，相关的反应式为 。(2)制备尿素固体培养基过程中采用的灭菌方法有、G6玻璃漏斗过滤法。(3)从上图所示实验过程中可判断出细菌悬液C的稀释度为 ，用涂布分离法分离细菌。尿素脲酚红(NH2)2COH2O 2NH3CO2高压蒸汽灭菌法1043.判断下列叙述的正误(1)土样应从有哺乳动物排泄物的地方取()(2
14、)取104、105的土壤稀释液各0.1 mL，分别涂布于全营养LB固体培养基、尿素固体培养基上()(3)将实验组和对照组平板倒置，37 C恒温培养2448 h()(4)在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌()答案提示提示有哺乳动物排泄物的地方含脲酶的细菌较多。4.2013年11月22日凌晨3点，青岛黄岛区发生石油泄漏事件，一些微生物可以有效地分解石油，如何配制选择培养基将这类微生物选择出来？答案提提示示配制的选择培养基中，石油作为唯一的碳源，然后用这种培养基培养多种微生物，凡是能在该种培养基上生存的就是能分解石油的微生物。1.现从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如下图所示：
15、解题探究请回答：(1)欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌，将土壤用_进行一系列的梯度稀释，同一浓度的土壤稀释液应至少涂布_个平板，通常以每个培养皿中有_个以内的单菌落的那一组稀释倍数为最合适。无菌水320答案12(2)接种后的培养皿_于37 的恒温箱中培养。若培养基中存在含脲酶的细菌，其菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生氨气，遇培养基中的_产生的颜色变化，从而证明这一菌株能以尿素为氮源。(3)分离能利用尿素的细菌时所用的培养基成分上最主要的特点是_。倒置红色环带酚红指示剂以尿素作为唯一氮源的(固体)培养基答案12(4)下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的是_(多选)。A.称取葡萄糖、琼脂糖等培
16、养基成分B.倒平板C.涂布平板D.微生物的培养(5)与LB全营养培养基上的菌落数相比，尿素培养基上只有少数菌落的原因是_。土壤中能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数答案122.如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程。解解析析脲酶能够催化尿素分解为氨，故图中选择培养基应以尿素作为唯一氮源。由于尿素被分解成了氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，使酚红指示剂变红色。(1)图中选择培养基应以_为唯一氮源；鉴别培养基还需添加_作为指示剂，产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后，其菌落周围的指示剂将变成_色。尿素酚红红解析答案12(2)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0.1 mL
17、，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为13、156、462、178和191。该过程采取的接种方法是_，每克土壤样品中的细菌数量为_108个；与血细胞计数板计数法相比，此计数方法测得的细菌数较_。解析涂布分离法1.75少答案12 1.培养基中观测指标的分析(1)培养基中的酚红指示剂产生颜色变化(变红)，标志着存在脲酶水解尿素的作用，从而证明这一菌株能以尿素为氮源。红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少。红色区域越大，表明菌株利用尿素的能力越强。(2)与全营养培养基上的菌落数比较，尿素培养基上只有少数菌落，这一现象表明能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少部分。归纳整合归纳整合12
18、2.微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用对照组作用现象结论未接种培养基有无杂菌污染的判断未接种的培养皿中无菌落生长未被杂菌污染接种的LB全营养培养基选择培养基筛选作用的确认LB全营养培养基上的菌落数大于选择培养基上的数目选择培养基具有筛选作用12返回做模拟练预测1.(2016温州中学期末测试)下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是()解析A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才有可能得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌12342.在细菌培养过程中，下列有关操作正确的是()A.
19、涂布器用火焰灼烧进行灭菌B.培养基分装到培养皿后进行灭菌C.倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行D.分离得到的菌落应先接种在平板上，培养24 h后，置于4 冰箱中保存解析解析涂布器应该用高压蒸汽灭菌，A项错误；培养基应该先灭菌后分装，B项错误；倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行，以防止杂菌污染，C项正确；分离得到的菌落应先接种在斜面上，置于37 的恒温箱培养24 h后，再置于4 冰箱中保存，D项错误。解析12343.下图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：解解析析分离以尿素为氮源的微生物，应该以尿素为唯一氮源，所以不应有琼脂。解析(1)该实验培养基不能含有_
20、。A.尿素 B.氯化钠C.葡萄糖 D.琼脂1234(2)尿素溶液可用_使之无菌。若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是_。(3)图中步骤C为_。相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是_。G6玻璃漏斗过滤 将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间，观察有无菌落出现倒平板单菌落更易分开1234解析解析尿素用G6玻璃漏斗过滤除去其中细菌等微生物。解析答案(4)如果菌落周围出现_色环带，说明该菌落能分泌脲酶。红1234解析解析若菌落能分泌脲酶，则菌落周围会出现红色环带。解析答案4.(2014浙江自选，17节选)(1)现有一份污水样品，某兴趣小组欲检测其中的细菌数，进行以下实验。将一定量的污水样
21、品进行浓度梯度稀释。取适量不同稀释度的稀释液，用_法分别接种于固体平面培养基上，经培养后进行计数。该实验应注意，接种前，从盛有_的容器中将玻璃刮刀取出，放在酒精灯火焰上灼烧，冷却后待用；分组时，需用_作为对照。涂布分离70%酒精未接种的培养基解析答案1234(2)在上述细菌培养实验中进行计数时，应计数的是接种了()A.各个稀释度样品的培养基上的细菌数B.合理稀释度样品的培养基上的细菌数C.各个稀释度样品的培养基上的菌落数D.合理稀释度样品的培养基上的菌落数解解析析将菌液涂布到固体平面培养基上后，倒置放在恒温箱中培养，培养一段时间后，统计菌落数。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，
22、来源于样品稀释液中的一个活菌，这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目，所以要选择合理稀释度样品的培养基上的菌落数。解析返回1234课时训练一、选择题1.下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤，下列说法错误的是()解析A.步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行B.步骤中，待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖C.步骤中，每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理D.划线接种结束后，将图平板倒置后放入培养箱中培养123456789102.(2016舟山中学期末测试)下列有关微生物培养的叙述中，不正确的是()解析A.获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染B.单菌落的分离是消除污染的杂菌的通用方法C
23、.培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌D.倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落123456789103.(2015普陀中学期末测试)在分解尿素的细菌的分离和鉴定中，对先后用到的两种培养基的叙述正确的是()A.加入酚红指示剂作为鉴别培养基，再加入唯一碳源作为选择培养基B.加入唯一氮源作为鉴别培养基，再加入酚红指示剂作为选择培养基C.加入唯一氮源作为选择培养基，再加入酚红指示剂作为鉴别培养基D.加入酚红指示剂作为选择培养基，再加入唯一碳源作为鉴别培养基解解析析能合成脲酶的细菌才能分解尿素。配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌；细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性
24、增强，在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。解析123456789104.在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()A.筛选出能分解尿素的细菌B.对分离的菌种作进一步鉴定C.作细菌的营养成分D.若指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素解解析析筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定。解析12345678910二、非选择题5.幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：解解析析
25、幽门螺杆菌(Hp)含有脲酶，能以尿素为氮源，在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养Hp，由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的NH3，NH3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色，故菌落周围会出现红色环带。请回答：(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有_，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现_色环带。脲酶红解析答案12345678910(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是_灭菌。A.高压蒸汽 B.紫外灯照射C.70%酒精浸泡 D.过滤解解析析由于尿素加热会分解，对尿素溶液进行灭菌最好用G6玻璃砂漏斗过滤。解析12345678910(3)步骤X表示_。在无菌条件下操作时
26、，先将菌液稀释，然后将菌液_到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得_菌落。解解析析微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中，若不倒置培养，则无法形成单菌落。(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在_中，若不倒置培养，将导致_。接种涂布单恒温培养箱无法形成单菌落解解析析微生物的分离和培养步骤：配制培养基灭菌、倒平板接种培养。为获得单菌落，接种操作前应先将菌液稀释，然后将菌液涂布到培养基平面上即可。解析答案12345678910(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的_分解为NH3和14CO2。解解析析幽门螺杆菌能将14C标记的尿素分解为NH3和14CO
27、2，故临床上常用14C呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在。尿素解析答案123456789106.从土壤中分离以尿素为氮源的细菌，实验过程如图所示：请回答：(1)图中物质A为_，若要统计每克土壤样品中以尿素为氮源的细菌的活菌数目，宜采用_法接种到尿素培养基上，对照组配制的培养基为_培养基，若用同浓度的土壤稀释液接种，实验组培养皿中菌落数 (大于、等于或小于)对照组。在能利用尿素的细菌菌落周围，有红色环带出现的原因是_。无菌水涂布分离LB全营养小于因为能利用尿素的细菌产生的脲酶，将培养基中的尿素分解，产生的氨使指示剂呈红色答案12345678910(2)下列培养基中，能分离出分解尿素的细菌的是()
28、A.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水B.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水、尿素C.NaCl、琼脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物、尿素D.葡萄糖、NaCl、K2HPO4、酚红、琼脂糖、水、蛋白胨、酵母提取物(3)欲将分离得到的以尿素为氮源的细菌进行扩大培养，应使用_培养基。LB液体答案123456789107.(原创)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答问题：(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_为唯一碳源的培养基上。从功能上讲，该培养基属于_(A.固体B.液体C.纯化D.选择)
29、培养基。原油D解解析析可以将所需要的微生物从混杂的微生物群中分离出来的培养基为选择培养基。欲筛选出能降解原油的菌株，培养基中应只含有原油而无其他碳源，这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存，可筛选出能分解原油的菌种。解析答案12345678910(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_。划线分离法和涂布分离法解解析析分离纯化菌种时，接种的方法有划线分离法和涂布分离法，其目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单菌落，以便于纯化菌种。(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围透明圈的大小，透明圈大说明该菌株的降解能力_。强解析解析降解原油能力越
30、强的菌株，在菌落周围形成的透明圈越大。解析答案12345678910(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、_和高压蒸汽灭菌。无菌技术要求实验操作应在酒精灯_附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。干热灭菌火焰解解析析实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌(如接种环)、干热灭菌(如培养皿)和高压蒸汽灭菌(如培养基)等。无菌技术要求整个实验操作都要在酒精灯火焰附近进行，以避免周围微生物的污染。解析答案123456789108.(2016金丽衢十校联考)下表是3组生物实验培养基。请回答下列问题：组别培养基a无机盐、蔗糖、维生素和甘氨酸等有机物、水、琼脂b葡萄糖、NaCl、K2
31、HPO4、尿素、酚红、水、琼脂糖c蛋白胨、酵母提取物、NaCl、水、琼脂(1)分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基_。在含有脲酶的细菌菌落周围会出现_，这是由于尿素被分解产生的_使pH升高，酚红指示剂产生颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力_。b红色环带氨越强12345678910答案(2)用培养基a进行植物组织培养，则培养基中还需加入_。一般先用_ (填“发芽”或“生根”)培养基进行培养，使之长出较多的丛状苗，然后将丛状苗分株培养。植物激素(植物生长调节剂)发芽解解析析植物组织培养所需的MS培养基需加入植物激素。培养过程中一般先用发芽培养基进行培养，
32、使之长出较多的丛状苗，然后将丛状苗分株培养，诱导生根。解析答案12345678910(3)生产上利用黑曲霉或苹果青霉来提取果胶酶，在用果胶酶水解果胶的实验中，下列说法正确的是_。A.实验后滴加酒精的目的是增加果胶酶的活性B.沸水浴加热后果胶酶的活性随着温度的下降逐渐恢复C.间歇搅拌2030 min的目的是让果胶酶与果胶充分接触D.选用黑曲霉提取液是因为果胶酶只能在生物细胞内起催化作用解析解解析析在用果胶酶水解果胶的实验中，实验操作后滴加酒精的目的是检验实验过程中果胶是否被水解；沸水浴加热后果胶酶会失去活性；只要条件适宜，果胶酶在细胞内外均可发挥催化作用。123456789109.(2015宁波
33、鄞州中学练习)有机农药苯磺隆是一种除草剂，长期使用会污染环境，研究发现，苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离能降解苯磺隆菌株的实验过程如下图所示。请回答问题：解析(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、_、_四类，该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源，其原因是_。氮源无机盐只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖12345678910答案(2)纯化菌株时，通常使用的划线工具是_。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是_ 。接种环 将聚集的菌体逐步减少以便获得单个菌落解解析析划线分离法接种时常使用接种环划线。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开
34、始划线。这样做的目的是将聚集的菌体逐步减少以便获得单个菌落。解析答案12345678910(3)若要检测土样中的细菌含量，应采用_法。在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养了一段时间，这样做的目的是_。涂布分离检测培养基平板灭菌是否合格解解析析涂布分离法常常用来进行微生物的分离和计数。为检验培养基平板灭菌是否合格，常常需要在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板培养基先行培养一段时间，观察有无菌落形成，若没有菌落形成则表明培养基灭菌合格，否则不合格。解析答案1234567891010.石油烃是环境的重要污染源。为了筛选出具有强分解石油烃能力的微生物，进行了一系列操作，请回答下列问题：(
35、1)分解石油烃的微生物一般要从土壤中分离，获取土壤样品的取样地点最好选在_。(2)微生物实验室采用_法对培养基进行灭菌处理。A.干热灭菌 B.过滤灭菌C.灼烧灭菌 D.高压蒸汽灭菌石油污染明显处解析解析分解石油烃的微生物在石油污染明显处分布较多。解析解析微生物实验室常用高压蒸汽灭菌法对培养基灭菌。解析答案12345678910(3)下图为获取土壤样品后的培养研究过程：为了能有效地分离出分解石油烃的微生物，过程所用培养基的成分的特点是_，从而有利于分解石油烃的微生物的生长。以石油烃为唯一碳源解解析析实验过程中，过程所用培养基应用石油烃作为唯一碳源，以抑制其他种类微生物的生长，从而分离出以石油烃为
36、碳源的微生物。解析答案12345678910(4)对进行接种常采用的两种方法分别是_和_。(5)若发现在中无法区分菌落，可以将图中取出的菌液_。划线分离法涂布分离法进行(梯度)稀释解析解析在微生物的分离实验中，常用划线分离法或涂布分离法进行接种。解解析析若发现在中无法区分菌落，可能是菌液中细菌浓度太高，可进行梯度稀释处理后再进行接种。解析答案12345678910(6)若实验室为分离纯化优良菌种进行了如下操作，排序最合理的是_。解析A.B.C.D.解解析析图示为用划线分离法进行接种分离。接种过程中应先在酒精灯火焰上灼烧接种环后，蘸取菌液进行接种，整个操作在酒精灯火焰旁进行，接种结束后还须在酒精灯上灼烧接种环。12345678910(7)整个微生物的分离和培养的操作，一定要注意在_条件下进行。无菌解解析析为避免污染，整个微生物的分离和培养的操作，一定要注意在无菌条件下进行。解析答案返回12345678910