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1、第第47讲微生物的培养与应用讲微生物的培养与应用第十三单元第十三单元 生物技术实践生物技术实践第十三单元第十三单元 生物技术实践生物技术实践营营养物养物质质生生长长繁殖繁殖水、碳源、氮源水、碳源、氮源pH特殊特殊营营养物养物质质固体固体液体液体一定体一定体积积称量称量纸纸称量称量纸纸蛋白蛋白胨胨琼琼脂脂pH高高压压蒸汽蒸汽121 1530酒精灯火焰附近酒精灯火焰附近灼灼烧灭烧灭菌菌平板冷却凝固平板冷却凝固单单个个平板划平板划线线稀稀释释涂布平板涂布平板连续连续划划线线梯度稀梯度稀释释涂布平板涂布平板临时临时保藏保藏甘油管藏甘油管藏项项目目条件条件结结果果常用方法常用方法应应用范用范围围消毒消毒
2、较为较为温温和的物和的物理或化理或化学方法学方法仅杀仅杀死物死物体表面或内体表面或内部的部分部的部分对对人体有害的人体有害的微生物微生物煮沸消毒法煮沸消毒法日常用品日常用品巴氏消毒法巴氏消毒法不耐高温不耐高温的液体的液体化学化学药剂药剂消毒法消毒法用酒精擦用酒精擦拭双手,拭双手,用用氯氯气消气消毒水源毒水源项项目目条件条件结结果果常用方法常用方法应应用范用范围围灭灭菌菌强强烈的烈的理化因理化因素素杀杀死物体内外死物体内外所有的微生物,所有的微生物,包括芽包括芽孢孢和和孢孢子子灼灼烧灭烧灭菌法菌法 接种工具接种工具干干热灭热灭菌法菌法玻璃器皿、玻璃器皿、金属工具金属工具高高压压蒸汽蒸汽灭灭菌法菌
3、法培养基及容培养基及容器的器的灭灭菌菌脲脲酶酶催化催化稀稀释释涂布平板涂布平板表表层层30300稀稀释释涂布平板涂布平板303757252834菌落菌落种种类类制制备备方法方法原理原理用途用途举举例例选择选择培养培养基基培养基中培养基中加入某些加入某些化学物化学物质质依据某些微依据某些微生物生物对对某些某些物物质质的特殊的特殊需求或抗性需求或抗性而而设计设计从众多微生从众多微生物中分离所物中分离所需的微生物需的微生物加入青霉素加入青霉素分离得到酵分离得到酵母菌和霉菌母菌和霉菌鉴别鉴别培养培养基基培养基中培养基中加入某种加入某种指示指示剂剂或或化学化学药药品品产产生特定的生特定的颜颜色或其他色或
4、其他变变化化鉴别鉴别不同种不同种类类的微生物的微生物用伊用伊红红美美蓝蓝培养基培养基鉴鉴别别大大肠肠杆菌杆菌尿素尿素酚红酚红红红稀释涂布平板法稀释涂布平板法1.75少少UGA115牛肉膏、蛋白胨牛肉膏、蛋白胨琼脂琼脂将实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖将实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间暴露一段时间污染污染不正确不正确C1酶酶、CX酶酶和葡萄糖苷和葡萄糖苷酶酶纤维二糖纤维二糖刚刚果果红红染色法染色法透明圈透明圈纤维纤维素素纤维纤维素分解菌素分解菌CR的的鉴别纤维鉴别纤维素分解菌素分解菌纤维纤维素素酶酶7075 煮煮30分分钟钟(或或80 煮煮15分分钟钟)牛
5、奶的牛奶的营营养成分不被破坏养成分不被破坏B3.4106偏小偏小个别菌落可能是由个别菌落可能是由2个或多个细菌形成的个或多个细菌形成的伊红伊红美蓝美蓝(金属光泽的紫金属光泽的紫)黑色黑色纤维纤维二糖二糖葡萄糖葡萄糖红红透明圈透明圈酵母膏酵母膏 无机无机盐盐淀粉淀粉纤维纤维素粉素粉琼琼脂脂CR溶液溶液水水培养培养基甲基甲培养培养基乙基乙不能不能液体培养基不能用于分离单菌落液体培养基不能用于分离单菌落不能不能培养基中没有纤维素,不会形成培养基中没有纤维素,不会形成CR纤维素红色复合物,纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌筛选目的菌筛选目的菌选择选择化合物化合物A异养需氧型异养需氧型防止外来杂菌污染防止外来杂菌污染接种环接种环灼烧灭菌灼烧灭菌防止造成环境污染防止造成环境污染不接种的空白培养基不接种的空白培养基检验培养基灭菌是否合格检验培养基灭菌是否合格